Главная страница Случайная страница
КАТЕГОРИИ:
АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника
Проведение ТСХ-скрининга веществ кислотного характера
|
|
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 4
Остаток эфирного экстракта из кислого раствора (с предыдущего занятия) растворяют в небольшом объеме хлороформа (3 мл) и наносят в 2 зоны (А и Б) на стартовую линию хроматографической пластинки размером 5× 10 см.
С краю зоны А наносят хлороформный раствор смеси метчиков и хроматографируют в системе хлороформ: ацетон (9: 1). Камеру предварительно насыщают парами растворителя в течение 0, 5 часа.
После высушивания хроматографическую пластинку рассматривают в УФ-свете (светофильтр 254 и 360 нм), отмечают зоны флюоресценции. Затем зону А пластинки обрабатывают 5% раствором ртути сульфата в 5% растворе серной кислоты до полного увлажнения слоя сорбента. Производные барбитуровой кислоты проявляются в виде пятен (полос) белого цвета на просвечивающем фоне (не проявляются этим способом этосуксимид и мепробамат).
Затем после подсушивания зону А пластинки обрабатывают 0, 5% раствором дифенилкарбазона в хлороформе: барбитураты проявляются в виде пятен сине-фиолетового цвета.
После подсушивания пластинки зону А пластинки проявляют 10% раствором хлорида железа (III): производные салициловой кислоты, п-аминофенола и пиразолона проявляются в виде синих пятен.
| ЗОНА 5 | R f 0, 57 − 0, 83 | Бензонал, Диазепам (0, 62), Ноксирон, Бутадион |
| ЗОНА 4 | R f 0, 31 − 0, 41 | Фенобарбитал (0, 31), Барбитал (0, 32), Нитразепам (0, 35), Барбамил (0, 37), Этаминал-натрия (0, 37), Циклобарбитал (0, 41) |
| ЗОНА 3 | R f 0, 19 − 0, 25 | Антипирин (0, 19), Амидопирин, Кофеии (0, 25) |
| ЗОНА 2 | R f 0, 11 − 0, 12 | Мепробамат, Бензойная кислота |
| ЗОНА 1 | R f 0, 00 − 0, 02 | Анальгин, Ацетилсалициловая кислота, Салициловая кислота |
После подсушивания пластинки зону А пластинки проявляют реактивом Драгендорфа и 0, 5 н раствором серной кислоты: производные ксантина (кофеин, теобромин, теофиллин), производные 1, 4-бензодиазепина проявляются в виде желто-коричневых пятен.
В результате изучения хроматографического поведения лекарственных веществ кислого, нейтрального и слабоосновного характера исследуемые вещества распределяют на хроматографические зоны.
Участок силикагеля (зона Б) исследуют на наличие мепробамата – проявляют частным реагентом – 1% раствором ванилина в этаноле.