Студопедия

Главная страница Случайная страница

КАТЕГОРИИ:

АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника






Определение глюкозы в крови






Л абораторная работа

ОПРЕДЕЛЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ГЛЮКОЗЫ В КРОВИ ЭНЗИМАТИЧЕСКИМ КОЛОРИМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ.

Принцип метода

При окислении   Д-глюкозы кислородом воздуха под действием фермента глюкозооксидазы образуется эквимолярное количество перекиси водорода. Под действием пероксидазы перекись водорода окисляет хромогенные субстраты с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски полученного раствора пропорциональна концентрации глюкозы в пробе.

ХОД РАБОТЫ

  Опытная проба Калибровочная проба Холостая проба
Рабочий раствор, мл Сыворотка крови Калибратор, мл Вода дистил. 2, 0 0, 04 - - 2, 0 - 0, 04 -   2, 0 - - 0, 04

 

Реакционную смесь тщательно перемешивают и инкубируют 15 минут при 370С или в течение 25 минут при 18-250С. Через5-10 минут после начала инкубации пробирки интенсивно встряхнуть. После окончания инкубации измеряют оптическую плотность опытной и калибровочной проб против холостой пробы в кювете с толщиной поглощаемого слоя 5 мм при длине волны 490-540 нм.

Расчет концентрации глюкозы проводят по формуле:

Ео

С = -------------- х 10, где Ео – оптическая плотность опытной пробы;

Ек Ек – оптическая плотность калибровочной пробы;

10-концентрация глюкозы в калибраторе.

Результат:

Вывод:

1. Количественное определение глюкозы в моче с помощью диагностической тест-полоски «Глюкофан», «Глюкотест»

Принцип теста: определение основано на специфической энзимотической реакции с использованием ферментов глюкозооксидазы и пероксидазы. Окисление глюкозы кислородом катализируется ферментом глюкозооксидазой. При этом образуется глюкозолактон и пероксид водорода, который в последующей реакции, катализируемой ферментом пероксидазой, окисляет хромогенную систему с образованием интенсивно окрашенных продуктов.

Ход работы:

Тест – полоску погружают в исследуемую мочу и немедленно вынимают. Через 20-30 секунд сравнивают окраску индикаторной зоны с цветной шкалой

Результат:

 

Вывод:

Метод однократной сахарной нагрузки. Сахарные кривые на занятии разбираются по результатам анализа: у больного, при построении сахарных кривых, наблюдалась следующая динамика уровня сахара (ммоль/л):

 

N исходный уровень 30 минут 60 минут 90 минут 120 минут Коэффициенты Рафальского и Бодуэна При каком заболевании характерно
  4, 6 5, 5 6, 0 5, 7 4, 6   Алиментарная гирегликемия
  4, 5 9, 0 7, 7 6, 3 4, 5     Гепатит
  4, 7 7, 9 11, 3 10, 1 9, 8     Латентный сахарный диабет
  6, 0 9, 0 12, 4 12, 7 12, 4   Сахарный диабет
  5, 2 8, 0 11, 0 8, 0 5, 2     Гипертиреоз
  3, 2 3, 8 4, 2 3, 8 3, 2     Гликогеноз
  2, 9 3, 3 4, 0 2, 7 2, 7   Инсулома

 

Построить сахарные кривые и дать оценку в каждом случае.

 


Поделиться с друзьями:

mylektsii.su - Мои Лекции - 2015-2024 год. (0.007 сек.)Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав Пожаловаться на материал