Студопедия

Главная страница Случайная страница

КАТЕГОРИИ:

АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника






Тема: Биохимия печени.






ЦЕЛЬ: 1.Обобщить материал по биохимии печени в обмене углеводов, липидов, аминокислот, белков.

2.Изучить обмен гемоглобина.

3.Ознакомиться с методом количественного определения билирубина.

ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ ДЛЯ ПОДГОТОВКИ К ЗАНЯТИЮ.

1. Биологическая роль печени в обмене углеводов, липидов, аминокислот, белков.

2. Важнейшие механизмы обезвреживания веществ в печени: микросомальное окисление, реакции конъюгации / глюкуронидная, сульфатная, аминокислотная/. Примеры обезвреживания ксенобиотиков, продуктов гниения белков. Значение метаболизма лекарственных веществ. Представление о химическом канцерогенезе.

3. Распад гема. Образование билирубина и билирубинглюкуронида. Пути выведения билирубина и других желчных пигментов. Значение определения желчных пигментов для диагностики болезней печени, желчных путей и крови. Понятие о желтухе новорожденных.

4. А. Рассмотреть схему реакций окисления веществ в микросомах:

О2 RH

НАДФН+Н+

цитохром Р-450

НАДФ+

Н2О

RОН

Б. Обратить внимание на то, что цитохром Р-450 катализирует реакции гидроксилирования, в которых органический субстрат RН гидроксилируется до RОН за счет одного из атомов кислорода О2, тогда как второй атом кислорода восстанавливается до Н2О, в результате присоединения восстановительных эквивалентов от НАДН или НАДФН. Таким образом гидроксилируются стероиды в процессе образования гормонов надпочечников, ряд лекарственных препаратов и других чужеродных веществ. В результате гидроксилирования уменьшается токсичность и повышается растворимость чужеродных соединений, что способствует выведению их из организма.

5. Рассмотреть таблицу “Виды желтух”, обратив внимание на

биохимические показатели продуктов обмена билирубина в крови, моче и кале.

Таблица “Виды желтух”

Название желтух Причины возникновения Биохимические показатели продуктов обмена билирубина
Кровь Моча Кал
1. Гемоли-тическая Разрушение эритроцитов Увеличение непрямого билирубина Увеличение уробилина Увеличение уробилина, стеркобилина
2. Паренхи-матозная (печеночно-клеточная) Повреждение клеток печени вирусами, токсическими гепатотропными соединениями Увеличение содержания прямого и непрямого билирубина Появление прямого билирубина снижение уробилина в моче Уменьшение выделение стеркобилина
3.Обтура-ционная (механическая) Механические нарушения оттока желчи в кишечник Увеличение содержания прямого били рубина Увеличение прямого билирубина Отсутствие желчных пигментов

Лабораторная работа.

Работа № 1. Количественное определение билирубина сыворотки крови по методу Иендрашика.

В сыворотке крови содержится два вида билирубина: нерастворимый (в виде комплекса с белками, обеспечивающими транспорт), по способу определения «непрямой» и растворимый (диглюкуронид), по способу определения «прямой». Вместе обе формы составляют общий билирубин.

Определение содержания билирубина в крови является важным диагностическим тестом. Билирубин обычно содержится в крови в небольших количествах – 8, 5 – 20, 5 мкмоль/л, причем 75% из них составляет билирубин, связанный с белками (нерастворимый).

При различных поражениях печени и желтухах часто наблюдается гипербилирубинемия.

Метод основан на колориметрическом определении интенсивности окраски продукта взаимодействия билирубина с диазореактивом. Этот продукт окрашен в малиново-красный цвет. Билирубиндиглюкуронид реагирует с диазосмесью непосредственно. Связанный с белками билирубин реагирует с диазосмесью после диссоциации белкового комплекса, которая достигается прибавлением к сыворотке кофеинового реактива. Диазосмесь готовят (в количестве, достаточном для всей учебной группы), смешивая 10 мл 0, 5%-ного р-ра сульфаниловой кислоты и 0, 3 мл 0, 5%-ного р-ра нитрита натрия.

ХОД РАБОТЫ. Готовят две пробирки (контрольную и опытную).

Составляют реакционную смесь по схеме:

  Проба Сыворотка крови, мл Кофеиновый раствор, мл Дистилли-рованая вода, мл Диазо-смесь, мл
Опытная Контрольная - 3, 5 3, 5 - 0, 5 0, 5

Содержимое опытной и контрольной проб хорошо перемешивают, ставят на 20 мин в темноту, затем колориметрируют на ФЭКе с зеленым светофильтром (длина волны 500-560 нм) против контроля.

Если в пробах развивается слабая окраска, то перед колориметрированием в обе пробирки добавляют по 3 капли 30%-ного р-ра NаОН. При этом цвет р-ра переходит в зеленый, а при большей концентрации билирубина в синий, часто наблюдается исчезновение мути. Пробы колориметрируют на ФЭКе с красным светофильтром. Расчет проводят по калибровочному графику.

ЛИТЕРАТУРА ДЛЯ ПОДГОТОВКИ К ЗАНЯТИЮ. Основная:

1. Берёзов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия: Учебник. – 3-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2002, с. 506-508, 551-566.

2. Биохимия: Учебник/Под ред. Е.С. Северина. –М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003, (Серия XXI век), с. 616-655.

3. Николаев А.Я. Биологическая химия. М.: Медицинское информационное агентство, 2001, с. 411-426.

4. Лекционный материал.

Дополнительная:

1. Бородин Е.А. ‘‘Биохимический диагноз’’, часть 1, Благовещенск, 1991.

2. Бышевский А.Ш., Терсенов О.А. ‘‘Биохимия для врача’’, Екатеринбург, 1994.

3. Клиническая биохимия /Под ред. В.А. Ткачука –М.: ГЭОТАР-МЕД, 2002. -360 с. –(Серия XXI век)

4. Клиническая биохимия /Пер. с англ. –М. –СПб.: «Издательство Бином» - «Невский Диалект» 1999. -368 с., ил.

5. Марри Р. и соавтор. ‘‘Биохимия человека’’ М.: Мир, 1993, т. 1.


Поделиться с друзьями:

mylektsii.su - Мои Лекции - 2015-2024 год. (0.007 сек.)Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав Пожаловаться на материал