ЗАНЯТИЕ № 17

ИТОГОВОЕ ЗАНЯТИЕ: Механизмы фотобиологических процессов

Контрольные вопросы:

1. Основные фотобиологичсеские явления.

2. Основные стадии фотобиологических процессов.

3. Спектры поглощения биологически важных молекул.

4. Влияние экранирования на характеристики поглощения света.

5. Ориентация молекул и поглощение света.

6. Влияние неравномерного распределения молекул на характеристики поглощения.

7. Влияние светорассеяния на характеристики поглощения света.

8. Характеристики фотолюминесценции.

9. Влияние экранирования на характеристики фотолюминесценции.

10. Характеристики фотолюминесценции и миграция энергии.

11. Общие закономерности фотохимических превращений. Квантовый выход фотохимических реакций.

12. Кинетика однофотонных необратимых превращений. Характер зависимости количества продукта от интенсивности и времени облучения. Влияние экранирующих соединений на образование фотопродукта. Поперечное сечение фотолиза.

13. Обратимые фотопревращения. Характер зависимости количества образовавшегося продукта от дозы облучения.

14. Механизмы фотохимических процессов, в которых проявляется зависимость количества образовавшегося продукта от интенсивности облучения.

15. Спектры действия фотобиологических процессов. Задачи изучения спектров действия. Способы регистрации спектров действия.

16. Характер связи между первичным фотохимическим процессом и биологическим действием. Ограничения способа регистрации спектра фотобиологического действия при постоянной дозе.

17. Регистрация спектров действия при постоянной величине фотобиологического эффекта. Характер связи между дозой облучения и свойствами акцептора. Условия применимости.

18. Особенности регистрации спектров действия для многокомпонентных образцов.

19. Фотобиологические эффекты, зависящие от скорости образования фотохимического продукта.

20. Характеристики солнечного ультрафиолетового излучения.

21. Инактивирующее действие УФ-излучения на белки. Кинетика фотоинактивации белков.

22. Теория фотоинактивации молекул белков при фотолизе аминокислотных остатков. Спектры дейстия фотоинактивации белков.

23. Первичные фотопревращения аминокислотных остатков в белках под действием УФ-излучения.

24. Фотодимеризация пиримидиновых оснований в нуклеиновых кислотах, роль триплетных состояний. Роль димеризации тимина в инактивации ДНК под действием УФ-излучения.

25. Фотореактивация фотохимических повреждений ДНК.

26. Фотогидратация пиримидиновых оснований.

27. Сшивки ДНК с белками.

28. Индукция ультрафиолетовым излучением перекисного окисления ненасыщенных липидов. Схема элементарных реакций перекисного фотоокисления липидов.

29. Роль фотолиза антиоксидантов и фотопревращений гидроперекисей жирных кислот в свободные радикалы в развитии перекисного фотоокисления липидов в биомембранах.

30. Определение фотодинамических процессов и фотосенсибилизаторов.

31. Механизм процессов фотосенсибилизации без участия кислорода.

32. Фотодинамические реакции. Фотореакции типа I и типа II.

33. Схема фотодинамических реакций типа II.

34. Механизм фотодинамических реакций типа I.

ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЕ ВОПРОСЫ

1. Биофизика как наука. Разделы биофизики. Моделирование как один из основных методов биофизики. Основные этапы моделирования.

2. Принципы методов определения молекулярной массы. Теоретические основы гель-хроматографии. Определения молекулярной массы с помощью гель-хроматографии.

3. Основные понятия биоэнергетики: системы и объекты, сила, работа, энергия. Осмотическое давление и осмотическая работа. Электрохимический потенциал ионов. Электрическая энергия иона в растворе. Электрическая работа при переносе ионов через мембрану.

4. Термодинамическая вероятность и энтропия. Внутренняя энергия и теплосодержание. Обобщенное уравнение первого и второго закона. Связь константы равновесия с изменением свободной энергии.

5. Свободно-сочлененная цепь. Размер клубка. Упругие свойства клубка. Отклонения от гауссовой статистики.

6. Условия образования глобулы. Размер глобулы. Зависимость энергии клубка и глобулы от плотности звеньев.

7. Фазовые переходы глобула – клубок в белках. Расплавленная глобула.

8. Конформации полипептидной цепи. Торсионные углы в пептидном звене. Стерические контурные диаграммы Рамачандрана. Сравнение контурных диаграмм с данными рентгеноструктурного анализа.

9. Конформационная энергия пептидного остатка. Основные виды взаимодействий между соседними атомами в полипептидной цепи и между группами, принадлежащим разным аминокислотным остаткам в полипептидной цепи. Энергетические контурные диаграммы.

10. Водородная связь. Ее роль в формировании структуры белка. Особенности структуры воды и ее свойства. Энергия перехода неполярных молекул из гидрофобной в водную фазу.

11. Вторичная структура белка. Распространенность вторичных структур в белках, влияние электростатических сил и гидрофобных взаимодействий на стабильность вторичной структуры полипептидов и белков.

12. Конформационное равновесие в полипептидах и белках: переход спираль-клубок. Конформационная стабильность и конформационные изменения. Термодинамическое описание перехода.

13. Макромолекулярная организация глобулярных белков. Плотность упаковки аминокислотных остатков в молекулах белка. Объем и плотность белков. Динамичность третичной структуры. Анализ и предсказание вторичной и третичной структуры белка по первичной.

14. Среднечисленная молекулярная масса. Средневесовая молекулярная масса. Средневискозиметрическая молекулярная масса. Причина невозможности использования методов криоскопии и эбулиоскопии для измерения молекулярных масс макромолекул.

15. Методы определения молекулярных масс биомакромолекул: осмометрия, гельхроматография, электрофорез, рассеяние света, вискозиметрия, седиментация.

16. Механизм реакций при термодинамическом равновесии фермент-субстратного комплекса и свободных фермента и субстрата. Кинетика реакций в условиях стационарности. Уравнения Михаэлиса-Ментен и Бриггса-Холдейна, смысл параметров. Графические представления уравнения Михаэлиса-Ментен. Недостатки и достоинства.

17. Механизм конкурентного ингибирования. Непродуктивное связывание. Специфичности при конкурирующих субстратах. Кинетика реакций с образованием промежуточных соединений.

18. Механизм неконкурентного, бесконкурентного и смешанного ингибирования. Влияние избытка субстрата. Суицидальные субстраты.

19. Неупорядоченный и упорядоченный последовательный механизмы ферментативных реакций. Механизм Теорелла–Чанса. Механизм с замещением фермента.

20. Механизм аллостерической регуляции ферментативной активности. Модели кооперативности. Количественный анализ кооперативности (уравнение Хилла).

21. Модели ферментативного катализа. Проблема снижения активационного барьера. Конформационно-релаксационная концепция ферментативного катализа. Равновесие в ферментативных реакциях и в растворе.

22. Стационарные состояния. Критерии устойчивости стационарного состояния.

23. Критерии устойчивости стационарных состояний для функций двух переменных (модель Лотки). Понятие об «узле», «фокусе», «седле».

24. Критерии устойчивости стационарных состояний вблизи состояния термодинамического равновесия. Соотношения Онзагера.

25. Критерии устойчивости стационарных состояний вблизи состояния термодинамического равновесия. Теорема Пригожина.

26. Основные фотобиологические процессы. Стадии фотобиологических процессов. Фотобиологические явления, используемые в фотомедицине. Электронные переходы в биомолекулах при поглощении света и люминесценции. Пути растраты энергии электронного возбуждения в биомолекулах.

27. Количественные закономерности поглощения света. Закон Бугера-Ламберта-Бера. Количественные показатели поглощения света. Спектры поглощения биомолекул. Особенности поглощения света в биологических системах: влияние неравномерного распределения молекул и светорассеяния, влияние ориентации молекул.

28. Дифференциальная и производная спектрофотометрия многокомпонентных биологических объектов. Области применения спектрофотометрии в биологии и медицине. Спектры поглощения аминокислот и белков, нуклеиновых кислот. Гипохромный и гиперхромный эффекты.

29. Оптическая активность. Дисперсия оптического вращения. Круговой дихроизм. Использование явлений в биологических исследованиях.

30. Флуоресцентная спектроскопия. Основное уравнение. Квантовый выход. Стоксов сдвиг.

31. Зависимость потока и интенсивности фотолюминесценции от концентрации. Квантовый выход фотолюминесценции. Влияние экранирующих соединений на поток фотолюминесценции. Спектры фотолюминесценции и спектры ее возбуждения. Люминесцирующие биомолекулы.

32. Флуоресцентная спектроскопия. Температурная зависимость квантового выхода флуоресценции. Эффект Шпольского. Тушение флуоресценции. Уравнение Штерна-Фольмера.

33. Миграция энергии электронного возбуждения в биологических системах. Механизмы миграции энергии электронного возбуждения в биологических системах: индуктивно-резонансная миграция энергии по синглетным уровням и обменно-резонансная миграция энергии по триплетным уровням. «Флуоресцентная линейка».

34. ЭПР: основное уравнение резонанса. Характеристики спектра ЭПР: амплитуда, ширина и форма линии.Тонкая и сверхтонкая структура.

35. Спиновые метки и спиновые зонды в исследовании свойств биообъектов.

36. Принцип метода ЯМР. Основное уравнение резонанса, химический сдвиг, расщепление линий. Спин-спиновая и спин-решеточная релаксация.

37. Использование ЯМР в исследовании структуры и функции биомакромолекул.

38. Принцип метода рентгеноструктурного анализа. Фазовая проблема.

39. Свойства мембран. Поры. Латеральная диффузия. Флип-флоп.

40. Состояние мембран. Фазовые переходы. Кривые плавления. Кооперативность. Методы регистрации.

41. Организация мембран. Подвижность отдельных участков жирных кислот. Конформации отдельных участков.

42. Диффузионный перенос частиц через мембрану. Механизм переноса. Уравнение Теорелла. Первый закон Фика.

43. Проницаемость мембран. Второй закон Фика. Влияние примембранных слоев воды на проницаемость мембран.

44. Решение уравнения Нернста-Планка в приближении Гольдмана. Справедливость приближения Гольдмана.

45. Ионная природа потенциалов покоя и действия. Равновесные потенциалы Нернста-Доннана. Стационарный потенциал: уравнение Ходжкина-Гольдмана для расчета значений потенциалов покоя и действия.

46. Соотношение Теорелла-Уссинга для пассивного переноса ионов. Опыт Уссинга.

47. Молекулярные машины, осуществляющие первичный активный транспорт ионов. Перенос протонов через мембрану.

48. Последовательность стадий работы Са-АТФазы.

49. Молекулярная организация и стадии работы Na-K-АТФазы.

50. Факторы, определяющие подвижность ионов и распределение ионов между водной и липидной фазой.

51. Преносчики ионов. Каналообразующие агенты. Различия вольт-амперных характеристик. Селективность.

52. Молекулярная организация Na- и K- каналов. Селективность.

53. Факторы, определяющие формирование потенциала покоя.

54. Регистрация токов через мембрану в условиях фиксации потенциала (экспериментальные предпосылки теории Ходжкина-Хаксли). Блокаторы ионных каналов.

55. Регистрация потенциала действия и токов потенциал-зависимых натриевых и калиевых каналов. Пороговость действия.

56. Динамика натриевых и калиевых токов при формировании потенциала действия.

57. Модель Ходжкина-Хаксли. Воротные механизмы каналов. Регистрация воротных токов.

58. Распространение импульса: эквивалентная цепь с распределенными элементами. Телеграфное (кабельное) уравнение.

59. Решение телеграфного уравнения для стационарных условий: падение напряжения в зависимости от толщины (радиуса) нервного волокна, сопротивления мемраны. Влияние миэлинизации на скорость распространения импульса.

60. Особенности потенциалов действия в кардиомиоцитах. Влияние кальциевых токов.

61. Инициация сигналов. Возникновение автоколебаний – осциллятор Теорелла.

62. Свободные радикалы. Определение, обнаружение, свойства. Факторы, определяющие активность и стабильность свободных радикалов. Примеры.

63. Номенклатура свободных радикалов. Свободные радикалы в организме. Первичные и вторичные радикалы. Источники возникновения.

64. Активные формы кислорода. Свойства, источники.

65. Перекисное окисление липидов. Инициация, разветвления, обрыв цепи. Продукты перекисного окисления в организме.

66. Свойства природных и синтетических антиоксидантов. Ферментативная антиоксидантная система.

67. Роль свободных радикалов в физиологических и патофизиологических процессах.

68. Люминесценция. Классификация процессов и факторы их вызывающие. Биолюминесценция. Примеры систем и их использование в медико-биологических исследованиях.

69. Анализ структуры и функции полипептидов и белков с помощью метода флуоресцентных зондов. Принцип метода. Основные типы флуоресцентных зондов.

70. Радикалы аминокислот. Рекомбинационное свечение. Причины возникновения антистоксова сдвига.

71. Химическая природа соединений, способных высвечивать фотоны при свободнорадикальных реакциях.

72. Физические активаторы хемилюминесценции. Механизм действия.

73. Общая схема процессов, приводящих к высвечиванию фотона на примере рубрена.

74. Схема процессов, приводящих к образованию возбужденных продуктов перекисного окисления липидов.

75. Химические активаторы хемилюминесценции. Механизм действия на примере люминола.

76. Состояние возбужденного продукта при перекисном окислении, оценка характеристик хемилюминесценции: квантового выхода, спектральных характеристик, время жизни возбужденного продукта.

77. Основные характеристики фотопревращений биомолекул, различные виды квантовых выходов фотопревращений.

78. Кинетика необратимых однофотонных фотопревращений биомолекул, поперечное сечение фотолиза молекул.

79. Кинетика необратимых однофотонных фотопревращений биомолекул в присутствии экранирующих соединений, поперечное сечение фотолиза молекул.

80. Кинетика обратимых однофотонных фотопревращений биомолекул. Зависимость эффекта от времени и интенсивности облучения

81. Спектры действия фотобиологических процессов, задачи их исследования. Теория спектров действия фотобиологических процессов при постоянной дозе облучения,

82. Теория спектров действия фотобиологических процессов при постоянной величине фотобиологического эффекта. Влияние экранирующих соединений.

83. Спектры действия фотобиологических процессов, определяемых скоростью превращения активных молекул.

84. Анализ лабильных фотопродуктов методами импульсного фотолиза и радиолиза

85. Характеристики солнечного излучения. Поглощение солнечного излучения атмосферой Земли. Механизм взаимодействия неионизирующего излучения различных диапазонов с веществом. Диапазоны инфракрасного излучения.

86. Диапазоны ультрафиолетового излучения. Акцепторы энергии излучения эндогенной и экзогенной природы.

87. Механизм первичных фотоиндуцированных преобразований аминокислот. Квантовый выход фотолиза аминокислотных остатков.

88. Кинетика фотоинактивации белков. Спектры действия фотоинактивации белков. Существенные аминокислотные остатки.

89. Биофизический механизм генерации потенциала действия. Метод фиксации напряжения на мембране. Изменения потоков ионов калия и натрия во времени при генерации потенциала действия.

90. Стационарные потенциалы в живой клетке: потенциалы покоя и потенциалы действия. Методы измерения биопотенциалов.

91. Фотосенсибилизированные процессы в биологических системах. Фотодинамические реакции. Типы фотодинамических реакций. Фотосензибилизированные процессы без участия кислорода.