Студопедия

Главная страница Случайная страница

КАТЕГОРИИ:

АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника






Экспресс-определение этиленгликоля в моче и плазме, крови методом газовой хроматографии






Этиленгликоль относится к группе «летучих ядов», но имеет очень высо­кую температуру кипения (см. табл. 6). Поэтому для проведения исследования этиленгликоля газохроматографическим методом необходимо использовать ме­тод прямого ввода пробы и прибор, снабженный пламенно-ионизационным де­тектором.

Обнаружение: 2-3 мкл мочи или плазмы крови или извлечения из органов вводят в колонку хроматографа. Чувствительность прибора устанавливается та­ким образом, чтобы при хроматографировании метчика - 100 мг % (16 ммоль/л) раствора этиленгликоля на хроматограмме регистрировался пик высотой не менее 5 см. При условиях исследования биожидкостей на хроматограмме фиксируются и самые низкие токсические концентрации этиленгликоля, идентификация кото­рого осуществляется по абсолютному времени удержания, совпадающему с мет­чиком.

Условия газохроматографического определения: газовый хроматограф с пла­менно-ионизационным детектором, колонка стеклянная, длиной 1, 2 м, внутренним диаметром 3 мм, насадка - Separon BD (100 мкм) или Porapak Q-S (80-100 мкм), газоноситель - гелий со скоростью 45 мл/мин, температура колонки при использо­вании сепарона 180 °С, порапака 200 °С, температура испарителя 220 °С.

5 мкл мочи вводят в испаритель газового хроматографа марки «Цвет-110». Детектор ионизационно-пламенный, колонка № 1 - реоплекс-400 R на хроматоне 0, 16-0, 20 мм, колонка 2-апиезон L на хроматоне N-AW 0, 16-0, 20 мм, температура термостата - 170 °С, температура испарителя - 220 °С, расход газов: азота - 30 мл/мин, водорода - 30 мл/мин, воздуха - 300 мл/мин, пре­дел чувствительности - 10x10, скорость движения диаграммной ленты - 720 мм/час. Время удерживания этиленгликоля на колонке № 1 - 36 мм, на ко­лонке № 2 - 15 мм.

Таблица 6

Время удерживания (мин) важнейших растворителей (водные растворы) на Separon BD, колонка 0, 3x12 см, температура колонки 180 °С, скорость газа носителя — 4 мл/мин

Растворитель Т кип (°С) tабс (мин)
Метанол 67.7 0.50
Этанол 78.4 0, 82
Ацетон 56.2 1.27

 

 

Хлористый метилен 40.0 1, 27
Изопропанол 82.5 1, 33
Эфир диэтиловый 36, 5 1, 53
Пропанол 97.8 1, 67
Хлороформ 61.2 2.33
Этилацетат   2, 50
Гексан 68, 8 2, 67
Дихлорэтан 83, 5 3, 17
Чегырёххлористый углерод 76, 8 3, 17
Изобутанол 107, 5 3, 17
Бензол 80.1 3, 50
Метилцеллозоль 124.6 3, 67
Трихлорэтилен 87.2 3, 67
Бутанол 117.4 4, 00
Этиленгликоль 197, 6 5, 17
Этшщеллозоль 134.8 6.33
Толуол 110.6 7.33
Изоамиловый спирт 119, 9 7, 33
1, 2-Пропиленгликоль   8, 00
Амиловый спирт 138, 0 8, 33

 

Бутилацетат 125, 0 11, 67
М-Ксилол 139, 7 14, 26
О-Ксилол 144, 4 15.56
Тетрагидрофурфуриловый спирт 177, 5 20.00
Фенол 188, 7 28, 00
Диэтиленгликоль 244.8 41, 67
Этилкарбитол 201, 9 55, 00

 

Указанные соединения не мешают определению этиленгликоля. Порядок выхода перечисленных растворителей на Paropak Q-S аналогичен.

Следует отметить, что при исследовании биологических объектов на хроматограммах, как правило, регистрируется фоновый пик со временем удержания, приблизительно равным половине времени удержания этиленгликоля и также не мешающий его определению.

Чувствительность обнаружения этиленгликоля в объектах исследования - 10 мг/% (1, 6 ммоль/л). При содержании этиленгликоля в биологических жидкостях свыше 50 мг % (8 ммоль/л), его количественное определение может проводиться непосредственно в объектах, минуя стадию предварительного изолирования яда.

Разработанные методики позволяют определить этиленгликоль в присутствии других гликолей, в том числе и пропиленгликоля. При гнилостно-разложившемся биоматериале данный метод исследования не используют.

Количественное определение этиленгликоля проводят методом внутреннего стандарта с использованием пропиленгликоля. В случае обнаружения в биологическом материале пропиленгликоля внутренним стандартом является н-бутанол. В пенициллиновом флаконе тщательно смешивают равные объемы исследуемого объекта (моча, плазма крови или извлечение из мочи, крови, внутренних органов и внутреннего стандарта (3% раствор пропиленгликоля). 2-3 мкл смеси вводят в колонку газового хроматографа при описанных выше условиях. Расчет концентрации этиленгликоля в исследуемом объекте произво­дят по предварительно построенному калибровочному графику зависимости от­ношения высот пиков этиленгликоля и пролиленгликоля от концентрации эти­ленгликоля. Калибровочные графики, построенные на водных растворах этиленгликоля, растворам этиленгликоля в плазме крови и моче, практически совпадают между

 

собой, что не требует введения поправочных коэффициентов при расчете содержания этиленгликоля в биологических жидкостях по калибро­вочному графику, построенному по водным растворам. В случаях проведения количественного определения в извлечениях расчет концентрации этиленглико­ля в крови, моче и внутренних органах осуществляется по формуле:

Сэг = Сэг · V · 100 / (n · 100),

где Сэг - концентрация этиленгликоля в крови, моче или внутренних органах, мг % (или моль/л);

Сэг - концентрация этиленгликоля в водном извлечении, мг % (или ммоль/л);

V - объём водного извлечения, мл;

n - объём крови или мочи, взятый для определения, мл, или навеска орга­на, г;

% - усреднённый процент выхода этиленгликоля по методике: для мочи - 73%, для крови - 62%, для внутренних органов - 42%.

 


Поделиться с друзьями:

mylektsii.su - Мои Лекции - 2015-2024 год. (0.007 сек.)Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав Пожаловаться на материал