Объекты и методы исследования

В работе использовались пробы сапропели, отобранные на водоемах г. Стрежевой (Томская область).

Был определён воздушно-сухой вес сапропели, который составил 19, 1% от исходного и добавлена нефть до конечной концентрации 5% и 8% по воздушно-сухому весу. На одну повторность было использовано 2, 5 кг сапропели. Были приготовлены следующие повторности:

1- Контроль 5% - пробы сапропели без добавления биопрепарата МД сухой и с добавлением нефти до конечной концентрации 5% в аэробных условиях (К5%);

2- Контроль 8% - пробы сапропели без добавления биопрепарата МД сухой и с добавлением нефти до конечной концентрации 8% в аэробных условиях (К8%);

3- Опыт 5%-№1 - пробы сапропели с добавлением биопрепарата МД сухой и с добавлением нефти до конечной концентрации 5% в аэробных условиях (5%-1);

4- Опыт 5%-№2 - пробы сапропели с добавлением биопрепарата МД сухой и с добавлением нефти до конечной концентрации 5% в аэробных условиях (5%-2);

5- Опыт 8%-№1 - пробы сапропели с добавлением биопрепарата МД сухой и с добавлением нефти до конечной концентрации 8% в аэробных условиях (8%-1);

6- Опыт 8%-№2 - пробы сапропели с добавлением биопрепарата МД сухой и с добавлением нефти до конечной концентрации 8% в аэробных условиях (8%-2);

7- Контроль 5% - пробы сапропели без добавления биопрепарата МД сухой и с добавлением нефти до конечной концентрации 5% в анаэробных условиях (К5% ан);

8- Контроль 8% - пробы сапропели без добавления биопрепарата МД сухой и с добавлением нефти до конечной концентрации 8% в анаэробных условиях (К8% ан);

9- Опыт 5% - пробы сапропели с добавлением биопрепарата МД сухой и с добавлением нефти до конечной концентрации 5% в анаэробных условиях (5%ан);

10- Опыт 8% - пробы сапропели с добавлением биопрепарата МД сухой и с добавлением нефти до конечной концентрации 8% в анаэробных условиях (8% ан).

В качестве загрязнителя использовали нефть Западно-Катыльгинского месторождения (г. Стрежевой, Томская область).

Отбор проб при инкубации в аэробных условиях производили с интервалом 14 дней, при анаэробных условиях – через 4 месяца.

При отборе проб определялась общая численность микроорганизмов методом предельных разведений на питательной среде мясо-пептонный бульон.

В пробирки с жидкой средой вносят 1 см³ из различных разведений питательного субстрата. После инкубации, исходя из числа пробирок, в которых наблюдался или отсутствовал рост, рассчитывают наиболее вероятное число клеток, содержащихся в 1 см³ исследуемого субстрата.

Разведения исходной суспензии готовились следующим образом. Стерильную среду предварительно разливали в пенициллиновые флаконы и стерилизовали. Во флаконы наливали одинаковый объем среды. Посев проводили из каждого разведения, причем каждое разведение высевали в 2 повторностях (параллельных флаконах). Количество посевного материала везде одинаково и составляет 1 см³. Засеянные пробирки помещали в термостат. Время инкубации - 2 суток. После инкубации регистрировали рост микроорганизмов, используя различные показатели: помутнение среды, образование пленки, осадка, газа или накопление в среде определенных продуктов метаболизма.

Наиболее вероятное число микроорганизмов в единице объема рассчитывали по таблице Мак-Креди, разработанной на основании методов вариационной статистики.

При отборе проб определялось также содержание остаточных нефтепродуктов методом ИК-спектрометрии на приборе КН-3.