Главная страница Случайная страница
КАТЕГОРИИ:
АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника
Запуск реакции субстратом
|
|
| Холостая проба | Образец/ стандарт | |
| Образец/стандарт, мкл | – | |
| Дист. вода, мкл | – | |
| Реагент 1, мкл | ||
| Перемешать, инкубировать 0–5 мин, затем добавить: | ||
| Реагент 2, мкл | ||
| Перемешать, инкубировать примерно 60 с при 20/25°С или примерно 30–40 с при 37°С. Измерить оптическую плотность А1. Точно через 60 с измерить оптическую плотность А2. |
А = (А1 – А2)образца/стандарта – (А1 – А2)холостой пробы.
Запуск реакции образцом
| Холостая проба | Образец/ стандарт | |
| Образец/стандарт, мкл | – | |
| Дист. вода, мкл | – | |
| Монореагент, мкл | ||
| Перемешать, инкубировать примерно 60 с при температуре 25–30°С или 30–40 с при 37°С. Измерить оптическую плотность А1. Точно через 60 с. Измерить оптическую плотность А2. |
А = (А1–А2)образца/стандарта. – (А1-А2)холостой пробы
Примечания:
Фразу “примерно 60 с при 25–30°С или примерно 30–40 с при 37°С следует понимать так, что пользователь может сам выбрать нужное время инкубации, и оно должно быть точно одинаковым для всех измерений.
Расчет
По калибратору или стандарту
Мочевина [мг/дл] = 
Конц.станд./кал. [мг/дл].
Фактор пересчета
Мочевина [мг/дл] 0.1665 = Мочевина [ммоль/л].
Мочевина [мг/дл] 0.467 =
= Азот мочевины [мг/дл].
Азот мочевины [мг/дл] 2.14 = Мочевина [мг/дл].
Нормальные величины
В сыворотке/плазме [1]
Взрослые мг/дл ммоль/л
Общие пределы 17–43 2.8–7.2
Женщины < 50 лет 15–40 2.6–6.7
Женщины > 50 лет 21–43 3.5–7.2
Мужчины < 50 лет 19–44 3.2–7.3
Мужчины > 50 лет 18–55 3.0–9.2
Дети
1–3 года 11–36 1.8–6.0
4–13 лет 15–36 2.5–6.0
14–19 лет 18–45 2.9–7.5
Соотношение мочевина/креатинин [1]
25–40 [(ммоль/л)/(ммоль/л)]
20–35 [(мг/дл)/(мг/дл)]
Мочевина в моче [2]
26–43 г/сут. (0.43–0.72 моль/сут.)
ФЕРМЕНТАТИВНЫЕ (УРЕАЗНЫЕ) МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОЧЕВИНЫ
Ферментативные методы определения мочевины приобрели наибольшее распространение в современной клинико-лабораторной практике. Эти методы определения мочевины называются также уреазными, так как в них в качестве реактива используется фермент уреаза. Для уреазы мочевина является единственным физиологическим субстратом, поэтому уреазные методы высокоспецифичны.
Ферментативные методы определения мочевины достаточно многочисленны, но все состоят из двух этапов. Первый этап - общий для всех уреазных методов. Суть его заключается в том, что под действием уреазы происходит гидролиз мочевины до аммиака. На втором этапе определяется концентрация аммиака, образовавшегося на первом этапе. В зависимости от используемых способов регистрации концентрации аммиака, ферментативные (уреазные) методы определения мочевины можно разделить на следующие группы:
- колориметрические по конечной точке,
- методы с использованием сопряженных ферментативных реакций,
- потенциометрические,
- методы с использованием технологии «сухой химии».