Сущность р-ии гегглютинации для обнаруживания вирусов.

Аллантоисную жидкость проверяют на содержания вируса путем агглютинации куриных эритроцитов на стекле (и в пробирках – титрование вируса). Для постановки р-ии на стекле к какпле вируссодержащего материала добавляют одну каплю 5%-ной взвеси эритроцитов. Реакция проходит в течение 5 мин.

Реакция торможения гемагглютинации (РГТА) может быть использована для определения типа вируса или типа и титра антител. Для определения типа вирусов на предметное стекло наносят по одной капле вируссодержащего материала (кол-во капель должно соответствовать кол-ву сывороток). В приготовленные капли последовательно вносят по одной капле типовых сывороток. Контролем служит физиологический р-р и норм сыворотка.Затем в каждую каплю вносят по одной капле 5%- ной взвеси эритроцитов. Результат регистрируют через 5 мин.При соответствии вируса типу сыворотки антитела связывают гемагглютин вируса и гемагглютинация не наступает (РГТА положительная). Эта реакция может быть поставлена и в пробирках с целью титрования вируса или антител(антигемагглютинов)

Вопрос 17. Методы микробиологической диагностики вирусных инфекций.

1.Вирусоскопический - обнаружение в исследуемом материале с помощью методов электронной микроскопии вирионов или с помощью светооптических микроскопов внутриклеточных включений.

2.Обнаружение вирусов с помощью методов иммуноэлектронной микроскопии.

3.Вирусологические методы - выделение чистых культур вирусов с использованием культур клеток или куриных эмбрионов.

4.Серологические методы - обнаружение противовирусных антител в сыворотке больного или реконвалесцента с помощью реакций нейтрализации вирусов, реакции связывания комплемента, реакции торможения гемагглютинации, реакций иммуноферментного метода (ИФМ), радиоиммунного метода, (РИМ), реакции пассивной гемагглютинации (РПГА), реакции гемагглютинации иммунного прилипания (комплекс АГ+АТ в присутствии комплемента адсорбируется на эритроцитах), реакций преципитации в агаре, имлунофлуоресцентного метода. В принципе эти реакции могут быть использованы и для обнаружения вирусных ан­тигенов.

5.Биологические методы - заражение чувствительных к данному вирусу лабораторных животных с целью воспроизведения заболевания или последующего выделения вируса.

Вопрос 18. Что такое вирусоскопический метод диагностики?

Вирусоскопический - обнаружение в исследуемом материале с помощью методов электронной микроскопии вирионов или с помощью светооптических микроскопов внутриклеточных включений.

Вопрос 19. Что такое вирусологический метод диагностики?

Вирусологические методы - выделение чистых культур вирусов с использованием культур клеток или куриных эмбрионов.

Вопрос№20 Типы вирусных инфекций

1) инфекции с непродолжительным пребыванием вируса в организме (острая продуктивная инфекция; инаппарантная, бессимптомная инфекция);

2) инфекции с длительным пребыванием (персистенцией) вируса в организме (персистентная, латентная, хроническая, медленная инфекция).

Вопрос№21особенности и механизмы противовирусного иммунитета.

Противовирусный иммунитет включает 3 независимых механизма:

1) вируснейтрализующие антитела, т.е. антитела, блокирующие те рецепторы вируса, с помощью которых он прикрепляется к рецепторам клеток - мишеней (прикрепление вируса к клетке - главный пусковой механизм развития вирусной инфекции); однако этот механизм формируется после перенесенной инфекции, т.е. он в основном - направлен против повторного заражения

2)Т-киллеры распознают чужеродный (вирусный) антиген лишь в том случае, если он представлен белками МНС класса I. Т-киллеры распознают их своими рецепторами, атакуют и уничтожают инфицированную клетку вместе с вирусом.

3) три типа интерферонов (α, β, γ), которые наряду с противоопухолевым, иммуномодулирующим, антибактериальным обладают и широким спектром противовирусного действия. Интерферон не действует непосредственно на вирус и не препятствует проникновению его в клетку. Интерферон блокирует внутриклеточное размножение вируса. Антивирусная активность интерферонов может быть реализована с помощью разных механизмов, в зависимости, очевидно, от типа клеток, в которые проникает вирус, и от типа интерферона. Один из механизмов такого действия заключается в том, что он индуцирует синтез протеинкиназы, которая фосфорилизует α -субъединицу белкового фактора инициации eIF2. В результате этого блокируется обменная реакция ГДФ -ГТФ и происходит остановка биосинтеза белка на стадии инициации трансляции. В иных случаях под влиянием интерферона активируется эндонуклеаза, разрушающая РНК, в том числе и мРНК.

Вопрос№22механизмы персистирования вирусов в организме Персистенция (лат. persisto — постоянно пребывать, оставаться) — длительное пребывание инфекта в организме животных и человека либо без клинических патологических проявлений (латентное течение, ремиссия инфекционного процесса), либо способных при определенных условиях (иммунный дисбаланс и иммунная недостаточность различной этиологии — стресс, переохлаждение, интеркуррентная инфекция, обстрение хронического заболевания и т.д.) к активации с исходом в заболевание (активное течение, обострение инфекционного процесса). В механизме развития и активации персистирующей инфекции значительная роль отводится блокированию процессов апоптоза клеток хозяина.В группу патогенов, способных к персистирующему течению, относят возбудителей инфекции, в большей части обладающих свойствами внутриклеточного существования в макрорганизме. Это некоторые бактерии (хламидии, микоплазмы, хеликобактер и др.), но главным образом — вирусы (группа герпесвирусов, гепатита, ВИЧ и многие другие), токсоплазмы и др. Вызываемый ими инфекционный процесс развивается медленно, возбудитель стремится быть не узнанным иммунной системой и сохранить себя в человеческих популяциях, интегрируясь с геномом человека (ретровирусы, герпесвирусы, вирус гепатита В, С, хламидии, микоплазмы, токсоплазмы и др.), либо как плазменное образование. Продолжительность таких инфекционных процессов не лимитируется иммунной системой хозяина. Эпидемическая цепочка ограничивается лишь количеством человеческих особей в популяции, поэтому распространение некоторых паразитических микроорганизмов приобрело характер пандемии (ВИЧ, вирус гепатита В, некоторые виды вирусов герпеса, хламидии, микоплазмы).