![]() Главная страница Случайная страница КАТЕГОРИИ: АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника |
Мазки из ротоглотки
--------------------+------------------------------------------------------ ¦1.1. Сбор материала¦Мазки берут сухими стерильными зондами с ватными ¦ ¦ ¦тампонами вращательными движениями с поверхности ¦ ¦ ¦миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки ¦ ¦ ¦после предварительного полоскания полости рта водой. ¦ ¦ ¦После взятия материала тампон помещают в стерильную ¦ ¦ ¦одноразовую пробирку с 50 мкл стерильного 0, 9% ¦ ¦ ¦раствора натрия хлорида или раствор фосфатного ¦ ¦ ¦буфера. Конец зонда отламывают или отрезают, чтобы ¦ ¦ ¦плотно закрыть пробирку ¦ +-------------------+-----------------------------------------------------+ ¦1.2. Предобработка ¦Не требуется ¦ ¦проб ¦ ¦ +-------------------+-----------------------------------------------------+ ¦1.3. Метод ¦ОТ-ПЦР ¦ ¦исследования ¦ ¦ +-------------------+-----------------------------------------------------+ ¦1.4. Условия ¦При температуре от 2 до 8 °C - в течение 3 суток. ¦ ¦хранения материала ¦При температуре минус 70 °C или в жидком азоте - ¦ ¦ ¦длительно. Допускается только однократное ¦ ¦ ¦замораживание - оттаивание материала. ¦ ¦ ¦Температура хранения минус 20 °C не допускается ¦ +-------------------+-----------------------------------------------------+ ¦1.5. Условия ¦В специальном термоконтейнере с охлаждающими ¦ ¦транспортирования ¦элементами или в термосе со льдом: ¦ ¦материала ¦- при температуре 0-4 °C - не более трех суток; ¦ ¦ ¦- при температуре минус 70 °C или в жидком азоте - ¦ ¦ ¦длительно. Температура транспортировки минус 20 °C ¦ ¦ ¦допускается только с учетом однократного ¦ ¦ ¦замораживания и транспортировки без размораживания не¦ ¦ ¦более 4 дней ¦ +-------------------+-----------------------------------------------------+ ¦2.2. Сбор материала¦Мазки (слизь) берут сухими стерильными зондами с ¦ ¦ ¦ватными тампонами. Зонд с ватным тампоном вводят ¦ ¦ ¦легким движением по наружной стенке носа на глубину ¦ ¦ ¦2-3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают¦ ¦ ¦книзу, вводят в нижний носовой ход под нижнюю носовую¦ ¦ ¦раковину, делают вращательное движение и удаляют ¦ ¦ ¦вдоль наружной стенки носа. Для метода ¦ ¦ ¦иммунофлюоресценции забор материала производят перед ¦ ¦ ¦другими манипуляциями. После взятия материала тампон ¦ ¦ ¦помещают в пробирку с 2-3 мл фосфатно-солевого ¦ ¦ ¦буферного раствора. Для получения суспензии клеток ¦ ¦ ¦тампоны в пробирке тщательно отжимают о стенки ¦ ¦ ¦пробирки. Тампон удаляют. Пробирку закрывают. ¦ ¦ ¦Для ПЦР-анализа - после взятия материала тампон ¦ ¦ ¦(рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в ¦ ¦ ¦стерильную одноразовую микропробирку с 500 мкл ¦ ¦ ¦стерильного 0, 9% раствора натрия хлорида. Конец зонда¦ ¦ ¦отламывают, чтобы можно было плотно закрыть крышку ¦ ¦ ¦пробирки ¦ +-------------------+-----------------------------------------------------+ ¦2.3. Предобработка ¦Для метода иммунофлюоресценции клетки осаждают ¦ ¦проб ¦центрифугированием в течение 5-6 мин. при 3000 ¦ ¦ ¦об./мин. Надосадочную жидкость удаляют, а клеточный ¦ ¦ ¦осадок ресуспендируют в нескольких каплях и наносят ¦ ¦ ¦на предметные стекла (не менее 3 шт.) раздельными ¦ ¦ ¦каплями. Препарат высушивают и фиксируют 10 мин. в ¦ ¦ ¦охлажденном до 2-8 °C химически чистом ацетоне. ¦ ¦ ¦Для ПЦР-анализа не требуется ¦ +-------------------+-----------------------------------------------------+ ¦2.4. Метод ¦МФА, ОТ-ПЦР ¦ ¦исследования ¦ ¦ +-------------------+-----------------------------------------------------+ ¦2.5. Условия ¦Для метода иммунофлюоресценции фиксированные ¦ ¦хранения материала ¦неокрашенные мазки можно хранить при температуре от 2¦ ¦ ¦до 8 °C в течение 6-7 дней, при температуре минус ¦ ¦ ¦20 °C - до 6 мес. ¦ +-------------------+-----------------------------------------------------+ ¦2.6. Условия ¦Для метода иммунофлюоресценции в термоконтейнере с ¦ ¦транспортирования ¦охлаждающими элементами при температуре от 0 до 4 °C.¦ ¦ ¦Для ПЦР см. п. 1.5 ¦ --------------------+------------------------------------------------------
|