Статистична обробка даних

Статистичну обробка результатів дослідження проводили за допомогою комп'ютерної програми Statistica 6.0 for Windows. Для оцінки кількісних показників визначали середнє значення (M) ± стандартне відхилення (SD). Розрахунок проводили за допомогою критерію Стьюдента й парного Т-критерію. Критичний рівень вірогідності нульової статистичної гіпотези P< 0, 05.

РОЗДІЛ 4

РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛІДЖЕНЬ ТА ЇХ ОБГОВОРЕННЯ

4.1.Моніторинг клінічного стану щурів на фоні 5-ти добового та 14-ти добового введення цефтріаксону

В ході експерименту проводився моніторинг клінічного стану щурів за такими показниками: маса тіла та характер випорожнень.

Перед початком та на шостий день експерименту щурів контрольної групи зважували. За даними зважувань, можна було побачити, що у щурів всіх груп маса тіла не змінилась.

Клінічно у 30% щурів, які отримували цефтріаксон, розвивалась діарея. Рідкі випорожнення з'являлись на 3-5 добу після початку терапії і зберігались протягом декількох днів незалежно від тривалості антибактеріальної терапії.

4.2. Дослідження активності СОД в слизовій оболонці товстої кишки щурів після 5-ти та 14-ти добового введення цефтріаксону

З літературних джерел [27] відомо, що порушення окисного гомеостазу, що характеризується підвищенням вмісту продуктів ПОЛ мембранних ліпідів на фоні зниження активності антиоксидантної системи, є одним з основних патогенних факторів розвитку, і можливо, рецидиву різних захворювань організму. Літературні дані про вплив антибіотиків групи цефалоспоринів на оксидантно-антиоксидантну систему обмежені, тому згідно з метою нашої роботи ми провели дослідження стосовно впливу цефтріаксону на оксидантно-антиоксидантну систему слизової оболонки кишечника щурів.

Порушення прооксидантного стану зумовлено змінами в механізмі антирадикального захисту [28, 29]. Важливим чинником, від якого залежить концентрація вільних радикалів у клітинах організму, є кооперативна робота ферментів антиоксидантної системи (супероксиддисмутази і каталази), які регулюють рівень активних метаболітів кисню. Супероксиддисмутаза каталізує дисмутацію аніон-радикалу кисню в перекис водню, а каталаза – процес розщеплення перекису водню до води. Послідовна робота цього ферментативного ланцюга антиоксидантної системи забезпечує підтримку стаціонарного рівня концентрації вільних радикалiв [30]. У разі порушення прооксидантно-антиоксидантної рівноваги накопичуються токсичні продукти вільнорадикального окислення, які можуть неспецифічно атакувати біологічні молекули, викликати окисну модифікацію білків та нуклеїнових кислот, ініціювати ланцюгові реакції ПОЛ у мембранах.

Стан системи антиоксидантного захисту оцінювали по активності ферментів: супероксиддисмутази і каталази.

Проведені дослідження показали, що за нормальних умов (щури контрольної групи) в слизовій оболонці товстої кишки виявляється активність двох ізоформ СОД: MnСОД (мітохондріальна форма) та Cu-ZnСОД (цитоплазматична). Введення антибіотику цефтріаксону впродовж 5-ти діб викликало підвищення активності обох ізоформ СОД (рис.4.1.).

.

Рис.4.1. Активність СОД у слизовій оболонці товстої кишки щурів після введення цефтріаксону (50мг/кг) впродовж 5-ти днів.

При більш тривалому введенні цефтріаксону, впродовж 14-ти днів, спостерігалось незначне підвищення активності Cu-ZnСод.

Рис. 4.2. Активність СОД у слизовій оболонці товстої кишки щурів після введення цефтріаксону (50 мг/кг) впродовж 14-ти днів.

Отримані дані свідчать про очевидну активізацію ферменту першої лінії захисту від оксидативного стресу, а сама СОД. Чітко спостерігається активізація СОД після п'ятиденного введення цефтріаксону. Це свідчить про можливе підвищення утворення перекису водню, який є продуктом реакції яку каталізує СОД.

4.2. Дослідження активності каталази

Після 5-и денного введення антибіотика цефтріаксону значення активності каталази зростають, але це значення не досягало статистичної значущості. (рис.4.3.)

Рис. 4.3. Активність каталази в слизовій оболонці товстої кишки щурів після введення цефтріаксону (50мг/кг) впродовж 5-ти днів.1 – контроль, 2 – цефтріаксон.

Проведені дослідження не показали зміни в активності каталази після 14-и денного введення цефтріаксону. (рис.4.4.)

Рис. 4.4. Активність каталази в слизовій оболонці товстої кишки щурів після введення цефтріаксону (50 мг/кг) впродовж 14-ти днів. 1- контроль, 2 – цефтріаксон.

Отримані дані свідчать про підвищення активності ферменту другої лінії захисту від ПОЛ - каталази.

4.4. Дослідження вмісту дієнових кон'югатів

Дієнові кон'югати є первинними продуктами ПОЛ. При вільнорадикальному окисленні арахідонової кислоти відбувається відривання водню, що призводить до переміщення подвійного зв'язку з утворенням дієнових кон'югатів. Дієнові кон'югати, що є первинними продуктами ПОЛ, відносяться до токсичних метаболітів, які мають пошкоджувальну дію на ліпопротеїди, білки, ферменти і нуклеїнові кислоти.

Проведені дослідження не показали змін у вмісті дієнових кон'югатів при 5-и денному введенні цефтріаксону (Рис. 4.5.).

Рис. 4.5. Вміст дієнових кон'югатів в слизовій оболонці товстої кишки щурів після введення цефтріаксону (50мг/кг) протягом 5-ти днів. 1 – контроль, 2 – цефтріаксон.

При 14-и денному введенні цефтріаксону вміст дієнових кон'югатів теж залишався відносно стабільним (Рис. 4.6.).

Рис. 4.6. Вміст дієнових кон'югатів в слизовій оболонці товстої кишки щурів після введення цефтріаксону (50мг/кг) протягом 14 - ти днів. 1 – контроль, 2 – цефтріаксон.

Отримані результати свідчать про відсутність перекисного окислення ліпідів.

4.3. Дослідження вмісту МДА

МДА - вторинний продукт ПОЛ. Як відомо, малоновий диальдегід (МДА) утворюється лише з жирних кислот з трьома і більше подвійними зв'язками. МДА належить важлива роль в синтезі простагландинів, прогестерону і інших стероїдів. Негативна роль малонового диальдегіду полягає в тому, що він зшиває молекули ліпідів і знижує текучість мембрани. Внаслідок цього мембрана стає жорсткою. Порушуються процеси пов'язані із зміною поверхні мембрани: фагоцитоз, піноцитоз, клітинна міграція.

Після введення цефтріаксону терміном 5 днів підвищення вмісту МДА не спостерігалося (рис. 4.7.).

Рис. 4.7. Вміст МДА в слизовій оболонці товстої кишки щурів після введення цефтріаксону (50мг/кг) впродовж 5-ти днів. 1 – контроль, 2 – цефтріаксон.

Проведені дослідження показали деяке підвищення концентрації малонового диальдегіду після 14-и денного введення цефтріаксону. (рис.4.8.)

Рис. 4.8. Вміст МДА в слизовій оболонці товстої кишки щурів після введення цефтріаксону (50мг/кг) впродовж 14 -ти днів. 1 – контроль, 2 – цефтріаксон.

Отримані дані свідчать про ймовірну відсутність перекисного окислення ліпідів у слизовій оболонці товстого кишечнику щурів після введення цефтріаксону.