Введение. Сохранение иммунологической памяти в течение 13 лет у реципиентов рекомбинантной HBV вакцины.

Сохранение иммунологической памяти в течение 13 лет у реципиентов рекомбинантной HBV вакцины.

Barbara Watson ^a*, David J. West ^b, Andrew Chilkatowsky ^a,

Sharon Piercy ^a, Virginia A. Ioli ^b

^a Albert Einstein Medical Center & The Philadelphia Department of Healt h, D i 6ision of Disease Contro l, Immunization Progra m,

500 S. Broad Stree t, Philadelphi a, PA 19146, USA

^b Merck Research Laboratorie s, West Poin t, PA 19486, USA

Реферат

Все участники настоящего клинического исследования дали письменное согласие на его проведение с учетом рекомендаций, касающихся экспериментов с участием людей. Бустерная доза вакцины, введенная 18 подросткам (иммунизированным в детском возрасте) и 7 взрослым людям, прошедшим 13 годами ранее курс вакцинации (3 дозы) рекомбинантной вакциной против гепатита В, индуцировала мощный вторичный гуморальный ответ, подтвердив наличие иммунологической памяти к HBsAG у вакцинируемых. Через неделю после бустерной вакцинации GMT анти-HBs выросли в 11-24 раза, достигнув 52-319-кратного увеличения по истечении 4 недель. Обращает на себя внимание тот факт, что выраженный иммунный ответ на бустерную дозу вакцины наблюдался даже у тех участников исследования (5человек), у которых титр анти-HBs до бустерной иммунизации составлял менее 10 mIU/ml.

Введение

Первостепенной задачей программ вакцинации против гепатита В является достижение максимального охвата прививками путем проведения первичного курса иммунизации, в результате которого у преобладающей части вакцинируемых формируется протективный уровень антител. Многочисленные исследования эффективности плазменных HBV вакцин продемонстрировали пост-вакцинальное образование антител к HBsAg (анти-HBs) на уровне, превышающем или равном 10 милли-Международных Единиц в 1 миллилитре сыворотки (mIU/ml), что обеспечивает защиту от клинически выраженной HBV-инфекции [1]. Однако, насколько продолжителен пост-вакцинальный иммунитет? Существует ли необходимость по прошествии очень длительного периода времени в бустерной дозе вакцины для поддержания иммунитета?

Уровень анти-HBs, как было показано, падает после завершения курса вакцинации, особенно стремительно в первый год и более плавно - в последующие [2]. В то время, как скорость снижения содержания антител не зависит от первоначального поствакцинального титра, у вакцинируемых с более высокими титрами, как было показано, антитела сохраняются в течение более длительного периода времени. Однако, здоровые вакцинируемые, у которых уже не обнаруживаются антитела, сохраняют HBsAg-специфические лимфоциты [3]. Стимуляция таких клеток памяти HBsAg вызывает стремительную пролиферацию клеток, приводящую к развитию мощного вторичного (анамнестического) увеличения титра анти- HBs. В 1995 году, просмотрев литературу, мы обнаружили 10 сообщений о том, что здоровые люди, адекватно отреагировавшие на первичный курс иммунизации против гепатита В, в том числе и те, у которых впоследствии анти- HBs антитела не выявлялись, на введение бустерной дозы вакцины через 5-12 лет отвечали бурным вторичным увеличением титров специфических антител [1]. Если этот вид иммунного ответа на антигенную стимуляцию с участием клеток памяти, сопровождающийся синтезом антител, отражает путь, по которому вакцинируемый отреагировал бы на реальную “атаку” вируса, то, возможно, в бустерной вакцинации для поддержки иммунологической защиты от инфекции и нет необходимости. Действительно, данные 13 длительных наблюдений за здоровыми людьми, входящими в группу риска и прошедшими вакцинацию, подтверждают, что вакцин-индуцированная иммунологическая память обеспечивает иммунную защиту, несмотря на то, что уровень сывороточных антител падает [1]. Многие из участников этих исследований имели изолированное повышение анти- HBs, у некоторых из них сероконверсия с образованием антител к ядерному антигену HBV (анти-HBc) свидетельствовала о легком течении инфекции. Однако, ни у одного не было зарегистрировано клинически выраженного гепатита В, и лишь небольшая часть оказалась HBsAg-позитивной. В 1998 году группа Европейских экспертов, проанализировав данные дополнительных исследований, пришла к выводу, что вакцин-индуцируемая иммунологическая память сохраняется, по крайней мере, на протяжении 15 лет, однако на вопрос: «существует ли необходимость в бустерной вакцинации для поддержания протективного иммунитета и, если существует, то когда?» могут ответить только более долговременные исследования [4].

Большинство из опубликованных данных о персистенции вакцин-индуцируемой иммунологической памяти через пять лет и более касаются субъектов, вакцинированных одной из первого поколения плазменных вакцин против гепатита В. Поскольку сегодня плазменные вакцины активно вытесняются рекомбинантными, очень важно показать, что последние также приводят к появлению долгоживущих клеток иммунологической памяти. Настоящая статья представляет результаты наблюдения за состоянием иммунологической памяти в небольшой группе здоровых подростков (иммунизированных в детском возрасте, от 13 месяцев до 9 лет) и взрослых, 13 годами ранее прошедших первичный курс иммунизации рекомбинантной HBV вакциной RECOMBIVAX HB^Ò .

Методы

Протокол исследования и согласительная форма были одобрены AEMCIRB (Albert Einstein Medical Center Institutional Review Board). Списки были составлены из участников предыдущего исследования, проведенного в 1984-1985 гг.., у которых титры анти-HBs после завершения первичного курса иммунизации рекомбинантной вакциной против гепатита В (три дозы RECOMBIVAX HB^Ò , Merck & Co., Inc.) составляли ³ 10 mIU/ml. В группу обследуемых вошли подростки, привитые в детском возрасте (1-10 лет) и взрослые, не получавшие какой-либо дополнительной дозы вакцины. Все участники предыдущего исследования вакцинировались с интервалами 0, 1, 6 месяцев; дети получали HBsAg в дозировке 1.25 mcg/0.25 ml, 2.5 mcg/0.5 ml или 5 mcg/0.5 ml, взрослые – 10 mcg/1.0 ml. В списки потенциальных кандидатов вошли 80 человек, вакцинированных в детском возрасте и 18 взрослых. Всем им было сообщено о предстоящем исследовании почтовым сообщением, за которым через две недели следовал телефонный звонок. Три письма и телефонный звонок были адресованы тем, с кем не удалось установить связь с первой попытки.

Процедура исследования включала (1) опрос относительно проведения бустерной вакцинации или возможного контакта с HBV (прошедшие бустерную вакцинацию не могли участвовать в исследовании); (2) исходный анализ крови на наличие анти-HBs и тест на анти-HBc; (3) введение 5 mcg/0.5 ml бустерной дозы RECOMBIVAX HB^Ò подросткам, прошедшим первичный курс иммунизации в детском возрасте (Группа 1), или 10 mcg/1.0 ml бустерной дозы RECOMBIVAX HB^Ò - тем, кто прививался уже во взрослом возрасте (Группа 2); (4) анализ крови через 1 и 4 недели после бустерной вакцинации для оценки анти-HBs ответа. Участникам исследования были выданы вакцинальные регистрационные карты, в которых их просили записывать температуру тела через 4-6 часов после прививки и ежедневно в одно и то же время в течение 5 дней, а также отмечать любые реакции в месте инъекции или жалобы общего характера.

Проба сыворотки “пред-вакцинального” образца крови отправлялась в CCLS (Covance Central Laboratories Services – Indianapolis, IN), где проводилось тестирование на предмет наличия анти-HBc иммуноферментным анализом (ИФА). Равное количество сыворотки «пред-вакцинального» образца, а также крови, взятой через 1 и 4 недели после бустерной вакцинации, проходили анализ в Исследовательской Лаборатории Merck (West point, PA) радиоиммунным методом с использованием тест-систем AUSAB^Ò (Abbott Laboratories – North Chicago, IL).

За анамнестический (вторичный) ответ на бустерную вакцинацию принималось четырех- или более кратное увеличение титра анти-HBs через 1 неделю после иммунизации у тех вакцинируемых, у которых были обнаружены антитела при предварительном обследовании, или появление анти- HBs в титре ³ 10 mIU/ml у тех, у кого их до введения бустерной дозы не было.