Методические указания. Течение инфекционных болезней пчел сопровождается, как правило, общими и специфическими симптомами, а также патологическими изменениями

Течение инфекционных болезней пчел сопровождается, как правило, общими и специфическими симптомами, а также патологическими изменениями, характерными для определенного заболевания. Зачастую при инфекционных болезнях пчел наблюдаются сходные признаки их проявления и течения, что затрудняет и усложняет постановку диагноза. В таких ситуациях проводится дифференциальная диагностика, включающая комплекс последовательно проводимых эпизоотологических, патоморфологических и лабораторных исследований, позволяющих путем взаимоисключения отдельных диагностических признаков, наблюдаемых при различных инфекционных заболеваниях, уточнить и конкретизировать окончательный диагноз.

Американский гнилец. Диагноз на него ставят на основании характерных признаков поражения расплода и результатов микроскопических, бактериологических и серологический исследований. В первый день исследования по результатам осмотра сота и обнаружения характерных спор Bacillus larvae в мазках из патматериала дают предварительное заключение. Окончательный диагноз ставят на 3-5 день лабораторного исследования после получения чистой культуры.

Для микроскопии готовят тонкие мазки из гнильцовой массы или " корочек" (2-3 шт), которые предварительно размачивают теплым физраствором и окрашивают 2 %-ным спиртовым раствором карболового фуксина. При микроскопии мазков наблюдают споры овальной формы и палочки, располагающиеся цепочками. На искусственных питательных средах спорообразование слабое или отсутствует. На сывороточном, мясопептонном агаре виден характерный рост. Эти микроорганизмы дают положительные реакции агглютинации со специфической сывороткой. Изучают биохимические свойства выделенных штаммов, проводят серодиагностику, фагодиагностику, биопробу на кроликах.

При дифференциальной диагностике необходимо исключить европейский гнилец, парагнилец, мешотчатый и застуженный расплод, варроатоз. Следует иметь в виду, что часто пчелосемьи бывают одновременно поражены несколькими заразными болезнями.

Европейский гнилец. Предварительное заключение на это заболевание может быть дано в день поступления патматериала на основании осмотра и микроскопии мазков. Окончательный диагноз устанавливается после проведения полного бактериологического исследования, т.е. через 5-7 дней при условии выделения возбудителя болезни.

Для лабораторных исследований из ячеек сотов извлекают не менее 10 свежих трупов личинок, а при их отсутствии - высохшие «корочки» трупов. Мазки и посевы производят из содержимого кишечника личинок, а также «корочек» трупов, после помещения их в стерильный физраствор. В мазках находят споры Вас. alvei, иногда Вас. orpheus или Str. apis. В недавно погибших личинках обнаруживают Streptococcus pluton. При проведении серологической диагностики ставят реакцию преципитации (РП). Лабораторные животные к европейскому гнильцу не восприимчивы.

При проведении дифференциальной диагностики необходимо исключить американский гнилец, парагнилец, мешотчатый расплод.

Парагнилец (син.: ложный гнилец). Для лабораторного исследования на парагнилец направляют кусочки сотов с пораженным расплодом и куколками. Микроскопические и бактериологические исследования проводят по общепринятым методикам.

Диагноз на парагнилец ставят на основании характерных признаков болезни и результатов микроскопических, бактериологических и серологических исследований. В погибших личинках и на питательных средах Вас. paraalvei имеет палочковидную форму, в бульонных культурах подвижна, на питательных средах образует слегка овальные споры.

При проведении исследований с целью дифференциации возбудителя парагнильца необходимо исключить американский и европейский гнильцы, мешотчатый расплод, застуженный и замерший расплод, поражение запечатанного расплода и куколок клещами варроа.

С учетом вышеперечисленных заболеваний, при дифференциальной диагностике гнильцовых болезней пчел необходимо иметь в виду болезни расплода иной, не бактериальной природы, а также некоторые поражения расплода, вызванные вредителями пчел и нарушениями условий содержания.

Как правило, большие сложности возникают при дифференциации гнильцов по внешним признакам болезни. Поэтому следует учитывать, что признаки гнильцов варьируют в зависимости от возбудителя, его патогенности, времени заражения личинок. При гибели личинок в стадии запечатанных ячеек европейский гнилец и парагнилец во многом напоминают американский гнилец, но при этом отсутствует однородность свойственная поражению расплода при последнем. Такая вариабельность возраста больных личинок делает затруднительной постановку диагноза, но именно она должна рассматриваться как основной симптом, указывающий на заболевания пчел европейским гнильцом и парагнильцом.

Мешотчатый расплод. Из методов лабораторной диагностики данного заболевания наиболее специфичной является реакция диффузной преципитации в агаровом геле суспензии исследуемого материала со специфической сывороткой. Наряду с этим можно использовать и другие методы серодиагностики: РСК, прямой и непрямой метод люминисцентной микроскопии. Заболевание часто протекает совместно с европейским гнильцом. При применении сульфаниламидов и антибиотиков, подавляющих возбудителей последнего, отмечается интенсивное поражение семей мешотчатым расплодом. Следовательно, необходимо исключить гнильцы, а так же застуженный расплод.

Хронический и острый вирусный паралич пчел. Диагноз на хроническую форму болезни ставят по обнаружению телец-включений Морисона в протоплазме клеток слизистой оболочки тонкой кишки при окраске гистосрезов. Выявить включения можно также методом иммунофлуоресценции, реакции диффузной преципитации в агаровом геле со специфической сывороткой, реакцией нейтрализации в культурах тканей или на пчелах, исследовать гемолимфу или срезы тонкой кишки, желез под электронным микроскопом. Диагноз на острый паралич устанавливают по реакции иммунодиффузии со специфической сывороткой.

При дифференциальной диагностике исключают гибель пчел от токсикозов, белкового голодания и септицемии.

Септицемия, гафниоз, сальмонеллез, колибактериоз. Постановку диагноза на эти заболевания предопределяют внешние признаки проявления болезни. Если они выражены не ярко, то следует учитывать эпизоотическую ситуацию, проводить лабораторные исследования с целью выделения чистых культур возбудителя из мышц или гемолимфы больных пчел, содержимого кишечника. При необходимости ставят биопробу на пчелах и белых мышах.

При дифференциальной диагностике необходимо отличать эти заболевания друг от друга, а также исключать другие энтеробактериозы и такие заболевания, как падевый токсикоз, нозематоз и отравления ядохимикатами.

Филаментовироз (риккетсиоз). Диагноз на это заболевание ставят при исследовании под электронным микроскопом гемолимфы живых пчел с признаками заболевания или с помощью реакции диффузной преципитации в агаровом геле со специфической гипериммунной сывороткой против данного ДНК-содержащего вируса. В качестве антигена в реакции используют гомогенат из погибших пчел или сконцентрированный вирус. Для пересылки патологический материал консервируют в 50 %-ном глицерине. Окончательный диагноз на риккетсиоз ставят по исключению других возбудителей инфекционных заболеваний.

Микозы (аскосфероз, аспергиллез, меланоз, кандидамикоз). Диагносцируют эти грибные заболевания на основании эпизоотических данных, признаков болезни, результатов микроскопического и микологического исследований, соскобов с поверхности тела пораженных личинок, а также путем обнаружения мицелия и плодовых тел гриба. В первую очередь дифференцируют друг от друга два таких заболевания, как аскосфероз и аспергиллез. В посевах из патматериала могут выделяться при этом возбудители аспергиллеза в виде темно-зеленых или черно-коричневых колоний, а также возбудители кандидамикоза, прорастающие в глубь среды, что следует учитывать при дифференциальной диагностике.

Рисунок 2. - Возбудитель аскосфероза - Ascosphaera apis

Рисунок 3. - Возбудитель аспергиллеза - гриб Aspergillus flavus

Альгозы (отравление пчелиных семей сине-зелеными водорослями). У больных пчел чаще всего наблюдаются нарушения координации движения и более темная окраска наружных покровов, трупы пчел размягченные, на отдельные части они не распадаются, но издают неприятных запах. В дифференциальном отношении при постановке окончательного диагноза на альгозы следует обязательно исключить септицемию и вирусный паралич пчел.

Своевременная и квалифицированно проведенная дифференциальная диагностика болезней расплода и взрослых пчел необходима как для определения эпизоотической ситуации, так и для проведения своевременных и эффективных мероприятий по профилактике и оздоровлению пасек от инфекционных болезней.