Примечания. 1. Выбор питательной среды является одним из важных факторов

1. Выбор питательной среды является одним из важных факторов. Базовой средой для культивирования бактерий является среда № 1(МПА)·, среда №2 (агар Сабуро) и солодовый агар для культивирования дрожжей и мицелиальных грибов··. Посевы бактерий выращивают в термостате при t 35–40 °С в течение 24–48 ч, культуры дрожжей и грибов – при t 25–30 °С в течение 72 и более часов.

2. Перед отбором проб разлитые на чашки Петри или пластины питательные среды выдерживают в термостате при 137 °С в течение 24 ч для подтверждения стерильности. Проросшие чашки бракуют.

3. Ростовые свойства питательных сред должны быть проверены соответствующими тест-штаммами.

3.2. Микроорганизмы, выросшие на чашке Петри, подлежат макро- и микроскопической идентификации. К макроскопическим признакам относятся форма и размеры колоний, цвет, консистенция, к микроскопическим признакам – форма (кокки, бациллы, овоиды и т. п.), подвижность (количество жгутиков), отношение к окраске по Граму, наличие спор и капсул.

3.3. Для дальнейшей индикации и дифференциации микроорганизмов могут быть использованы биохимические методы, различные автоматизированные системы, а также любые современные методы идентификации микроорганизмов.

3.4. Предел измерения от 1 до 5 х 106 кл/м³.

4. Приборы и посуда

4.1. Для бактериологического анализа воздуха используют импактор воздуха микробиологический «Флора-100» (ТУ 64-098-33–95).

Примечание. Современная отечественная модель – высокопроизводительный импактор «Флора 100» работает в автоматическом режиме, отбирает заданный объем воздуха и осаждает биологический аэрозоль на чашку Петри с плотной питательной средой. Импактор полностью заменяет широко используемый для контроля прибор Кратова и превосходит его по всем техническим характеристикам (точность определения, масса, габариты, скорость пробоотбора, автоматический контроль параметров пробоотбора и диагностики неисправностей).

Импактор «Флора 100» прошел государственные испытания и рекомендован Комитетом по новой технике (протокол № 7 от 26.12.95) к применению в медицинской практике.

4.2. Методику проведения контроля с использованием импактора «Флора-100» рекомендуется согласовывать с разработчиком импактора для уточнения времени аспирации в зависимости от особенностей контролируемой микрофлоры.

4.3. Прибор для бактериологического анализа воздуха, модель 818 (ТУ 64-1-791–77).

4.4. Секундомер ГОСТ 9586–75

4.5. Чашки бактериологические, плоскодонные, стеклянные диаметром 100 мм, ГОСТ 10937–75.

4.6. Термостаты электрические суховоздушные, типа ТС, ТУ 64-1-1382–76.

4.7. Пипетки мерные, ГОСТ 1770–74.

4.8. Колбы конические, ГОСТ 1770–74.

4.9. Весы аналитические ВЛА-200-М.

4.10. Камера для стерильной сушки чашек Петри типа ЕМЗ 804-014СП.

5. Методика проведения контроля

5.1. Воздух аспирируют со скоростью от 10–20 до 150–200 л/мин на поверхность плотной питательной среды на чашках Петри.

5.2. Время аспирации (2–10 мин) зависит от концентрации микроорганизма в воздухе.

5.3. Термостатирование чашек Петри с пробами воздуха производится при температуре 25–40 °С в зависимости от биологической характеристики микроорганизма.

5.4. Метод предполагает учет по типичным морфологическим признакам количества колоний, выросших на 2–4 сутки и более после посева пробы воздуха в зависимости от видовой принадлежности микроорганизма.

5.5. Прямой метод позволяет учитывать на чашке Петри до 150–200 колоний. Результаты рассчитывают в кл/м.

Примечание. Проблемной комиссии по гигиеническому нормированию с целью унификации методических подходов принято согласованное решение единицей измерения принять «клетки» (а не колониеобразующие клетки, хотя это правильно).

Единицы измерения указывать обязательно.

5.6. Результаты замеров вносятся в протокол.

Протокол
оценки содержания промышленных штаммов микроорганизмов
в воздухе рабочей зоны (рекомендуемый)

1. Дата Ф., И., О. работающего (рабочее место) ________________________________________ _________________________________________________________________________________2. Профессия _____________________________________________________________________ 3. Производство __________________________________________________________________ 4. Участок(технологическая стадия, операция) ________________________________________ 5. Точка отбора (наименование оборудования у которого производится отбор) _____________ _________________________________________________________________________________6. Вид пробоотборника ____________________________________________________________ 7. Дата последней метрологической поверки оборудования для отбора проб _______________ 8. Микроорганизм, содержание которого контролируется (род, вид, штамм) _______________ 9. Питательная среда, оптимум роста, время инкубации _________________________________ 10. Количественная и качественная характеристика выросших колоний (морфологические признаки – форма, цвет, консистенция; окраска по Граму; количество типичных колоний) _________________________________________________________________________________11. Результаты идентификации микроорганизмов с указанием метода _____________________ 12. Результаты расчёта концентрации микроорганизма (кл/м) ___________________________ 13. Соотношение полученных результатов с уровнем ПДК_р.з.____________________________ Отбор пробы произведен:

_______________________________(Ф., П., О., должность) ________________ (подпись, дата)

Идентификация штамма и расчёт концентрации произведен:

_______________________________(Ф., П., О., должность) ________________ (подпись, дата)

Приложение 11

(справочное)