Третій день

1. Через 24 години при появі специфічних ліній преципітації на середовищі для визначення токсигенності, позитивній пробі на цистиназу досліджувану культуру ідентифікують як C.diphtheriae токсигенну і видають документовану відповідь.

Якщо специфічні лінії преципітації відсутні на середовищі для визначення токсигенності, чашки інкубують ще 24 години.

Якщо проба на цистиназу негативна, культуру ідентифікують як інший вид коринебактерій, а не C.diphtheriae.

2. Культуру з сироваткового агару (після визначення її чистоти), засівають на середовища для ідентифікації та визначення біохімічного варіанту (сахароза, глюкоза, крохмаль, ферментів уреази та нітратредуктази).

3. Чашки з первинним посівом досліджуваного матеріалу проглядають повторно через 36-48 годин інкубації в термостаті за допомогою МБС. При відсутності колоній, підозрілих на C.diphtheriae, видають заключну відповідь, що C.diphtheriae не виявлені. При наявності підозрілих колоній проводять ідентифікацію культури (див. пп. 2-5 другого дня дослідження).

Четвертий день (або п'ятий)

1. При появі специфічних ліній преципітації на середовищі для визначення токсигенності (через 24 години проби на токсигенність 48 годинного росту первинного посіву), позитивній пробі на цистиназу видають документовану відповідь (див п. 1 третього дня дослідження).

2. Культуру, що виросла на сироватковому агарі (виділену з чашки у випадку 48-годинного росту), після визначення її чистоти засівають на середовища для визначення біохімічних властивостей (див. п. 2 третього дня).

3. Повторно (через 48 годин) враховують результати проби на токсигенність, поставленої на 2-й день дослідження. Одночасно проводять облік сахаролітичних властивостей та ферментативної активності, поставлених на 3-й день дослідження.

При відсутності специфічних ліній преципітації через 48 годин від постановки проби на токсигенність, але при позитивній пробі на цистиназу, глюкозу, негативній пробі на уреазу і сахарозу культуру ідентифікують як C.diphtheriae нетоксигенну, вказуючи біохімічний варіант.

Якщо у цистиназопозитивних коринебактерій проба на уреазу позитивна, слід також думати про забруднення дифтерійної культури перш за все C.pseudodiphtheriticum. Для розмежування культур необхідно зробити розсів на тверді поживні середовища, повторно виділити культури коринебактерій і визначити їх біохімічні особливості.

При виділенні токсигенних C.diphtheriae додатково видають відповідь про біохімічні властивості (через 72 години або 96 годин з моменту первинного посіву досліджуваного матеріалу).

Пам'ятати! Усі посіви інкубуються в термостаті при 37 ± 1 °C.