Практическая работа. 1. Подсчет количества лейкоцитов(входит в состав общего клинического анализа крови, а также «укороченного» анализа – содержание гемоглобина

1. Подсчет количества лейкоцитов (входит в состав общего клинического анализа крови, а также «укороченного» анализа – содержание гемоглобина, число лейкоцитов, СОЭ).

Цель опыта: Освоить методику подсчета общего количе­ства лейкоцитов в крови.

Принцип: подсчет лейкоцитов под микроскопом в опре­деленном количестве квадратов счетной сетки и пересчет на 1 мкл крови (или 1 л), исходя из объема единицы счетного поля и разведения крови.

Ход работы: разводят исследуемую кровь в 20 раз 3% уксусной кислотой, подкрашенной геницианвиолетом. Для это­го в меланжер до метки 0, 5 набирают кровь из пальца, а затем до метки 11 – раствор уксусной кислоты. Кислота разрушает оболочки эритроцитов, а краска окрашивает ядра белых клеток. При этом эритроциты становятся невидимыми и не мешают подсчету лейкоцитов. Размешивают и оставляют на 10 минут. (Допускается счет лейкоцитов не более чем через 2–4 часа после взятия крови).

Подготавливают счетную камеру с сеткой и покровное стек­ло, затем притирают стекло к камере, слегка надавливая его таким образом, чтобы по краям стекла появились радужные кольца или полосы. Это свидетельствует о высоте счетного по­ля камеры – 0, 1 мм.

Размешивают, удаляют первую каплю, заполняют камеру и оставляют в горизонтальном положении на I мин. для оседания лейкоцитов. Подсчет лейкоцитов ведется в 25 больших квадра­тах, что составляет 400 маленьких.

Лейкоциты удобнее считать при малом увеличении.

Формула для вычисления количества лейкоцитов в 1мклкрови.

,

где Х – искомое число лейкоцитов в 1 мкл крови;

В – число лейкоцитов в 25 больших квадратах

ВОПРОСЫ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ ПОДГОТОВКИ:

1. Роль лейкоцитов в поддержании целостности и проницаемости клеточных мембран.

2. Роль лейкоцитов в гемостазе.

3. Миграция лейкоцитов.