![]() Главная страница Случайная страница КАТЕГОРИИ: АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника |
Определение групповой принадлежности
1 способ – способ стандартных сывороток. Сыворотки готовят из донорской крови. У сывороток известна концентрация, срок хранения, серийный номер. Сыворотка представляет собой дефибринизированную плазму. Титры сывороток окрашивают разными красителями: I – естественный цвет (бесцветная сыворотка); II – сыворотка синего цвета, на флаконе – 2 полоски по диагонали; III – сыворотка окрашена красным кралителем, на флаконе – 3 полоски по диагонали; IV – сыворотка ярко жёлтого цвета, 4 полоски по диагонали.
Если агглютинации нет ни в одной лунке, в крови нет А и В антигенов, значит данная кровь I группы. Если агглютинация произошла в 1 и 3 лунке, значит в крови есть А-антиген и это кровь II группы. Если агглютинация произошла с 1 и 2 сывороткой, значит в крови есть В-антиген. Это кровь III группы. Если агглютинация произошла с 1, 2, 3 сыворотками, в крови есть и А, и В антигены. Это кровь IV группы. 2 способ – способ стандартных эритроцитов. Эритроциты готовятся из донорской крови. Из вены берут 3-4 мл крови, центрифугируют, осадок эритроцитов отмывают в физиологическом растворе. Хранятся эритроциты недолго, поэтому готовятся ex tempori. Для определения берут известные эритроциты и неизвестную сыворотку. «-» - агглютинации нет; «+» - агглютинация есть. IO IIA IIIB - + + - в сыворотке есть α и β антитела, это I группа - - + - в сыворотке есть β антитело, это II группа - + - - в сыворотке есть α антитело, это III группа 3 способ – метод цоликлонов. Цоликлоны – это моноклональные антитела. Эти АТ производят в культуре тканей, в клетках гибридомы. Цоликлон антиА – аналог α -агглютинина, красного цвета; Цоликлон антиВ – аналог β -агглютинина синего цвета. антиА антиВ - (О) - (О) I + (А) - (О) II - (О) + (В) III + (А) + (В) IV Резус-фактор. Система резус-фактор (Rh) открыта К. Ланштейнером. Данная система состоит из 3 фрагментов гликопротеидной природы: Д, С, Е. Д – самый сильный фрагмент, является настоящим антигеном, вызывает агглютинацию. С – неполный антиген, гаптен. Е – гаптен, отвечает за конглютинацию. Все фрагменты могут быть доминантными и рецессивными. Существует 8 сочетаний фрагментов: СДЕ СдЕ СДе Сде сДЕ сдЕ сДе сде Донор является положительным по Rh, если у него хотя бы один антиген доминантный (сочетания: СДЕ, СДе, сДЕ, сДе, СдЕ, Сде, сдЕ. Донор отрицателен при наличии всех рецессивных генов: сде. Реципиент – либо положительный, либо отрицательный, определяется по антигену Д. Если он доминантный, реципиент положительный (первая колонка генотипов); если рецессивный – реципиент отрицательный (вторая колонка генотипов). Резус-принадлежность определяется экспресс-способом на чашке Петри с помощью антирезусной сыворотки (лошадиная). Уникальную сыворотку можно приготовить из крови Rh - женщины с IV группой крови, которая была беременна Rh + плодом. К антиД-сыворотке добавляют эритроциты, ставят в термостат (45º С) на 7-10 минут. Затем наблюдают за результатом: · Если агглютинация произошла, фрагмент Д присутствует, кровь резус-положительная; · Если агглютинации нет, фрагмент Д отсутствует, кровь резус-отрицательная. Все антигенные системы термолабильны. Чем меньше температура, тем активнее агглютинация. Резус-система – термостабильная система.
|