Которым окрашивают мазок в течение 1 минуты.

Мазки, окрашенные эозином и метиленовым синим или одним

метиленовым синим, нужно использовать для изучения морфологии и

расположения диплококков, в то время как окончательный

лабораторный диагноз гонореи ставится на основании мазков,

окрашенных по способу Грама. Иначе возможны ошибки, т. к.

стафилококки и стрептококки могут также располагаться

внутриклеточно и напоминать собою гонококки. Форма, расположение и

окраска диплококков по способу Грама дают возможность различать их

между собой.

Однако при идентификации гонококков способ Грама является

ценным только в том случае, если им правильно пользоваться, т. к.

неправильная окраска не только затрудняет диагностику, но и

приводит к большому числу ошибок. При правильной окраске по

способу Грама ядра клеточных элементов (лейкоцитов, эпителиальных

клеток) должны частично удерживать основную фиолетовую краску

(критерий правильности окраски), т.е. в центре они должны быть

окрашены в фиолетовый цвет, а по периферии в оранжево-красный, а

гонококки, расположенные в лейкоцитах и на эпителиальных клетках,

обесцвеченные таким образом и окрашенные дополнительной краской,

будут оранжево-красные. Высокое качество окраски обеспечивается

своевременным прекращением обесцвечивания мазков. При

недообесцвечивании мазков, когда в фиолетовый цвет интенсивно

окрашены ядра клеток, гонококки часто сохраняют фиолетовую окраску

и могут быть приняты за другие микроорганизмы. В переобесцвеченных

мазках стафилококки и стрептококки могут быть окрашены как и ядра

клеток в оранжево-красный цвет и приняты за гонококки.

При производстве бактериоскопического исследования

врач-лаборант должен оценивать правильность окраски мазков по

способу Грама и диагностировать гонорею только по правильно

окрашенным участкам мазка. Качество окраски мазков в значительной

степени зависит и от их приготовления: материал в мазках из

уретры, цервикального канала и ректум на одном стекле должен быть

расположен равномерным, тонким слоем, но в то же время содержать

достаточно материала для исследования.

При неудачной окраске по способу Грама другой мазок,

окрашенный метиленовым синим или бриллиантовым зеленым, после его

исследования нужно перекрасить по способу Грама. Для этого

фильтровальной бумагой с него снимают иммерсионное масло,

несколько раз погружают в 96ё этиловый спирт для полного удаления

масла, а затем красят как неокрашенный.

Если мазок недообесцвечен, его повторно обесцвечивают и

докрашивают нейтральным красным как описано ранее.

Врач-лаборант, исследующий мазки, указывает количество

форменных элементов и слизи, пользуясь следующими обозначениями:

большое, умеренное, незначительное, скудное количество, единичные

клетки; количество лейкоцитов можно обозначать цифрами (0-3, 5-10,

15-20 и т.д., покрывают все поле зрения): гонококки - обнаружены,

не обнаружены. Кроме наличия или отсутствия гонококков следует

отмечать и другую бактериальную флору, указывая ее отношение к

окраске по способу Грама. Там, где это возможно, на основании

морфологических особенностей микроорганизмов, надо давать более

точное определение обнаруженных микроорганизмов: стрептококки,

стафилококки, вагинальная, ложнодифтерийная палочки и т.п.

Необходимо также обращать внимание на присутствие в мазках

влагалищной трихомонады и грибов рода кандида.

Идентификация гонококка производится на основании его свойств:

морфологии, расположения и отношения к окраске по способу Грама.

Гонококк - это парный кокк, имеющий форму кофейного зерна;

кокки обращены друг к другу своей вогнутой стороной. Размножаясь

делением в разных плоскостях, гонококки не образуют цепочек.

Внутри лейкоцитов они располагаются парами или группами так, что

одни диплококки лежат по отношению к другим под различными углами.

Внеклеточное расположение гонококков также имеет свои характерные

особенности. Часто гонококки лежат на клетках плоского эпителия в

большом количестве рядами с расположением диплококков под углом

или перпендикулярно друг к другу внутри ряда. Частота внутри- и

внеклеточного расположения гонококков зависит как от периода

заболевания, так и от методики взятия материала.

Основным дифференциальным признаком является отношение

гонококка к окраске по способу Грама. Гонококки грамотрицательны,

т.е. они легко обесцвечиваются спиртом и окрашиваются

дополнительной краской.

Положительный ответ на гонококки можно давать только на

основании выявления типичных форм их в мазках, окрашенных

метиленовым синим (бриллиантовым зеленым) и по Граму.

Нередко в мазках можно обнаружить гонококки, измененные

морфологически и тинкториально. Однако при некоторой настойчивости

обычно можно найти единичные группы гонококков, хорошо сохранившие

свои основные свойства. Лишь в тех случаях, когда это не удается и

встречаются не вполне типичные, сходные с гонококками диплококки,

или внеклеточные грамотрицательные диплококки, следует давать

описательный ответ, рекомендуя повторное взятие материала и

бактериологическое исследование.

При свежей остро протекающей гонорее правильно проведенное

бактериоскопическое исследование обычно достаточно для

окончательного заключения. При хронической и свежей торпидно

текущей гонорее бактериоскопический метод также нередко позволяет

обнаружить гонококки, в противном случае прибегают к повторным

исследованиям или к бактериологическому методу.

Бактериологический метод исследования

Способы забора материала для бактериологического

исследования

Организационно забор материала для бактериологического

исследования при диагностике гонореи может производиться четырьмя

способами.

1. Забор материала непосредственно в бактериологической

лаборатории, где предусматриваются помещения для больных, их

регистрации и взятия у них патологического материала, а также

необходимое оборудование и инструментарий (гинекологические

кресла, зеркала, ложки Фолькмана, ушные ложки, гинекологические

пинцеты и др.). Данный способ является оптимальным. Взятие

материала производит специально обученный средний медицинский

персонал.

2. Забор материала в кабинете врача, принимающего больного. В

этом случае в кабинете необходимо иметь термостат, поддерживающий

температуру 36, 0-36, 5ё и эксикатор. Взятие материала и посев его

на предварительно прогретую в термостате питательную среду

производит лечащий врач, который в последующем все засеянные

питательные среды помещает в эксикатор, а последний в термостат. В

эксикаторе создают повышенное содержание CO2. Питательные среды с

посевным материалом выдерживают в термостате 24 часа, а затем

доставляют в бактериологическую лабораторию для изучения и

исследования, по возможности создав при этом термостатные условия,

особенно в холодное время года. Данный способ приемлем.

3. Забор материала и посев его на питательную среду

непосредственно в кабинете лечащего врача и последующая доставка

его в бактериологическую лабораторию в ближайшие часы в специально

переносном термостате. Взятие материала и посев производит врач,

принимающий больного, он же контролирует доставку посевного

материала в лабораторию. Посевной материал должен быть доставлен в

лабораторию не позже 6 часов с момента посева. Данный способ

возможен, но не желательный.

4. Забор материала непосредственно в кабинете лечащего врача в

среду сохранения (транспортировки). Материал забирает врач,

принимающий больного, специально подготовленным для этого

стерильным тампоном, помещает последний в стерильную пробирку со

средой сохранения, закрывает резиновым колпачком и помещает в

холодильник при 4ё для хранения до окончания забора материала у

больных, которым планировалось в этот день бактериологическое

исследование, после чего посевной материал отправляется в

бактериологическую лабораторию не позже 24 часов с момента взятия

материала. Данный способ можно применять при пересылке материала с

отдаленных территорий.

Посев от каждого больного должен сопровождаться одновременно

приготовлением двух мазков из того же очага, откуда сделан посев.

Показания к бактериологическому исследованию

Бактериологическое исследование для диагностики гонореи должно

проводиться: 1) у всех мужчин, женщин и детей, обращающихся к

врачам по поводу воспалительных заболеваний мочеполовых органов, а

также у всех половых контактов или предполагаемых источников

заражения гонореей, у которых при микроскопическом исследовании

мазков до и после провокаций гонококки не обнаружены (не менее 4

мазков), но имеются клинические, анамнестические или

эпидемиологические подозрения на гонорею; 2) у детей для

подтверждения гонорейного заболевания, при обнаружении гонококков

бактериоскопическим методом исследования (посев, выделение чистой

культуры, определение ее ферментативных свойств); 3) у больных

гонореей после окончания лечения (не ранее чем через 8-10 дней) и

при снятии их с учета; 4) у больных трихомониазом и другими

негонококковыми заболеваниями после проведенного лечения (при

наличии показаний); 5) у больных, у которых при

бактериоскопическом исследовании обнаружены измененные

микроорганизмы, подозрительные на гонококки; 6) при необходимости

определения чувствительности гонококка к антибиотикам, его

сахаролитических свойств или продуцирования им беталактамазы; 7)

по требованию следственных органов и судебной экспертизы.

Мазки из патологического материала и культур, в которых

обнаружены гонококки, должны сохраняться в лаборатории в течение

3-х месяцев.