Функциональный анализ.

Наиболее распространенными методами определения функциональной активности являются гемолитические методы СН50, СН100, которые успешно применяются в клинике для определения общей комплементарной активности.

Тест-система включает в себя сенсибилизированные эритроциты барана, вызывающие активацию комплемента по классическому пути сборку МАК и лизис клеток. Активность комплемента определяется спектрофотометрически по вышедшему в результате гемолиза гемоглобину.

Количественное определение компонентов комплемента основано на предложенной M.M.Mayer теории одного удара, заключающейся в том, что для лизиса эритроцитов достаточно одного отверстия, образованного МАК в мембране эритроцита. Следовательно, при активации одной молекулы определяемого компонента происходит лизис одного эритроцита. Подсчет числа лизированных эритроцитов позволит определить число гемолитически активных молекул в данной системе.

Более точным методом является оценка активности по 50% гемолизу. За 50%-ную гемолитическую единицу активности комплемента (СН50) принимают такое количество комплемента, в присутствии которого происходит лизис 50% эритроцитов во взвеси в течение 45 мин при температуре 37°С. В зоне 50% гемолиза легче уловить различие между смежными степенями гемолиза.

Существует множество модификаций метода определения общей гемолитической активности, в том числе используются агарово-гелевые пластинки с включением в них сенсибилизированных эритроцитов барана. Степень гемолиза в данном случае определяется при измерении колец гемолиза вокруг лунок.

У больных рецидивирующими бактериальными инфекциями, но не дефицитом антител и нарушением фагоцитоза, необходимо проводить скрининговые СН50. Отсутствие одного из компонентов комплемента или нарушение его функционирования отражается на общей комплементарной активности. СН50в таком случае не информативна, данное нарушение можно выявить только исследовав индивидуальные компоненты при помощи моноспецифических антисывороток.

Для получения объективной информации о системе комплемента необходимо использовать весь арсенал имеющихся средств количественного и функционального анализа.

Заключение.

Комплемент относят к факторам неспецифической резистентности организма. Комплемент и антитела образуют сложную систему, играющую важную роль в удалении антигена из организма. Комплемент взаимодействует со многими факторами и системами: антителами, ферментами, кининами, факторами свертывания и фибринолиза, тромбоцитами, макрофагами, лимфоцитами.

Важным механизмом действия комплемента является его активация, которая происходит классическим и альтернативным путями. При этом высвобождается ряд медиаторов воспаления, таких как С2b, С3а, С5а и С4а. Под действием С3а и С5а высвобождается гистамин из тучных клеток, кроме того фрагменты С3а и С5а являются хемотаксическими факторами.

Появление белков системы комплемента отмечено на ранних этапах развития организма. Филогенетически более ранним считают появление С3 компонента и альтернативного пути активации. В процессе эмбриогенеза комплементарные белки появляются в сыворотке крови эмбриона уже в первом триместре беременности.

Большая часть компонентов комплемента синтезируется в печени.

Комплемент участвует в защитном противоинфекционном иммунитете. Он обеспечивает неспецифическую защиту, включая такие реакции, как нейтрализация, иммуноадгезия, опсонизация и цитолиз, участвует в солюбилизации иммунных комплексов.

Комплемент имеет большое клиническое значение. К общесистемным расстройствам приводят как повышение, так и понижение активности комплемента, особенно опасна его повышенная неконтролируемая функция, обычно вызывающая повреждение собственных клеток организма. Эти явления выражены при так называемых болезнях иммунных комплексов. Гипокомплементемия выявлена при гематологических, инфекционных заболеваниях, при термической травме, гемодиализе.

В настоящее время почти для всех компонентов выявлены дефицитные состояния, наиболее часто проявляющиеся в виде системной красной волчанки и волчаночноподобного синдрома, тяжелых возвратных инфекций, менингита.

Все это свидетельствует о важной биологической роли белков системы комплемента, его клинической значимости.

Список использованной литературы.

1. Кульберг А.Я. Молекулярная иммунология. – Москва, Высшая школа.- 1985.

2. Кульберг А.Я. Регуляция иммунного ответа. –Москва, Медицина. –1986.

3. Вершигора А.Е. Общая иммунология. – Киев, Выща школа. –1990.

4. Итоги науки и техники. Серия «Иммунология», том 24. – Москва. – 1990.