ЕхнологиЯ замораживаниЯ и длительного хранениЯ спермы

ЃлагодарЯ открытию переживаемости спермы при низких температурах, оказалось ее можно хранить несколько лет и даже десЯтилетий, перевозить на любые расстоЯниЯ, а, главное, всегда иметь на станциЯх сперму лучших производителей.

ЃиологиЯ заморозки. Џри температурах выше 0º ‘ обменные процессы в сперме хотЯ и замедлЯютсЯ, но не прекращаютсЯ. ЏродолжаетсЯ накопление вредных продуктов распада и начинаетсЯ процесс разрушениЯ передней части головки спермиЯ - акросомы, котораЯ выполнЯет важную функцию при оплодотворении Яйцеклеток.

“длинить сроки хранениЯ спермы можно путем еще большего замедлениЯ обменных процессов, длЯ чего необходимо охладить ее до отрицательных температур. Ќо уже при -0, 6º ‘ сперма начинает замерзать. ЋсновнаЯ причина ее гибели Р кристаллическое замерзание воды. …сли сперму охлаждать медленно, то всЯ вода, содержащаЯсЯ в ней, успеет превратитьсЯ в ледЯные кристаллы и спермии погибнут. Џри быстром охлаждении удаетсЯ ЗминоватьИ зону кристаллизации и достичь зоны витрификации, где протоплазма спермиев затвердевает как единое целое без вымерзаниЯ воды и образованиЯ кристаллов льда. ѓлубокое охлаждение спермы до температуры жидкого азота достигаетсЯ в течение нескольких минут.

‡амораживание спермы быка. „лЯ замораживаниЯ в жидком азоте пригодна сперма с концентрацией спермиев не менее 0, 8 млрд/мл и активностью не ниже 8 баллов.

‡аморозка на фторопластовых пластинах в форме гранул. Џосле получениЯ и оценки сперму разбавлЯют лактозо (11, 5 мл) Р желточной (20 мл) средой с глицерином (5 мл). ‘перму разбавлЯют в 10-30 раз в зависимости от объема гранул.

…сли объем гранул 0, 1-0, 2 мл, то необходимы меньше степени разбавлениЯ и тогда на пункте искусственного осеменении сперму перед использованием надо разбавить: длЯ этого гранулы размораживают во флаконе до 38-40º ‘. ‘перму, предназначенную длЯ размораживаниЯ в гранулах объемом 0, 5 мл, разбавлЯют в 10 раз и больше и перед осеменением коров две гранулы помещают в стерильный флакон и погружают его в теплую воду (38-40º ‘).

‡аморозка необлицованных гранул. ђазбавленную сперму охлаждают до 2-5º ‘ в течение 3-4 часов, а затем разливают градуированными пипетками, полиэтиленовым шприцем или разливочной машиной в лунки охлажденной в жидком азоте фторопластовой пластины. Џластину выдерживают над жидким азотом на расстоЯнии 5-10 см в течение 1, 5-2 мин, а затем погружают е в жидкий азот на 1-2 мин. Џосле замораживаниЯ спермы пластину вынимают из жидкого азота, гранула собирают сачком и пересыпают в охлажденный контейнер, который помещают в сосуд „ьюара с жидким азотом длЯ хранениЯ. “ровень азота в сосудах должен быть значительно выше чашек с замороженной спермой. Џеред осеменением из чашек пинцетом достают охлажденные до -196º ‘ гранулы, размораживают их. Ћценивают активность спермиев и используют длЯ осеменениЯ коров при активности не ниже 4 баллов.

‡аморозка облицованных гранул. (по Ћсташко) замораживают сперму, разбавленную средами Ь1 и 2. Џриготовленные среды наливают в стерильные полиэтиленовые флаконы по 200-400 мл, которые подсоединЯют к специальному устройству длЯ разбавлениЯ. ‘перму сначала разбавлЯют средой Ь1 в соотношении 1: 1 и выдерживают при комнатной температуре 5-10 минут, затем средой Ь2 до требуемой концентрации (15 млн в 1 дозе).

‘перму разбавлЯют с помощью устройства благодарЯ которому можно дозировано вводить среды в отдаленную часть одноразового полиэтиленового спермоприемника со спермой. ‡аполненную спермой трубку разделЯют с помощью автомата Џђ† на дозы 0, 25-0, 33 мл и герметизируют путем термической сварки. Ћблицованные гранулы помещают в алюминиевые тубы и оставлЯют в холодильнике (2-5º ‘) в течение 4-6 часов длЯ эквилибрации. ‡атем обоймы с тубами в сосуд „ьюара. Ђктивность спермиев после замораживаниЯ спермы проверЯют через 24 часа. €з каждой тубы берут гранулу и размораживают при t 40º ‘. “паковку протирают и определЯют активность (между стеклами). „лЯ дальнейшего хранениЯ в жидком азоте допускаетсЯ сперма с активностью не ниже 4 баллов.

‡аморозка в полипропиленовых трубочках, или соломинках (пайетах) происходит предварительно разбавленной спермой так, чтобы после разморозки в соломинке было не менее 15 млн подвижных спермиев. Љаждую соломинку маркируют: указывают наименование предприЯтиЯ, кличку и номер быка, дату получениЯ спермы. ђазбавленную сперму расфасовывают по 0, 25 мл с помощью машины, котораЯ автоматически заполнЯет спермой соломинки и закупоривает их с обоих концов стерильными шариками (синие пробки). Ћдин шарик служит пробкой-поршнем, а другой герметизирует соломинку.

�тативы с соломинками кладут в пластмассовые коробки, которые переносЯт в холодильник и выдерживают при 4º ‘ в течение 3-4 часов. Џосле охлаждениЯ оценивают подвижность спермиев и к замораживанию допускаетсЯ сперма с активностью не ниже 8 баллов. ‘перму в соломинках хранЯт в пластмассовых стаканах на 500 и 150 доз в жидком азоте.

‡амораживание спермы жеребца. Џеред замораживанием сперму жеребца разбавлЯют в 4 раза лактозо-желато-цитратно-желточной или лактозо-желточно-сульфатной средой. ђазбавленную сперму разливают по 25 мл в охлажденные алюминиевые пакеты, плотно закрывают и замораживают в парах над жидким азотом на пенопластовом поплавке на расстоЯнии 1-2 смот поверхности в течение 5-7 мин, а затем пакеты. Ђ затем пакеты переносЯт в жидкий азот. Џри замораживании спермы в виде гранул ее наносЯт по 0, 2 мл в лунки плашки помещенной на сухой лед. —ерез 5 мин замороженные гранулы собирают, упаковывают в алюминиевые тубы или пластмассовые стаканы и помещают на хранение в сосуд с жидким азотом.

‘перму хрЯков разбавленную желатными средами сохранЯют до 3 суток при t 16-20 º ‘ в термосах-Ящиках или бытовых сумках-холодильниках.

‘перму баранов жеребцов и быков хранЯт также при t 2-5 º ‘ в холодильниках, пищевых широкогорлых термосах. ‡агруженных тающим льдом.

100.Њузейный препарат ЗЊацерациЯ плодаИ, дать поЯснение.

ЊацерациЯ плода (MACERATIO FETUS) ЊацерациЯ плода характеризуетсЯ размЯгчением и разжижением его тканей в матке. —аще наблюдаетсЯ у свиней, коров (трихомоноз), редко у кобыл и животных др видов и происходит преимущественно, когда гибель плода сопровождаетсЯ развитием катарального или гнойно-катарального воспалениЯ матки при отсутствии гнилостных микроорганизмов.ЊацерациЯ представлЯет собой в основном ферментативный процесс. ђасплавление тканей начинаетсЯ с плодных оболочек или с пищеварительных органов. ЌачавшаЯсЯ мацерациЯ нередко прекращаетсЯ; процесс заканчиваетсЯ мумификацией, и плод эвакуируетсЯ в мацеро-мумифицированном состоЯнии.

ќтиологиЯ. ‘мерть плода с последующим разжижением мЯгких частей его, разрыхлением костных соединений и разъединением костей.

‘имптомы. “гнетение, исхудание, периодические потуги, выделение из влагалища красноватой жидкости и затем гнойных масс, содержащих нередко части распавшегосЯ плода и мелкие кости. ђектально обнаруживают увеличенную и переполненную жидкостью матку, в которой иногда удаетсЯ прощупать отдельно плавающие кости плода.

’ечение и прогноз. €з осложнений возможны периметрит, параметрит, перитонит, сепсис и иногда прободение матки костЯми плода.

‹ечение. ђаскрытие канала шейки матки и извлечение распавшегосЯ плода кусками. ‡атем производЯт промывание матки дезинфицирующими растворами и лечат, как эндометрит.

Љоровам инъецируют п/к 2-5 мл 1 % маслЯного р-расинэстрола, 8-10 мл питуитрина, 50-60 …„ окситоцина или др маточные средства, проводЯт анестезию шейки матки. €скусственно расширЯют шейку и тщательно обильно промывают полость матки асептическими р-рами. „лЯ вымываниЯ из матки распавшихсЯ тканей и сегментов скелета плода следует предпочесть гипертонический (5-10%) р-р поваренной соли.