Пристрій касети експрес-тестів VetExpert

РИС.1 Потрійний тест (три мембрани)

РИС.2 Потрійний тест (дві мембрани),

РИС.3Подвійний тест (дві мембрани)

РИС.4 Моно-тести (одна мембрана)

Тест-касета складається з нітроцелюлозної мембрани (однієї, двох чи трьох) і серій накладок, поміщених в пластиковий корпус. На лицеву частину корпусу нанесені буквені позначення:

" S" - лунка для внесення розчинів,

" Т" - зона тесту,

" С" - зона контролю.

Мембрани подвійних і потрійних експрес-тестів VetExpert у складі однієї касети абсолютно відокремлені від сусідніх. На кожній з мембран відбуваються незалежні имунохимічні реакції.

Корпус касети деяких експрес-тестів, наприклад, VetExpert Heartworm Ag, виконаний за унікальною технологією, прозорий, повністю захищає мембрану, запобігаючи вплив зовнішніх факторів. (рис.5)

РИС.5 VetExpert Heartworm Ag(діагностика дирофіляріозу).

2.Пристрій внутрішньої частини тест-касети в області однією мембрани (рис.6)

РИС.6 Внутрішня частина касети.

1) накладка для зразка, на яку спочатку надходять проба і буфер (аналітичний розчин);

2)кон'югована накладка з сорбованим кон'югатом наноколоїдного золота (хромогену) з антитілами або білком А оболонки вірусу;

3) мембрана з імобілізованими в зоні тесту і зоні контролю моноклональними антитілами, поліклональними антитілами або рекомбінантним антигеном, на якій відбувається фіксація імунних комплексів;

4) абсорбентна накладка, вбирає розчини на останньому етапі дослідження.

Виявлення антигену (рис.7)

РИС.7

1) У лунку тест-касети надходить проба (буферний розчин із зразком біологічного матеріалу), що містить шуканий вірус.

2) Під впливом буферного розчину певного складу і концентрації в зоні кон'югатної накладки вивільняються специфічні до даного вірусу моноклональні антитіла, кон'юговані з наноколїдним золотом.

3) Антиген вірусу спочатку взаємодіє з кон'югованими з золотом антитілами в розчині, просувається вздовж мембрани, а потім - з моноклональними антитілами, іммобілізованими на мембрані в зоні тесту. В результаті утворюється імунний комплекс, і в зоні тесту у вікні результатів з'являється забарвлена смуга.

4) Незадіяні в описаній імунної реакції комплекси антитіл з кон'югатом золота продовжують зі струмом рідини мігрувати до зони контролю з іммобілізованими поліклональними антитілами. Відбувається імунна реакція, формується антивидовий імунний комплекс, пофарбована смуга з'являється в контрольній зоні вікна результатів тест-касети.

Таким чином, поява на мембрані (у вікні результатів тест-касети) двох забарвлених смуг свідчить про позитивний результат дослідження: виявленні антигену шуканого вірусу в концентрації не нижче контрольованої, що свідчить про наявність патологічного процесу в організмі тварини-донора біологічного матеріалу.

Виявлення антитіл(рис.8)

РИС.8

1) У лунку тест-касети надходить проба (буферний розчин із зразком біологічного матеріалу), що містить антитіла проти шуканого вірусу.

2) Під впливом буферного розчину певного складу і концентрації в зоні кон'югатної накладки вивільняється Протеїн А оболонки вірусу, кон'югований з наноколоїдним золотом (хромогеном).

3) Антитіла, присутні у складі проби, взаємодіють з протеїнами А, а потім, мігруючи зі струмом рідини, - з рекомбінантним антигеном відповідного вірусу, іммобілізованим в зоні тесту, що призводить до утворення імунного комплексу та фарбуванню зони тесту у вікні результатів.

3) Не задіяні в даній реакції антитіла, зчеплені з протеїном А, кон'югованим з нанноколоїдним золотом, продовжують переміщатися уздовж мембрани з током розчину і потрапляють на ділянку з іммобілізованими антивидовіими антитілами, де формуються антивидові імунні комплекси, і в зоні контролю вікна результатів з'являється забарвлена смуга,

Таким чином, поява на мембрані (у вікні результатів тест-касети) двох забарвлених смуг свідчить про позитивний результат дослідження: виявленні антитіл проти шуканого вірусу в концентрації не нижче контрольованої, що свідчить про наявність патологічного процесу в організмі тварини (донора біологічного матеріалу).