Световая микроскопия

Подробно устройство светового микроскопа изучается на кафедре био­логической и медицинской физики. Общий вид светового микроскопа по­казан на рис. 2.1.

Световая микроскопия подразделяется на стандартную световую микроскопию и специальные методы световой микроскопии. В обо­их случаях световой поток, проходя через конденсор микроскопа, концент­рируется, далее проходит через гистопрепарат, изменяясь за счет различий пре­ломления гистоструктур препарата. Затем пучок света идет через объектив, в котором формируется изображение. Далее изображение увеличивается систе­мой линз окуляра, после чего воспринимается глазом (Рис. 2.2)

Любой микроскоп имеет два основных показателя, характеризующих его возможности:

1. Общее увеличение микроскопа — соотношение между линейными размерами полученного в микроскопе изображения объекта и истинными размерами этого объекта. Оно определяется как произведение увеличения объектива на увеличение окуляра микроскопа. Общее увеличение светово­го микроскопа может теоретически достигать 2500 раз, но полезное увели­чение, т.е. увеличение, позволяющее выявить детали строения гистологи­ческого объекта, составляет не более 1500 раз.

2. Разрешающая способность — наименьшее расстояние между двумя точками объекта, на котором они видны раздельно. Разреша­ющая способность является более важным показателем микроскопа, чем его увеличение. Повышая разрешающую способность, т.е. уменьшая расстояние раздельного восприятия двух точек гистологического объекта, исследователь будет видеть все более мелкие детали.

Разрешающая способность микро­скопа определяется по формуле: d = Х/2, где el — расстояние раздельного видения точек объекта, ~к — длина волны.

Из формулы следует, что для повышения разрешающей способности микроскопа нужно использовать источник света с очень малой длиной волны. Это подтолкнуло ученых к поиску способов увеличить разрешаю­щую способность микроскопа через уменьшение длины волны источника света (ультрафиолетовая и люминесцентная микроскопия), а также к от­крытию электронного микроскопа, в котором вместо видимого света стали использовать пучок электронов, имеющий очень короткую длину волны.