![]() Главная страница Случайная страница КАТЕГОРИИ: АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника |
В организм животного
Микроинъекция раствора ДНК. Получение трансгенных животных путём микроинъекции гена включает следующие этапы: 1. Гормональную индукцию охоты и полиовуляции по имеющейся для каждого вида животных схеме; 2. Осеменение; 3. Извлечение оплодотворённых яйцеклеток посредством промывания яйцеводов, полученных от забитых на мясокомбинате животных-доноров. 4. Проведение микроинъекции в зиготу. Для этого необходимо осуществление следующих мероприятий: -на максимально устойчивый рабочий стол устанавливают микроскоп, два микроманипулятора для управления удерживающей и инъекционной пипетками и прибор для регулирования инъекционного давления (рис. 9.5; 1); - на столике микроскопа устанавливают инъекционную камеру со средой, покрытой парафиновым маслом; - в среду помещают зиготы; - кончик инъекционной пипетки (внутренний диаметр не более 1 мкм) наполняют раствором ДНК (рис. 9.5; 2); -для инъекции зиготы фиксируют на удерживающей пипетке так, чтобы инъецируемый пронуклеус был хорошо виден (рис. 9.5; 3); - для инъекции пипетку через прозрачную оболочку и клеточную мембрану вводят в пронуклеус (ядро), после чего в него инъецируют 1-2 пкл раствора ДНК (9.5; 4). - о точности операции судят по набуханию пронуклеуса. Только такое визуальное увеличение объёма ядра свидетельствует о том, что раствор ДНК был действительно введён в пронуклеус; 1 2 3 4 5
Рис. 9.5. Основные элементы технологии микроинъекции раствора
|