Главная страница Случайная страница
КАТЕГОРИИ:
АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника
Реактивы для оксидазного теста
|
|
Вариант 1.
Раствор 1%-ный водный тетраметил-п-фенилендиамина гидрохлорида. Готовят перед употреблением.
Вариант 2.
Реактив N 1. Раствор 1 %-ный спиртовой α -нафтола.
Реактив N 2. Раствор 1 %-ный водный диметил-п-фенилендиамина дигидрохлорида.
Растворы сохраняют в темных флаконах с притертыми пробками: 1-й - до одного месяца, 2-й - до одной недели. Перед употреблением к трем частям первого раствора добавляют семь частей второго раствора.
Могут быть использованы коммерческие тест-системы для постановки оксидазного теста (СИБ-оксидаза или аналоги). Каждую новую партию и периодически раз в месяц реактивы или тест-системы на оксидазу следует испытывать с тест-культурами микроорганизмов, дающих положительную (Ps. aeruginosa, Ps. fluorescens) и отрицательную (Е. coli) оксидазную реакцию.
Железосульфитный агар
В 1000 мл стерильного расплавленного питательного агара (по п. 2.4.4) добавляют 10 г глюкозы, нагревают до растворения, разливают мерно во флаконы, автоклавируют при (112 ± 2) °С 12 мин (основная среда).
Непосредственно перед употреблением готовят 20 %-ный раствор сульфита натрия (Na2SO3) и 8%-ный раствор железа серно-кислого закисного (FeSO4) или железа хлористого (FeCl2) в стерильной посуде на стерильной дистиллированной воде. Раствор сульфита натрия нагревают до полного растворения. Перед выполнением анализа в 100 мл расплавленной основной среды вносят 5 мл 20 %-ного раствора сульфита натрия, перемешивают, затем вносят 1 мл 8 %-ного раствора серно-кислого железа, перемешивают и стерильно разливают во флаконы.
Щелочно-полимиксиновая среда (ЩЕС)
| Ингредиенты | Обычная концентрация | Удвоенная концентрация |
| 1. Мясопептонный бульон | 70, 0 мл | 70, 0 мл |
| Натрий хлористый | 0, 5 г | 1, 0 г |
| Глюкоза | 1, 0 г | 2, 0 г |
| Дрожжевой экстракт | 2, 0 мл (или 2 г) | 4, 0 мл (или 4 г) |
| 2. Вода дистиллированная | 15, 0 мл | 15, 0 мл |
| Натрий углекислый | 0, 53 г | 1, 1 г |
| 3. Вода дистиллированная | 10, 0 мл | 10, 0 мл |
| Натрий двууглекислый | 0, 25 г | 0, 5 г |
Растворы 1, 2 и 3 стерилизуют раздельно при 112 °С 12 мин. После стерилизации растворы смешивают, проверяют рН (10, 0-10, 2), прибавляют 20000 единиц полимиксина М, 0, 5 мл 1, 6 %-ного спиртового раствора бромтимолового синего, разливают в пробирки по 5 мл. В среду удвоенной концентрации добавляют 40000 единиц полимиксина М и 1 мл бромтимолового синего. Разливают в колбы или флаконы по 10, 50 и 100 мл соответственно количеству исследуемой воды.
Приготовление молочно-ингибиторной среды
Хорошо смешивают и разливают в чашки Петри 85 мл готового питательного агара, 15 мл стерильного обезжиренного (0, 5 % жирности) молока, 1, 25 мл 0, 01 %-ного водного раствора кристаллического фиолетового, 1 мл 2 %-ного водного раствора теллурита калия.