Методика приготування мазка з культури, що вирощена на рідкому живильному середовищі

Для приготування мазка необхідно взяти чисте знежирене предметне скло. На предметному склі визначте склографом місце нанесення матеріалу.

Петлю прожарте в полум'ї спиртівки, тримаючи її як олівець вертикально у правій руці. Два-три рази проведіть через полум‘я і нижню третину петлетримача. Не випускаючи петлі, лівою рукою візьміть пробірку з культурою кишкової палички, що вирощена на МПБ. Пробку пробірки притисніть до долоні 4-м та 5-м пальцями, пробірку повільно крутіть колоподібними рухами і витягніть з неї пробку. Вінця пробірки, не випускаючи пробки, проведіть через полум'я, петлю введіть та охолодіть об стінки пробірки. Бактеріальною петлею наберіть краплю культури з рідкого середовиша із дотриманням правил стерильності і обережно, не торкаючись стінок пробірки, вийміть її. Далі проведіть пробку і відкритий край пробірки через полум‘я, після чого її закрийте і поставте у штатив.

Взяту культуру нанесіть на скло і, поступово розтираючи її, приготуйте тонкий, рівномірний мазок округлої чи овальної форми діаметром 1 – 1, 5 см.

Після цього петлю прожарте у полум‘ї спиртівки і поставте у штатив.

Висушування мазків. Після приготування мазок висушіть на повітрі при кімнатній температурі або в струї теплого повітря над полум'ям спиртівки (виключаючи сильне нагрівання мазка). Потім висушений мазок зафіксуйте. Фіксований мазок називають препаратом.

Фіксація мазків. При фіксації мазків відбувається загибель мікроорганізмів, вони краще сприймають барвники, ніж живі, і при забарвленні не змиваються. Використовують фізичний (над полум'ям спиртівки) та хімічний (фіксуючими рідинами) способи фіксації.

Фарбування препаратів. При простому методі забарвлення використовують один барвник, наприклад, метиленовий синій, розчин фуксину Пфейфера та ін. Простий метод є орієнтовним і дозволяє виявити мікроорганізми в матеріалі, що мікроскопуються, визначити кількість, форму та взаєморозташування.

Тож, на препарат, що приготовлений з культури кишкової палички, нанесіть фуксин Пфейфера та фарбуйте його 1 – 2 хвилини, після чого барвник змийте водою.

Маркеровка препарату. На предметному склі (зліва) слід вказати дату, назву бактерій або матеріалу, що фарбується.

Мікроскопія пофарбованого препарату. Висушений препарат покладіть на предметний столик мікроскопа та нанесіть на нього краплю імерсійної олії. Мікроскопувати пофарбований препарат, дотримуючись всіх правил мікроскопії з використанням імерсійного об‘єктива (див. робота 3).

Препарати замальовуйте кольоровою ручкою, умовно позначивши поле зору у вигляді кола.

Мікроскопічна картина.

Зверніть увагу, що кишкова паличка в препараті розташовується поодинці і зафарбована в рожевий колір.