Развернутая реакция агглютинации.

Берут 8 одинаковых пробирок, 2 из которых контрольные (КС - контроль сыворотки, КА - контроль антигена). Сыворотку больного обычно разводят от 1: 50 до 1600, иммунную сыворотку разводят до титра или до половины титра (титром агглютинирующей сыворотки называют ее максимальное разведение, в котором она агглютинирует гомологичные клетки). На каждой пробирке указывают степень разведения сыворотки. На первой пробирке пишут номер опыта или название антигена.

В проб. №1 делается рабочее разведение путем добавления; 4, 9 мл изотонического раствора хлорида натрия, к 0, 1 мл сыворотки, разведения равно 1: 50.

В проб. №2 1: 100

В проб. №3 1: 200

В проб. №4 1: 400

В проб. №5 1: 800

В проб. №6 1: 1600

В каждую пробирку, кроме контроля сыворотки, начиная со второй, добавляют 1-2 капли антигена (диагностикума или свежеприготовленной взвеси бактерий). Пробирки помещают в термостат при 37°С. Предварительный учет результатов реакции производится через 2 часа, окончательный через 18-20 часов, В пробирках должны появиться зерна или хлопья агглютината, надосадочная жидкость может быть мутной, контроль сыворотки должен остаться прозрачным.

Учет результатов начинают с контролей. Контроль сыворотки должен оставаться прозрачным, контроль антигена - равномерно мутным. Результаты учитываются как + и - в зависимости от величины бляшки осадка. Интенсивность реакции: следующим образом:

++++ все клетки осели, жидкость в пробирке совершенно прозрачна. Результат реакции резко положительный.

+++ осадок меньше, нег полного просветления жидкости. Результат

реакции положительный.

++осадок еще меньше, жидкость мутная. Результат реакций слабо

положительный.

+ незначительный осадок, жидкость мутная. Сомнительный

результат реакции.

- осадка нег, жидкость равномерно мутная. Отрицательный результат реакции.

Контрольные вопросы.

1. Какие компоненты участвуют в серологических реакциях? Почему реакции называют серологическими, из скольких фаз они состоят?

2. Что такое реакция агглютинации? Ее использование и методы проведения. Что такое диагностикум?

3. Каким антигеном пользуются при исследовании сыворотки больного? Какой сывороткой определяют вид неизвестного микроба?