Самостійна аудиторна робота. 1. Охарактеризуйте метаболічні шляхи в м'язах: Тип м'язів Особливості будови Метаболічні шляхи Порушення

1. Охарактеризуйте метаболічні шляхи в м'язах:

2. Виконати лабораторні роботи „Визначення креатиніну в сироватці крові”.

Принцип методу. Креатинін при взаємодії з пікриновою кислотою в лужному середовищі утворює червоний таутомер пікрату креатиніну, який зумовлює появу стійкого оранжево-червоного забарвлення. Інтенсивність забарвлення пропорційна концентрації креатиніну. Вміст креатиніну в сироватці крові в нормі складає 50-100 мкмоль/л.

Хід роботи. До 2 мл сироватки додають 6 мл насиченого розчину пікринової кислоти. Через 5 хв пробірку ставлять на 15-20 сек. в киплячу водяну баню. Вміст пробірки центрифугують або фільтрують, після чого відбирають 4 мл надосадкової рідини і виливають в іншу пробірку. До центрифугату додають 0, 2 мл 10% розчину їдкого натрію і добре перемішують. Якщо з'являється помутніння, яке може бути в результаті випадання в осад фосфатів, розчин центрифугують. Загальний об’єм розчину доводять дистильованою водою до 10 мл і залишають на 10 хвилин. Після цього колориметрують, порівнюючи з контрольною пробою при зеленому світлофільтрі (довжина хвилі 525 нм) в кюветі з товщиною шару 20 мм. Екстинкцію визначають не пізніше ніж через 20 хвилин після додавання їдкого натрію.

Контрольну пробу ставлять паралельно. Для цього до 3 мл насиченого розчину пікринової кислоти додають 0, 2 мл 10% розчину їдкого натрію і загальний об’єм доводять дистильованою водою до 10 мл.

Для стандартної проби замість сироватки беруть 2 мл робочого стандартного розчину, в якому концентрація креатиніну дорівнює 0, 1 ммоль/л. Проби при цьому не центрифугують.

Розрахунок концентрації креатиніну (Х) проводять за формулою:

Е_досл

Х = --------- х 0, 1 ммоль/л

Е_ст

де

Е_досл - екстинкція дослідної проби;

Е_ст - екстинкція стандартної проби;

0, 1 – концентрація креатиніну в стандартній пробі, ммоль/л.

Необхідно пам’ятати, що прямолінійна залежність між величиною екстинкції і вмістом креатиніну зберігається тільки при його концентрації в межах 0, 026-0, 352 ммоль/л.

Клініко-діагностичне значення

Визначення креатиніну проводять для дослідження функції нирок. Вміст його в сироватці крові збільшується при значному порушенні функції нирок. Подвоєння, наприклад, вмісту креатиніну в крові відповідає зниженню фільтрації на 50%.

Підвищення вмісту креатиніну в крові може бути при кишковій непрохідності, закупорці сечовивідних шляхів, гіперфункції наднирників, при вагітності.