Александр Михайлович, каковы типичные ситуации, треб) щие использования именно микробиологических способов очист-! ки окружающей среды от загрязнений?

— Разные виды загрязнений требуют разных подходов и мае-* штабов очистных работ. Скажем, иногда токсичны не сами про-¹ дукты, а отходы производства. В этом случае проблема выгляди! региональной и даже локальной: есть некий завод, производящие какой-то продукт; в процессе производства по конкретной техноло гии и на конкретном оборудовании образуются конкретные токсич ные отходы. Это касается конкретного региона, конкретной произ* водственной площадки, конкретной реки. Отсюда и подходы i очистке.

Самые же распространенные для нашего времени загрязнения нефть и нефтепродукты. Их можно встретить повсюду. Время от вре«] мени в разных районах планеты случаются крупные разливы щ> 4 транспортировке нефти и нефтепродуктов (аварии танкеров, ведущи^ к загрязнению гигантских акваторий и сотен километров берегово! линии; разрывы нефтепроводов, в результате которых оказыва загрязненными огромные территории, в том числе в самых трудно доступных местах, и т. п.). Наконец, все больше участков, где загр* нение нефтепродуктами многократно превышает ПДК, но считав чем-то само собой разумеющимся. Это АЗС, аэродромы, военны!

части, базы и городки — на них (точнее, под ними) все чаще находят огромные «линзы» нефтепродуктов. Так что нарастающее загрязне­ние нефтепродуктами — весьма актуальная глобальная проблема, с которой можно и нужно бороться, хотя и нельзя решить ее кар­динально. Загрязнения будут случаться, пока используют нефть. И, скорее всего, проблема станет еще острее в ближайшие десятиле­тия. А какие чудовищные загрязнения (не только нефтепродуктами) несут с собой войны!

— Это подтверждают и данные по Чечне — там фантастичес­
кие загрязнения.

— Безусловно, но это самостоятельная тема. Еще один при­
мер — пестициды, без которых трудно себе представить современ­
ное сельское хозяйство. Некоторые из них токсичны даже в малых
дозах. Пестициды и другие химические средства защиты растений
используются на огромных площадях и нередко попадают в про­
дукты питания и воду (подчас — питьевую), так и не разложив­
шись до безопасных компонентов.

Это тоже глобальная проблема, но более контролируемая: чело­веку под силу регулировать использование химикатов в растение­водстве. С нефтяной же «иглы» нам, похоже, уже не «слезть». Но если мы не можем решить эту проблему, нужно научиться жить с ней, делая все возможное, чтобы бороться с существующими и бу­дущими загрязнениями. А ведь это не обычные загрязнения, не простая грязь — многие компоненты нефти, в частности полиаро­матические углеводороды, весьма токсичны, канцерогенны и пер-систентны, т. е. разрушаются крайне медленно, а, например, в За­падной Сибири с ее холодным климатом вообще до конца не разлагаются. Так что мы вынуждены искать эффективные способы борьбы с загрязнением, особенно в районах с холодным климатом, где природа наиболее чувствительна и восстанавливается с трудом (между тем большинство перспективных месторождений располо­жено именно в таких районах). Сейчас этим озабочены амери­канцы, задумавшиеся об эксплуатации богатых нефтяных место­рождений на Аляске. Там много заповедников, а загрязнения — все это понимают — неизбежны. Американцы требуют от нефтедо­бывающих компаний ответа на вопрос, что они собираются сделать для обеспечения безопасности окружающей среды в этом районе, какие гарантии могут дать. Общество хочет знать, как можно бо­роться с загрязнениями и быстро рекультивировать территории, где велась добыча. Поэтому неслучайно нефтяные компании США проявляют особый интерес к решению этих вопросов, в частности, с использованием микроорганизмов.

8 — 4248

— Подобные проблемы и у нас на Сахалине?

— Не только. В Западной Сибири уже загрязнены громадные
участки, по площади сопоставимые с территориями крупных евро­
пейских стран.

— Можно наивный вопрос? Почему именно микроорганизмы?
Как они стали главными «санитарами биосферы»?

— Вопрос законный. В быту на микроорганизмы обычно смот­
рят прежде всего как на причину заболеваний. И слово «микроб»
вызывает у обывателя, как правило, малоприятные ассоциации
Думаю, это наша вина, просчет микробиологов, которые избегают
популярных разъяснений роли микробов в биосфере.

Микроорганизмы, как известно, живут в таких условиях, в ко­торых ни одно другое живое существо жить не может. Есть они и высоко в горах, и высоко над горами, и на рекордных океанских глубинах. Из анализа кернов сверхглубоких скважин следует, что даже на глубинах свыше 5 км есть микроорганизмы.

По оценкам некоторых ученых, если всю биомассу микроорганиц мов, обитающих в столь различных ареалах, равномерно распреде­лить по поверхности Земли, она окажется покрытой слоем метровой толщины. Можно себе представить, сколь значимо влияние этого со­общества на биосферу. А ведь живут его члены исключительно за счет того, что мы называем глобальным циклом соединений. Иными сло­вами, они перерабатывают органику, превращая ее в простые хими­ческие вещества. Все остальные живые существа, включая растения, в этом смысле намного «уступают» микробам.

— В чем причина столь явного «лидерства»? Это связано с био­
массой микроорганизмов или с особенностями их метаболизма?

— Это обусловлено их особенностями — микроорганизмы эф­
фективнее любых других существ превращают сложные соедине­
ния в простые. Мы называем это биодеградацией, но для самих
микробов это — питание, использование сложных органических
соединений в качестве источников азота, углерода, фосфора. По­
лучающиеся в результате такого разложения простые соедине­
ния поступают в биосферу, поддерживая баланс упомянутого
цикла.

— Итак, «стремление к разрушению» у микроорганизмов силь­
нее, чем у других живых существ?

— Именно. Другие живые организмы (прежде всего растения)
«специализируются» на обратном процессе — синтезе из простых
химических веществ (азота, углерода, фосфора и т. д.) сложных
органических соединений, накапливающихся, в частности, в лис­
тве, которая опадает и перегнивает, т. е. перерабатывается микро-

организмами. Это самый наглядный пример глобального цикла органики.

А с недавних пор микроорганизмам приходится иметь дело с но­выми для них органическими соединениями, которые прежде были спрятаны в «тайниках» планеты, скажем, глубоко под ее поверхнос­тью. Так произошло и с нефтью, которую мы «вытащили» на поверх­ность. До этого микроорганизмы взаимодействовали с ней лишь на больших глубинах и пока не совсем ясно, как. По мнению ряда уче­ных, нефть — тоже продукт жизнедеятельности микроорганизмов. Но мы поместили ее в иные условия, где издавна жили другие мик­робные сообщества. И нефтепродукты стали для них новыми субстра­тами, которые они начали потихоньку осваивать.

Кроме того, в биосфере все больше синтетических органических соединений, которых никогда не было в природе. Это, кстати, демон­стрирует не только способность микроорганизмов приспосабливаться к условиям окружающей среды, например, утилизировать новые сое­динения, но и происходящую у нас на глазах эволюцию микроорга­низмов, когда они, применяя «генную инженерию» in vivo, сами кон­струируют генетические системы биодеградации...

Вот факторы, в наибольшей мере определяющие состояние окружающей среды и вызывающие стресс у микроорганизмов:

токсичные химические вещества;

тяжелые металлы;

радионуклиды;

УФ-излучение;

слишком низкое или высокое значение рН;

слишком низкие или высокие температуры;

высокая засоленность;

недостаток влаги;

дефицит кислорода.

Микроорганизмам (в частности —|бактериям) удается так быс­тро приспосабливаться к условиям окружающей среды потому, что они «ухитряются» пользоваться общим набором генетической ин­формации, распределенной между разными микроорганизмами. И когда нужно, один микроорганизм «заимствует» у другого гены, которые могут быть ему полезны. Конечно, это происходит ненаме­ренно. Например, плазмиды (внехромосомные элементы наслед­ственности) распространяются в бактериальных популяциях за счет конъюгации (сближения клеток с образованием между ними мостика, по которому генетический материал переносится от одной клетки к другой). Плазмиды время от времени «прихватывают» с собой и генетический материал хромосом, расширяя тем самым

8* 115

обмен генетической информацией между микроорганизмами. А поскольку все эти события происходят не с миллионами, милли­ардами или даже триллионами, а с гораздо большим числом микро­организмов, селекцией отбираются любые полезные варианты! быстрее растущие, утилизирующие субстрат и т. п.

— То есть на наших глазах происходят локальные «вспышки
эволюции, многократно ускоряются процессы естественного от­
бора?

— Да, но эта область, хотя и очень интересна, не связана непос­
редственно с темой нашей беседы. Есть микроорганизмы, в попу,
циях которых стресс (скажем, охлаждение) вызывает многокр
ное ускорение мутаций. Все это может происходить очень быст;
Подчас даже создается впечатление, что микроорганизмы мен
ются целенаправленно, осознанно. На самом деле это, конечно,
так, но множественность событий позволяет получать громад»
число разных комбинаций, а условия среды быстро отбирают под
ходящие. Отобранные варианты продолжают меняться и т. д. А об­
ладают такими способностями бактерии потому, что в ряде случаев
они выживают только благодаря этому. В «штатной ситуации» они
могут медленно накапливать мутации, но, встретившись с токсич­
ным соединением или испытав другой стресс, они либо успеют пе­
рестроиться, либо погибнут.

— Стало быть, ускоряется их эволюция?

— Да, эволюция как приспособление к условиям окружающей
среды.

Нельзя не упомянуть и о генно-инженерных штаммах микроор­ганизмов. О них говорят все больше, но говорят понаслышке, судят непрофессионально, и немудрено, что общество так боится генной инженерии, в том числе и генетически модифицированных микро­организмов (кстати, не все ГМ-микроорганизмы — продукты ген­ной инженерии). Обществу нужно терпеливо разъяснять, что сама по себе генная инженерия неопасна (хотя опасной может быть лю­бая технология, все дело в том, как и для чего ее применять).

Когда мы вносим микроорганизмы в почву, это требует глубо­ких знаний о микроорганизмах и почве, а также тщательной оценки риска их применения. Применяя любую новую техноло­гию, мы никогда не будем абсолютно уверены, что риска нет. Однако наши знания о микроорганизмах позволяют утверждать, что их можно применять для очистки от токсичных соединений.

ГМ-штаммы со временем тоже будут широко применять. Сей­час разрабатывается нормативная база, гарантирующая безопас­ность их применения.

г Впрочем, рассуждая о рисках и безопасности использования мик­роорганизмов для биоремедиации (восстановления загрязненных территорий), не мешает задаться и другим вопросом: «А какова опас­ность существующего загрязнения с точки зрения его воздействия на микроорганизмы?». Есть основания полагать, что определенные за­грязнения способствуют распространению таких неприятных микро­организмов, как, например, Pseudomonas aeruginosa (синегнойная палочка), Burkholderia cepacia, вызывающая серьезные заболевания, в том числе практически неизлечимый фиброзный цистит. Поэтому, рассуждая о потенциальной опасности, не стоит забывать, что опас­ность реальная уже существует.

— Увы, исключить ее мы не можем, она стала атрибутом на­
шей суровой действительности.

— Да. На самом деле это — продолжение извечных разговоров
о вреде коммунальных стоков. В них появляются патогенные мик­
робы, которые надо обезвреживать.

— Помилуйте, но состав коммунальных стоков, казалось бы,
не очень меняется со временем.

— Это верно, но ведь в данном месте их когда-то не было, а сей­
час они есть, и эпидемиологическая обстановка зависит от их обез­
вреживания — время от времени случаются эпидемии холеры, диз­
ентерии и т. п. — прямое микробиологическое загрязнение
окружающей среды. Это вновь к вопросу о том, не опасно ли для
очистки окружающей среды от загрязнений выпускать в эту среду
микроорганизмы. А ведь мы их давно не только выпускаем в окру­
жающую среду, но и используем в качестве продуктов питания —
например, дрожжи в пивоварении, хлебопечении. Да и кроме
дрожжей есть масса других микроорганизмов, жизненно необходи­
мых для человека, животных, растений. Симбиотические отноше­
ния между ними и обеспечивают стабильность биосферы, без них
она не могла бы существовать. Надо четко уяснить — микроорга­
низмы не просто полезны, они абсолютно необходимы для биос­
феры и нашего существования. И одна из возможностей, которую
они нам «приоткрыли» в последнее десятилетие, — это эффектив­
ный способ борьбы с загрязнением окружающей среды.

— А ведь есть, наверное, и другие?

— Огромное разнообразие микроорганизмов в ближайшие де­
сятилетия и даже годы воплотится во множестве новых продуктов,
ферментов. Пока же их изучают самыми современными методами,
и уже есть очень интересные результаты. Так, выяснилось, что со­
всем не обязательно извлекать из почвенных образцов микроорга­
низмы, из которых, в свою очередь, впоследствии выделять те или

иные «полезные» гены, как это происходило до сих пор. Можно оказывается, получать генетический материал непосредственно и почвенных образцов, минуя стадию выделения микроорганизмов Это не только многократно упрощает работу, но и позволяет ис пользовать генетический материал тех микроорганизмов, которы мы пока не можем культивировать в лабораторных условиях. Мо жем же культивировать мы от силы 1-2% микроорганизмов остальные для нас недоступны в прямом смысле слова — мы вс еще не имеем к ним доступа. А вот генетический материал у них как выяснилось, мы взять можем, можем выделить какой-то ген: перенести его в другой микроорганизм, где он будет вырабатыват определенный фермент или другой белок.

Важность этого трудно переоценить, в частности, для серьезно: перестройки химической промышленности, в результате которой он стала бы более «зеленой» и «дружелюбной» к окружающей среде. Для этого и нужно-то совсем «немного»: заменить особенно неприяг ные или трудно осуществимые этапы синтеза так называемой био трансформацией, в которой используются микробные ферменты...

Мы в нашей беседе все время сбиваемся на общий разгово о роли микроорганизмов, но я даже рад этому, потому что в попу лярных изданиях об этом почти не пишут.

— Что ж, вернемся к основной теме разговора. Итак, в борьб
с органическими загрязнителями мы можем рассчитывать на по
мощь наших друзей-микробов. Как же все это выглядит на прагс
тике?

— Существует несколько подходов. Прежде всего это стимуля­
ция природных микроорганизмов, существующих в местах загрязч
нений. Скажем, им предстоит разлагать углеводороды нефти, н
им не хватает, например, азота, фосфора и кислорода (нефтяна
пленка вполне может перекрыть доступ кислорода). Нужно, стал
быть снабдить их тем, чего им недостает: вспахать землю, насыти
ее кислородом, полить, чтобы повысить влажность. Это все стиму
лирует их жизнедеятельность. Второй подход — использовании
биопрепаратов, основанных на комбинациях микроорганизмов
разлагающих различные углеводороды.

— Их тоже запахивают в почву?

— Можно запахивать, но, как правило, их распыляют в вид<
водных суспензий.

Наконец, третий подход, представляющийся мне наиболее пер спективным, — это совместное использование растений и микроор ганизмов. Причем не любых микроорганизмов, и даже не любы ризосферных (обитающих на корнях растений) микроорганизмов

а тех из них, которые стимулируют рост растений. Здесь отмеча­ется великий эффект синергизма — совместного действия, взаи­модействия, симбиоза, многократно усиливающего результат: растения помогают микроорганизмам, снабжая их корневыми экс­судатами (выделениями), содержащими сахара и другие питатель­ные вещества, а микробы, в свою очередь, помогают растениям усваивать те вещества, которые без микроорганизмов растениям усвоить было бы нелегко. Интересно, что некоторые растения вы­деляют в почву до 50% синтезируемых ими углеродсодержащих соединений, «подпитывая» нужные им микроорганизмы, которые в «ответ» снабжают их фитогормонами, защищают от болезней и вредителей, растворяют плохо растворимые фосфаты, синтези­руют антибиотики, подавляющие развитие патогенных грибов. За­селяя ризосферу, они не допускают туда вредных для растения микроорганизмов. Симбиоз этот необычайно полезен и для расте­ний, и для микроорганизмов, так что плотность ризосферных попу­ляций микробов оказывается гораздо выше, чем в почве в целом.

Основной недостаток обычной интродукции микроорганизмов в окружающую среду заключается в том, что мы микробам никак не помогаем, мы их просто бросаем в почву «на произвол судьбы», и они должны самостоятельно находить себе какую-то нишу, где могли бы развиваться. В природе микробы обычно живут на раз­личных поверхностях, образуя так называемые биопленки, т. е. они распределены в пространстве отнюдь не равномерно, заселяя те структуры, которые им подходят. А это требует времени, и для них непросто. Система «растение — ризосферный микроорганизм» ли­шена этого недостатка. Дополнительная работа, как правило, неве­лика: в камерах, где хранятся семена, распыляют биопрепараты. На прорастающих семенах начинают развиваться микроорганиз­мы, и у них гораздо больше шансов занять ризосферную нишу, чем у других. Это уже серьезный шаг к контролируемому режиму, со­зданию «комфортных» условий для микроорганизмов и обеспече­ния их эффективной деятельности.

— Как выглядит биологическая очистка от других распростра­
ненных загрязнителей, в частности, тяжелых металлов?

— Многие растения, как известно, могут аккумулировать тяже­
лые металлы, «вытягивая» их из почвы. Микроорганизмы вырабаты­
вают механизмы устойчивости к соединениям тяжелых металлов, и
это в основном механизмы окисления или восстановления. В резуль­
тате меняется взаимодействие растений с соединениями металла, т. е.
они могут оказаться более или менее токсичными для растения, мо­
гут в большей или меньшей степени поглощаться растением. Но даже

если микробы не «желают» взаимодействовать с металлами, и в это| случае каждый «занят своим делом»: микробы разрушают органик]) а растения поглощают металлы, т. е. система очищает почву и органики, и от тяжелых металлов. На месте тяжелых металлов м< з жет быть мышьяк и другие токсичные загрязнители.

— Какую роль вы отводите этому направлению в будуще
борьбе с загрязнениями окружающей среды?

— Я думаю, оно будет быстро развиваться, тем более что в гЦ
следнее время появляются сообщения о том, что растения тоже м< |
гут перерабатывать некоторые органические соединения. Пре>
это считалось невозможным. Содействовать этому будет и развита
микробиологических методов защиты растений, когда вместо пес
тицидов используют ризосферные микроорганизмы, которые, кё
уже отмечалось, могут стимулировать рост растений, подавлю
патогены.

— А как отделить вклады растений и микробов в очистку okj
жающей среды, если они, по сути, представляют собой неразде!
мый симбиоз?

— Это нетрудно. Например, ГМ-растения получают в стерил!
ных условиях. Их выращивают не в почве, а в стерильных среда
где нет микроорганизмов. Аналогично можно узнать, на что спс
собны те или иные растения, имея дело с теми или иными химичее
кими соединениями. Существует много подходов, которые позв
ляют точно оценить вклад каждого из «партнеров».

— Подход, о котором мы говорили, направлен прежде всего н!
очистку почвы. Насколько он применим к водной и воздушно^
среде?

— Да, мы больше говорим о почве, ибо в России актуальЕ
именно загрязнение почв. Но в принципе подобный подход мог
использоваться для очистки воды и воздуха.

— Наверное, немаловажно и то, что почву сложнее очист!
другими способами. Воду, воздух можно фильтровать, почву же)
очень-то профильтруешь.

— Вы правы. Правда, с очисткой воды возникают проблемы •
если просто выпускать в воду микроорганизмы, их всегда будет ]
достаточно из-за многократных разбавлений, так что их cлe^
фиксировать на каких-то носителях. Кроме того, микроорганизм
для очистки тех или иных водоемов должны быть выделе!
именно из этих водоемов (скажем, микроорганизмы для очист
морей должны быть устойчивы к соли и т. д.). А воздушные 6s
фильтры на основе микроорганизмов уже изготавливают, и ol
весьма эффективны для ряда соединений. Но это, как я уже

л в начале, относится скорее к региональным и даже локальным | проблемам.

— В заключение — несколько слов о проблемах и перспекти-
I вах этого направления, вселяющего надежду на то, мы победим за-
I грязнения, а не они нас.

— Загрязнение окружающей среды можно считать заболеванием
I экосистем, а биоремедиацию — лечением. Ее следует рассматривать и

как профилактику многочисленных заболеваний человека, вызывае­мых загрязнением среды. По сравнению с другими методами очистки етот гораздо дешевле. При рассеянных загрязнениях (пестициды, нефть и нефтепродукты, тринитротолуол, которым загрязнены мно-I гочисленные полигоны и стрельбища) ему нет альтернативы.

В очистке окружающей среды от загрязнений важно правильно [ выделить приоритеты, минимизируя риски, связанные с тем или иным загрязнением, и учитывая свойства конкретного соединения и его влияние прежде всего на здоровье человека. Необходимы законо­дательные акты и правила, регламентирующие интродукцию в окру­жающую среду ГМ-микроорганизмов, с которыми связаны особые [ надежды на очистку от любых загрязнителей.

В отличие от промышленной биотехнологии, где можно строго [ контролировать все параметры технологического процесса, биореме-| диация проводится в открытой системе, где такой контроль затруд-| нен. В известной мере это всегда «ноу-хау», своего рода искусство.

Развитие биоремедиации, технологий и способов ее примене-! ния требуют междисциплинарного подхода и сотрудничества спе-I циалистов в области генетики и молекулярной биологии, эколо-|гии, инженерных и других дисциплин.

Ю.Н. Елдышев