![]() Главная страница Случайная страница КАТЕГОРИИ: АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника |
Иммунофенотипирование ⇐ ПредыдущаяСтр 4 из 4
- метод качественного и количественного определения наличия исследуемых антигенов в клетках
Задачи: 1. изучение наличия на поверхности или внутри клеток рецепторных белков - антигенов 2. определение количества клеток, имеющих (экспрессирующих) этот рецептор в исследуемой популяции 3. определение количества рецепторов на поверхности клеток 4. определение сочетания нескольких рецепторов на поверхности одной клетки (коэкспрессия)
Окраска: Моноклональные антитела, меченные люминесцентной меткой
Моноклональные антитела позволяют выявлять дифференцировочные антигены на гемопоэтических клетках крови у человека и имеют маркировку CD (cluster of differentiation) - кластер дифференцировки:
Практическое использование: 1. исследование клеточного иммунитета 2. оценка гемопоэза Исследование клеточного звена иммунитета у человека:
CD3 - Т-лимфоциты - норма в крови взрослого - 67-76% CD3, CD4 - Т-хелперы - 38-46% CD3, CD8 - Т-супрессоры - 31-40%
Соотношение хелперы/супрессоры - 1-1, 5 (при СПИДе – соотношение снижается меньше 1)
CD19 - В-лимфоциты - норма - 11-16 %
CD16 - макрофаги CD38 - плазмоциты
2. оценка гемопоэза: - 1-4 классы зрелости – морфологически нераспознаваемые - распознавание – иммунологическое – иммунофенотипирование - суть метода - часть рецепторных белков сохраняются в клетке всегда, они характеризуют тип кроветворения – лимфоидное, миелоидное и линию – Т- и В- лимфоциты – при созревании клеток одни рецепторные белки на поверхности появляются, а другие исчезают
Иммуногистохимия - метод качественного определения антигенов в клетках и тканях на гистологических срезах
Задачи метода: 1. определение гистогенетического типа исследуемой ткани 2. определение иммунофенотипа клеток 3. оценка процессов пролиферации (Ki-67, PCNA) и апоптоза (СD 95) в ткани 4. определение наличия рецепторов к гормонам 5. определение ростовых факторов (IL 1-16) 6. выявление онкопротеинов (р21, р53, N-MYC и т.д.) 7. определение типов коллагена (I, II, IY типа) 8. микробиология/вирусология (гепатиты В и С, цитомегаловирус, герпес и т.д.) Окраска: Моноклональные антитела
Определение гистогенетического типа клеток тканей: - основано на выявлении белков промежуточных филаментов, специфичных для клеток определенных тканей
1. эпителиальные ткани - выявляется кератин (Кeratin) 2. соединительные ткани - виментин (Vimentin) 3. нервная ткань - S100 protein 4. мышечные ткани - десмин (Desmin) 5. лимфоидная и миелоидная ткани - общий лейкоцитарный антиген (LCA)
|