Методы исследования в гситологии.

Современные методы исследования позволяют изучать ткани не только как единое целое, но и выделять из них отдельные типы клеток для изучения их жизнедеятельности в течение длительного времени, выделять отдельные клеточные органеллы и составляющие их макромолекулы (например, ДНК), исследовать их функциональные особенности.

Основными методами изучения биологических микрообъектов являются световая и электронная микроскопия.

Микроскопирование — основной метод изучения микрообъектов, используемый в биологии более 300 лет. С момента создания и применения первых микроскопов они постоянно совершенствовались. Современные микроскопы представляют собой разнообразные сложные оптические системы, обладающие высокой разрешающей способностью.

Для изучения гистологических микрообъектов применяют обычные световые микроскопы и их разновидности, в которых используются источники света с различными длинами волн. В обычных световых микроскопах источником освещения служит естественный или искусственный свет. Минимальная длина волны видимой части спектра равна примерно 0, 4 мкм.

В световом микроскопе можно видеть не только отдельные клетки размером от 4 до 150 мкм, но и их внутриклеточные структуры — органеллы, включения. Для усиления контрастности микрообъектов применяют их окрашивание.

Разновидности световой микроскопии: 1) ультрафиолетовое микроскопирование, 2)флюоресцентная, 3) фазово-контрастная, 4) Микроскопия в темном поле, 5) Интерференционная микроскопия.

В электронном микроскопе используется поток электронов с более короткими, чем в световом микроскопе, длинами волн. При напряжении 50 000 В длина волны электромагнитных колебаний, возникающих при движении потока электронов в вакууме, равна 0, 0056 нм. Теоретически рассчитано, что разрешаемое расстояние в этих условиях может быть около 0, 002 нм, или 0, 000002 мкм, т.е. в 100 000 раз меньше, чем в световом микроскопе. Практически в современных электронных микроскопах разрешаемое расстояние составляет около 0, 1—0, 7 нм.

В настоящее время широко используются трансмиссионные (просвечивающие) электронные микроскопы (ТЭМ) и сканирующие (растровые) электронные микроскопы (СЭМ).

Главными достоинствами растровой электронной микроскопии являются большая глубина резкости, широкий диапазон непрерывного изменения увеличения (от десятков до десятков тысяч раз) и высокая разрешающая способность.

4. Биологические мембраны: их строение.

Одной из основных особенностей эукариотических клеток является изобилие и сложность внутренних мембран. Мембраны отграничивают цитоплазму от окружающей среды. Мембраны образуют лизосомы, крупные и мелкие вакуоли растительных и грибных клеток. Без мембран существование клетки невозможна.

Плазматические мембраны – наиболее постоянная универсальная для всех клеток мембрана. Она представляет собой тончайшую пленку покрывающую всю клетку. Плазмолемма состоит из белков и фосфолипидов. В состав плазмолеммы эукариотических клеток входят также полисахариды. Полисахаридный слой толщиной 10-20 нм, покрывающий сверху плазмолемму животных клеток, получил название гликокаликс.

Все клеточные мембраны представляют собой подвижные текучие структуры, поскольку молекулы липидов и белков не связаны между собой ковалентными связями и способны достаточно быстро перемещаться по плоскости мембраны.

Мембраны разных клеток существенно различаются как по химическому составу, так и по относительному содержанию в них белков, гликопротеинов, липидов.