Микробиологическая диагностика. Постмортальная диагностика включает об­наружение телец Бабеша—Негри в мазках-отпечатках или срезах из ткани мозга (чаще из гиппокампа

Постмортальная диагностика включает об­наружение телец Бабеша—Негри в мазках-отпечатках или срезах из ткани мозга (чаще из гиппокампа, пирамидальных клеток ко­ры большого мозга и клеток Пуркинье моз­жечка), а также выделение вируса из моз­га и подчелюстных слюнных желез. Тельца Бабеша—Негри выявляют методами окраски по Романовскому—Гимзе, Манну, Туревичу, Муромцеву и др. Вирусные антигены в клет­ках обнаруживают с помощью РИФ.

Выделяют вирус из патологического мате­риала путем биопробы на белых мышах: мы­шей-сосунков заражают интрацеребрально. Срок наблюдения до 28 дней. Обычно зара­женные животные погибают через неделю. Идентификацию вирусов проводят с помо­щью ИФА, а также в РН на мышах, используя

для нейтрализации вируса антирабический иммуноглобулин.

Прижизненная диагностика основана на ис­следовании: отпечатков роговицы, биоптатов кожи с помощью РИФ; выделении вируса из слюны, цереброспинальной и слезной жидкос­ти путем интрацеребрального инфицирования мышей-сосунков. Возможно определение ан­тител у больных с помощью РСК, ИФА.

Лечение. Симптоматическое; эффективное лечение отсутствует. Прогноз при развитии заболевания всегда неблагоприятный.

Профилактика. Профилактические мероп­риятия по борьбе с бешенством направлены на выявление, изоляцию или уничтожение жи­вотных — возможных источников инфекции: бродячих собак, кошек и др. Важно соблюде­ние правил содержания домашних животных. Проводятся карантинные мероприятия при импорте животных. Большое значение име­ет иммунизация антирабической вакциной служебных и домашних собак. Животное, по­кусавшее людей или животных, необходимо наблюдать в течение 10 дней. Пострадавшему промывают рану водой с мылом, обрабаты­вают спиртом или препаратами йода. Края раны иссекают и в первые 3 дня не зашива­ют. Специфическую профилактику проводят антирабической вакциной и антирабической сывороткой или иммуноглобулином.

Первую вакцину против бешенства приготовил Л. Пастер из фиксированного вируса бешенства. Последовательно пассируя уличный вирус бешенства через мозг кролика, ему удалось (на 133 пассаже — за­ражения от кролика к кролику) первоначальный инку­бационный период с 15—20 дней снизить до 7 дней. В последующем инкубационный период не изменялся. Полученный вирус с постоянным инкубационным периодом Л. Пастер назвал фиксированным в отличие от уличного. Фиксированный вирус утратил виру­лентность для других видов животных. Для больше­го снижения вирулентности фиксированного вируса Л. Пастер высушивал инфицированный мозг над ед­ким калием. Первая вакцинация была проведена в 1885 г. мальчику, укушенному бешеной собакой.

В настоящее время для специфической про­филактики применяют инактивированную УФ- или гамма-лучами культуральную вакци­ну. Разрабатывается генно-инженерная вакци­на, содержащая гликопротеин G возбудителя.

Иммунизации вакциной подлежат люди, связанные с риском заражения (собаколовы, ветеринары и др.). С лечебно-профилактичес­кой целью иммунизируют людей, укушенных подозрительными на бешенство животными. При этом активный иммунитет формируется уже во время инкубационного периода.

При множественных укусах для ускоренной защиты создают пассивный иммунитет введе­нием антирабического иммуноглобулина.

17.1.8.2. Вирус везикулярного стоматита

Везикулярный стоматит — вирусная инфекционная бо­лезнь животных (домашний скот и др.), иногда пора­жающая человека в виде гриппоподобной инфекции. Характеризуется везикулярными высыпаниями на слизис­той оболочке рта, гортани, языка, кожи. Вызывается виру­сом везикулярного стоматита, относящегося к семейству Rhabdoviride роду Vesiculovirus. Вирус индуцирует интен­сивное образование интерферона и высокочувствителен к нему. Растет на культуре клеток, вызывая ЦПД и обра­зование бляшек. Относится к арбовирусам, переносится различными комарами. Возбудитель выделяют из везикул

на культуре клеток и курином эмбрионе. Идентификация вируса везикулярного стоматита проводится с помощью РИФ, РСК, ИФА. Специфическая профилактика не раз­работана. Лечение симптоматическое.

17.1.9. Филовирусы (семейство Filoviridae)

Филовирусы (лат. filum — нить) — семейс­тво нитевидных РНК-содержащих вирусов. Содержит род «Марбургподобных вирусов» и род «Эболаподобных вирусов», включающие вирусы Марбург и Эбола — возбудителей аф­риканских геморрагических лихорадок.

Структура и репродукция. Вирусы имеют вид длинных филаментов (80—1000 нм) с оболоч­кой и однонитевой минус-РНК, заключенной в капсид. Содержат полимеразу. Симметрия капсида спиральная. На оболочке имеются шипы (спикулы). Репликация и сборка — в цитоплазме. Выход из клетки — почкованием через клеточную мембрану. При электронной микроскопии негативно контрастированных препаратов вируса Эбола (рис. 17.8) видны нитевидные, иногда ветвящиеся вирионы, имеющие форму цифры или кольца. Они имеют из липопротеиновую оболочку (с по­верхностными выступами — шипами), окру­жающую спиральный нуклеокапсид.

Микробиологическая диагностика. Для определения компонентов вирусов и антител применяют ПЦР, РИФ, ИФА, РН, РСК.

17.1.9.1. Вирусы Марбург и Эбола

Вирус Марбург вызывает геморрагическую лихорадку Марбург — тяжелое заболевание с геморрагическим синдромом и высокой ле­тальностью. Заболевание впервые описано в г. Марбурге (ФРГ) среди лабораторных работ­ников, проводивших исследования на афри­канских зеленых мартышках. Размножается в культуре клеток, иногда не вызывая цитопати-ческого эффекта. Резервуаром вируса являются африканские зеленые мартышки. Человек вы­соковосприимчив к вирусу. Заражение челове­ка происходит при контакте с кровью больных и обезьян, а также воздушно-капельным пу­тем. Описаны отдельные вспышки болезни, а также случаи внутрилабораторных заражений. Инкубационный период 2—19 дней. Начало острое, с высокой температурой, нарушением самочувствия, симптомами со стороны дыха-

тельной системы, ЖКТ, а на 5—7-е сутки появ­ляется геморрагическая сыпь на фоне кровавой рвоты, кровавого поноса, которые могут при­вести к летальному исходу (50 % случаев).

Клинический диагноз подтверждается ви­русологическими и серологическими данны­ми (постановка ИФА, РИФ).

Лечение — плазмой рековалесцентов, ин-терферонотерапия. Специфическая профи­лактика не разработана. Больные подлежат строгой изоляции с соблюдением мер профи­лактики внутрибольничных и внутрилабора-торных заражений.

Вирус Эбола вызывает геморрагическую лихорадку Эбола, характеризующуюся высо­кой температурой, интоксикацией, диареей и геморрагическим синдромом. Различают 3 серотипа вируса. Вирус плохо культивируется в культурах клеток.

Естественный резервуар вируса не установ­лен. Источником инфекции является человек. Заражение происходит контактным и алимен­тарным путями, а также парентерально через кровь больного человека. Инкубационный пе­риод 7—14 дней. Начало острое, с высокой тем­пературой, головными болями, болями в груд­ной клетке, в области живота, рвотой, диареей. Развивается геморрагический синдром (коре-подобная сыпь). Летальность достигает 90 %.

Диагностика основана на клинико-эпиде-миологических данных и подтверждается ви­русологическими и серологическими данны­ми (ИФА, ПЦР и др.).

Лечение — плазмой реконвалесцентов. или спе­цифическим гаммаглобулином. Специфическая профилактика не разработана. Больные подлежат изоляции, устанавливается строгий режим как при карантинных инфекциях.

17.1.10. Коронавирусы (семейство Coronaviridae)

Таксономия. Семейство Coronaviridae включа­ет в себя один род Coronavirus, объединяющий более 10 видов, вызывающих заболевания у че­ловека и животных. На поверхности вирусной частицы обнаруживаются выступы — шипики в виде короны. Коронавирусы широко рас­пространены в природе, вызывают поражения респираторных органов, (в том числе SARS) ЖКТ, нервной системы человека, а также жи-

вотных. Вирус впервые был выделен в 1965 г. D. Tyrrellatas от больного острым ринитом.

Морфология. Вирионы среднего разме­ра (80—220 нм), округлой формы (рис. 17.9). Сердцевина вириона представлена спиральным нуклеокапсидом, содержащим однонитевую плюс-РНК. Нуклеокапсид, имеющий вид спи­рали, окружен липидной оболочкой, покрытой снаружи булавовидными выступами — пепло-мерами, которые при прикреплении к вириону образуют узкий «перешеек». Пепломеры прида­ют вирусной частице вид солнечной короны. В оболочку вириона встроены гликопротеины Е1 и Е2, которые отвечают за адсорбцию вируса на клетке и проникновение в клетку хозяина.

Антигены. Коронавирусы имеют сложный ан­тигенный состав, выделяют 3 антигенно отлич­ных субъединицы. Антигенные детерминанты располагаются на пепломерах. При попадании в организм коронавирусы вызывают образование вируснейтрализующих, агглютинирующих, пре-ципитирующих и других антител. У некоторых штаммов обнаружен гемагглютинин. Выявлены общие антигены у коронавирусов, выделенных от человека, и изолированных от животных. По антигенной структуре коронавирусы, выделяе­мые от человека, разделены на 4 группы.

Резистентность. Вирусы чувствительны к воздействию жирорастворителей, кислот и щелочей, УФ-лучам; при нагревании до 56 °С погибают через 10—15 мин. При комнатной температуре сохраняются в течение несколь-

ких дней. Устойчивы при низких температу­рах, хорошо переносят лиофилизацию.

Культивирование. Коронавирусы репроду­цируются в клетках их естественных хозяев. Так, возможно использование в качестве био­логических моделей клеток эмбриона чело­века, а также первичных клеток эпителия че­ловека. Оптимальная температура культиви­рования 33—35 " С. Возбудители заболеваний птиц размножаются в куриных эмбрионах. Внутриклеточные включения не образуются.

Репродукция. Коронавирусы проникают в клетку путем эндоцитоза, репродукция проис­ходит в цитоплазме. Сборка вириона осущест­вляется на мембране эндоплазматической сети. Вирусные частицы отпочковываются внутри эндоплазматического ретикулума или аппара­та Гольджи. Выход вируса из инфицированных клеток осуществляется путем экзоцитоза.

Эпидемиология и патогенез. Коронавирусы вызывают у человека острые респираторные заболевания, в том числе бронхиты и пневмо­нию, SARS преимущественно в осенне-зим­ний период. Источник инфекции — больной человек, основной путь заражения — воздуш­но-капельный. Так как входными воротами инфекции в большинстве случаев являются верхние дыхательные пути, то болезнь проте­кает по типу ОРЗ. При попадании вируса че­рез рот возможно развитие гастроэнтеритов.

Клиника. Инкубационный период 3—4 дня. В клетках слизистой оболочки верхних дыха­тельных путей происходит первичная репро­дукция вируса, при этом развивается профуз-ный насморк, как правило, без повышения температуры. Продолжительность болезни

5—7 дней. Возможно развитие симптомов ост­рого гастроэнтерита. Коронавирусная инфек­ция может сочетаться с другими заболевания­ми вирусной или бактериальной этиологии.

Иммунитет. После перенесенного заболева­ния формируется гуморальный иммунитет.

Микробиологическая диагностика.Материал для исследования — отделяемое носоглотки. В качестве экспресс-диагностики используют РИФ — обнаружение антигена в клетках эпи­телия верхних дыхательных путей. Выделение вируса затруднено, поэтому основной метод диагностики — серологический. Исследуют парные сыворотки, применяя РТГА, РСК, РН.

Лечение. Симптоматическое.

Специфическая профилактика. Не разработана.

17.1.11. Ретровирусы (семейство Retroviridae)

Ретровирусы — семейство Retroviridae, объ­единяющее около 150 видов однонитевых РНК-содержащих, обратнотранскрибирую-щихся вирусов.

Ретровирусы имеют сферическую форму, размер 80—130 нм. Вирион имеет оболочку и нуклеокапсидную сердцевину. Капсид ико-саэдрический. Типичным является наличие обратной транскриптазы (РНК-зависимой ДНК-полимеразы), связанной с геномом — однонитевой плюс-РНК в виде комплекса из двух идентичных субъединиц. Вирусы содер­жат протеины: группового антигена (gag), по-лимеразный протеин (pol) и белки оболочки (env). Известно около 30 онкоантигенов.

Семейство ретровирусов включает 7 родов, приведенных в табл. 17.3.

В патологии человека значение имеют 4 вида: ВИЧ-1, ВИЧ-2 и вирусы Т-клеточных лейкозов (HTLV-1 и HTLV-2).

17.1.11.1. Вирус иммунодефицита человека

Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ, или H1V — от англ. Human Immunodeficiency Virus) вызывает ВИЧ-инфекцию, заканчива­ющуюся развитием синдрома приобретенно­го иммунного дефицита (СПИД, или от англ. AIDS —Acquired Immunodeficiency Syndrome). СПИД характеризуется преимущественным поражением иммунной системы, длительным течением, полиморфностью клинических проявлений, высокой летальностью, переда­чей в естественных условиях от больного че­ловека здоровому (главным образом, при по­ловых контактах или парентерально с инфи­цированными ВИЧ-материалами, от больной матери плоду, при грудном вскармливании) и склонностью к быстрому эпидемическому распространению. Типичный антропоноз.

Возбудитель ВИЧ-инфекции — лимфотроп-ный вирус, относящийся к семейству Retroviridae роду Lentivirus. Вирус открыт в 1983 г. одновре­менно французским вирусологом Л. Монтанье и американским ученым Р. Галло.

История возникновения и эпидемиология ВИЧ-инфекции. Впервые СПИД описан в 1981 г. в «Еженедельном вестнике заболева­емости и смертности», издаваемом в США (Атланта). Врачи госпиталя Нью-Йоркского университета, а затем Лос-Анджелеса в тече­ние 1980/81 г. зарегистрировали групповое по­явление у гомосексуалистов необычных форм саркомы Капоши и злокачественной пнев-моцистной пневмонии. Когда таких больных было зарегистрировано больше сотни, врачи заподозрили, что имеют дело с каким-то но­вым заболеванием, назвав его «чумой беспут­ных», так как оно было связано с гомосексу­ализмом и возникло в период разгула в США «сексуальной революции», ростом проститу­ции, венерических заболеваний, порногра­фией. Впоследствии обнаружилось, что такое же заболевание встречается и среди людей, страдающих гемофилией, которым много­кратно переливают плазму крови. Затем было

установлено, что заболевание передается при половых контактах, особенно в извращенных формах.

Все это дало основание предположить, что человечество имеет дело с каким-то новым инфекционным заболеванием. Начались по­иски возбудителя, которые увенчалось успе­хом в 1983 г. — из организма больного был выделен новый, ранее неизвестный вирус, названный впоследствии ВИЧ.

Между тем, новое заболевание — ВИЧ-ин­фекция — за 20 с лишним лет охватило все страны и все без исключения континенты. По состоянию на 2003 г. всего на земном шаре зафиксировано более 40 млн ВИЧ-инфици­рованных, и более 16 млн из них погибло от СПИДа. Например, в ряде стран Африки до 15-20 % взрослого населения поражено ВИЧ, в США — более 0, 5 % населения, в неко­торых странах Европы (Испания, Франция, Швейцария и др.) — 0, 3-0, 5 % населения. В России зарегистрировано около 300 тыс. ВИЧ-инфицированных. По прогнозам спе­циалистов, пандемия ВИЧ-инфекция будет продолжаться.

Причиной быстрого распространения ВИЧ-инфекции являются всеобщая вос­приимчивость людей к ВИЧ, многообразие естественных путей передачи, высокая ин-фекционность вируса, длительный период заразности инфицированного, отсутствие до настоящего времени эффективных средств лечения и профилактики.

Морфологические и культуральные свойс­тва. Антигены ВИЧ. ВИЧ — РНК-содержа-щий вирус (рис. 17.10) Вирусная частица имеет сферическую форму, диаметр 100 нм. Оболочка вируса состоит из двойного слоя липидов, пронизанного («утыканного») гли-копротеинами. Липидная оболочка проис­ходит из плазматической мембраны клетки хозяина, в которой репродуцируется вирус. Гликопротеиновая молекула (gp 160), име­ющая молекулярную массу 160 кДа, состоит из 2 субъединиц: gp 120 (молекулярная масса 120 кДа), находящейся на поверхности ви-риона, и gp 41 (молекулярная масса 41 кДа), пронизывающей его липидную оболочку.

Сердцевина вируса имеет конусовидную форму и состоит из капсидных белков р24 и

р25 (молекулярная масса соответственно 24 и 25 кДа), ряда матриксных белков (рб, р7) и белков протеазы (plO, pi 1). Геном образует две нити РНК (состоит из 7900-9800 п.н.), для осуществления процесса репродукции ВИЧ имеет обратную транскриптазу, или ревертазу

Геном вируса состоит из 3 основных струк­турных генов (gag, pol, env) и 7 регуляторных и функциональных генов (tat, rev, nef, vif, vpr, vpu, vpx). Ген gag (от англ. group antigen — группо­вой антиген) кодирует матриксные, капсидные, нуклеокапсидные белки и белки протеазы. Ген pol (от англ. polymerase — полимераза) кодирует обратную транскриптазу (р61/р51, р15-РНКазу р32-интегразу); Ген env (от англ. envelope — обо­лочка) кодирует поверхностный белок gp 120 и трансмембранный gp 41. Функциональные ге­ны выполняют регуляторные функции (reg, tat, nef) и обеспечивают осуществление процессов репродукции и участие вируса в инфекционном процессе (vif, vpu, vpr, vpx).

Жизненный цикл ВИЧ (см. рис. 3.10) со­стоит из 4 стадий:

1) адсорбция и проникновение вируса пу­тем эндоцитоза в клетку;

2) высвобождение вирусной РНК, синтез ДНК-провируса и интеграция провируса с геномом клетки хозяина;

3) синтез РНК вируса, трансляция и фор­мирование вирусных белков;

4) сборка, созревание и высвобождение путем почкования вновь образованных вирионов.

Полный жизненный цикл вируса реали­зуется всего за 1—2 суток, причем в сутки формируется до одного миллиарда вирусных частиц.

Вирус поражает в основном Т- и В-лим-фоциты, а также некоторые клетки моноци-тарного ряда (макрофаги, лейкоциты, клет­ки Лангерганса, дендритные клетки), клетки нервной ткани и другие клетки в связи с тем, что все эти клетки содержат на поверхности рецепторы CD4, с которыми специфически взаимодействует оболочечный белок gp 120 ВИЧ. Не исключено также рН-независимое слияние оболочки вируса с клеточной мем­браной и проникновением вируса в клетку. Таким образом вирус может поражать так­же эпителиальные, эндотелиальные и другие клетки, не содержащие рецептора CD4.

Высокая скорость и многоэтапность процес­са репродукции ВИЧ в различных клетках-ми­шенях сопровождаются генетическими ошиб­ками, которые, суммируясь, обуславливают уникальную чрезвычайную изменчивость ви­руса. Этому способствует наличие в повер­хностном белке gp 120 гипервариабельного участка (V-3), состоящего из 5 аминокислот­ных остатков, который определяет основную нейтрализующую доминанту вируса.

Изменчивость ВИЧ в сотни и тысячи раз превосходит изменчивость гриппа. Это за­трудняет диагностику и специфическую про­филактику ВИЧ-инфекции.

Выделяют 2 типа вируса — ВИЧ-1 и ВИЧ-2, которые различаются по структурным и анти­генным характеристикам. В частности, геном ВИЧ-2 отличается от генома ВИЧ-1 структурой гена env и заменой гена vpu на vpx. Так, ВИЧ-2 (вместо белков gp 120, gp 41, gp 160, gp24 у ВИЧ-1) содержит белки gp 140, gp 105, gp 36. Это обусловливает различия в течении заболеваний, вызываемых инфекциями ВИЧ-1 и ВИЧ-2.

ВИЧ-1, как наиболее распространенный, в силу своей изменчивости имеет не менее 10 генотипов (субтипов): А, В, С, D, E, F и т. д., отличающихся между собой на 25—30 % по аминокислотному составу белков. Внутри субтипа уровень такой вариабельности со­ставляет 5—20 %.

В настоящее время ВИЧ-1 делят на 3 груп­пы: М, N, О. Большинство изолятов относит-

ся к группе М, в которой выделяют 10 подти­пов: А, В, С, D, F-1, F-2, G, Н, I, К. При этом около 10 % ВИЧ-1 имеют мозаичную структу­ру, т. е. являются рекомбинантами. Субтипы распространены по регионам неравномерно. В России на 2003 г. доминирует подтип А, встречаются подтип В и рекомбинантный подтип АВ.

Культивируется ВИЧ на культуре клеток Т-лимфоцитов и моноцитов человека, но для этого требуется присутствия ИЛ-2. К вирусу нечувствительны все виды животных, кроме шимпанзе, хотя клиническое проявление у последних отличается от такового у человека. Известны самостоятельные вирусы иммуно­дефицита, поражающие кошек (ВИК), лоша­дей, обезьян, овец. Они видоспецифичны и не поражают другие виды животных и человека.

Устойчивость ВИЧ. Вирус чувствителен к физическим и химическим факторам, гибнет в течение 30 мин при нагревании выше 56 " С, гибнет в течение короткого времени (через 5—10 мин) при действии дезинфектантов (на­пример, после обработки спиртом, эфиром); для него губительны солнечная радиация, ис­кусственное УФ-излучение, ионизирующая радиация. Имеются данные, что ВИЧ теряет активность при воздействии ферментов слю­ны и пота.

Однако вирус может длительно (до 2 не­дель) сохраняться в высушенном состоянии, в высохшей крови, а в донорской крови мо­жет сохраняться годами. Вирус длительно со­храняется также в кровососущих насекомых, однако это не имеет эпидемиологического значения, так как ВИЧ при укусах насекомых (комары, вши, блохи, клопы, клещи) не пе­редается.

Факторы патогенности, патогенеза ВИЧ-инфекции. Вирус обладает лимфотропностью благодаря тому, что на лимфоцитах Т-хелпе-рах и других клетках (см. выше) существуют в норме рецепторы CD4 (до 300 тыс. на одном лимфоците), имеющие сродство к белку gp 120 ВИЧ.

Это обусловливает прикрепление вируса к лимфоциту, проникновению вируса в клетку и его репродукцию в лимфоците. В результате размножения ВИЧ в лимфоците последние раз­рушаются или теряют свои функциональные

свойства (могут образовываться синцитии). Однако вирус поражает не только Т-хелперы, но и другие клетки (В-лимфоциты, макрофаги, лейкоциты, клетки Лангерганса, дендритные, нервные и другие клетки), которые имеют ре­цепторы CD4 как у Т-лимфоцитов.

В результате размножения вируса в раз­личных клетках происходит накопление его в органах и тканях, и он обнаруживается в крови, лимфе, слюне, сперме, слезах, моче, поте, каловых массах, содержимом урогени-тального тракта, грудном молоке, в гное при воспалительных процессах.

При ВИЧ-инфекции снижается число Т-4-лимфоцитов, а также отношение Т-4/Т-8, на­рушается функция В-лимфоцитов, подавля­ется функция естественных киллеров и ответ на антигены и митогены, снижается и нару­шается продукция комплемента, лимфокинов и других факторов, регулирующих иммунные функции (ИЛ, ИФН и др.), в результате чего наступает дисфункция иммунной системы и расстройство всей ее деятельности.

Поражение иммунных и других клеток, на­рушение синтеза важных иммунореагентов приводит к снижению защитных функций иммунной системы, развитию иммунодефи-цитов и проявлению вторичных заболеваний инфекционной и неинфекционной природы, в первую очередь гнойно-воспалительных за­болеваний, вызываемых условно-патогенной флорой, а также злокачественных опухолей.

Клиника. При ВИЧ-инфекции поражается дыхательная система (пневмоцистная пнев­мония, бронхиты, плевриты); ЦНС (абсцес­сы, менингиты, энцефалиты, деменция и др.); ЖКТ (упорные диареи, энтериты, снижение массы тела и др.); возникают злокачествен­ные новообразования (саркома Капоши, опу­холи внутренних органов).

ВИЧ-инфекция, по В. И. Покровскому, протекает в несколько стадий: 1) инкуба­ционный период, составляющий в среднем 2—4 недели; 2) стадия первичных проявлений, характеризующаяся вначале острой лихорад­кой, лимфаденопатией, диареей и другими малозначительными симптомами; завершает­ся стадия бессимптомной фазой и персистен-цией вируса, восстановлением самочувствия, однако в крови определяются ВИЧ-антитела.

Эта стадия может длиться годами и затем пе­рейти в 3-ю стадию вторичных заболеваний, проявляющихся поражением или дыхатель­ной, или нервной системы, желудочно-ки­шечного тракта, возникновением злокачес­твенных опухолей в различных сочетаниях. Завешается ВИЧ-инфекция последней, 4-й терминальной стадией, собственно СПИДом, характеризующимся кахексией, упорной диа­реей, адинамией, анемией, деменцией, сни­жением всех иммунных показателей с леталь­ным исходом.

В настоящее время среднюю продолжи­тельность жизни инфицированного человека оценивают примерно в 12 лет; средние сроки от сероконверсии до развития СПИДа — в 7— 15 лет, однако эти сроки варьируют как в ту, так и в другую сторону.

Микробиологическая диагностика. Основана на установлении факта зараженности ВИЧ и определении стадии заболевания. Для этого применяют комплекс эпидемиологических, клинических, иммунологических и лабора­торных данных.

Вирусологические и серологические ис­следования включают методы определения антигенов и антител ВИЧ. Для этого исполь­зуют ИФА, ИБ и ПЦР. Сыворотки больных ВИЧ-1 и ВИЧ-2 содержат антитела ко всем вирусным белкам. Однако для подтвержде­ния диагноза определяют антитела к белкам gp41, gpl20, gpl60, p24 у ВИЧ-1 и антитела к белкам gp36, gpl05, gpl40 у ВИЧ-2. ВИЧ-антитела появляются через 2—4 недели пос­ле инфицирования и определяются на всех стадиях ВИЧ-инфекции и при СПИДе. В более ранние сроки выявляются антигены ВИЧ. Метод выявления вируса в крови, лим­фоцитах превосходит по информативности другие тесты, однако он трудоемок и дорог. Для определения ВИЧ-антител разработано множество тест-систем, позволяющих вы­являть до 99, 9 % всех положительных проб. Однако при любой положительной пробе для подтверждения результатов ставится ре­акция ИБ. Применяют также ПЦР, способ­ную выявлять ВИЧ-инфекцию в инкуба­ционном и раннем клиническом периоде, однако ее чувствительность несколько ниже, чем у ИФА.

Клинический и серологический диагнозы подтверждаются иммунологическими иссле­дованиями, если они указывают на наличие иммунодефицита у обследуемого пациента.

Лечение. Все испытанные противовирусные химиотерапевтические методы лечения не да­ют эффекта, и они могут лишь облегчить тече­ние ВИЧ-инфекции. Наиболее действенным оказалось применение ингибиторов обратной транскриптазы, действующих в активирован­ных клетках. Такими препаратами являются производные тимидина — азидотимидин и фосфазид. Фосфазид — отечественный пре­парат, более эффективен и менее токсичен, чем азидотимидин. Однако полного излече­ния эти препараты не дают.

Профилактика. Специфическая профилак­тика не разработана. За рубежом и в России ведутся интенсивные работы по созданию профилактической вакцины. Некоторые об­разцы вакцин уже проходят клинические ис­пытания.

В настоящее время профилактика ВИЧ-инфекции сводится к социальным и противоэпидемическим мероприятиям, а именно: к механической защите от инфици­рования с помощью презервативов, к пользо­ванию одноразовыми шприцами, иглами, ме­дицинскими инструментами, системами для переливания крови, к обеззараживанию ма­териалов и медицинских препаратов из крови и т. д. Важное значение имеет своевременное обследование и выявление ВИЧ-инфициро­ванных, в первую очередь в организованных коллективах, борьба с проституцией, нарко­манией, гомосексуализмом, безнравственнос­тью, к правильному половому воспитанию, просветительской работе среди населения. В России действует закон, предусматриваю­щий уголовное наказание за заведомую пос­тановку другого лица в опасность заражения ВИЧ или умышленное заражение ВИЧ.

Вирусы Т-клеточного лейкоза. Вирусы Т-клеточного лейкоза (Human T-lymphotropic virus, HTLV) вызывают Т-клеточный лейкоз взрослых (HTLV-1) и волосато-клеточный лейкоз взрослых (HTLV-2). Эти вирусы объ­единяет одно свойство — они лимфотропны, в связи с чем вызывают преимущественное поражение иммунной системы. Отсюда ха-

рактер заболеваний, вызываемых вирусами Т-клеточного лейкоза, во многом сходен с ВИЧ-инфекцией. Т-клеточные лейкозы, так же как и ВИЧ-инфекция, характеризуются полиморфностью клинических проявлений, тяжестью течения (доходящей до 100% ле­тальности), разнообразием путей инфициро­вания, схожестью эпидемического процесса. Однако, если ВИЧ-инфекция хорошо изучена (известны структура и биологические свойства вируса, патогенез заболеваний, разработаны методы диагностики, ведется интенсивный поиск средств лечения и специфической про­филактики, тщательно изучена эпидемиоло­гия ВИЧ-инфекции), то такого нельзя сказать в отношении вирусов Т-клеточного лейкоза и заболеваний, вызываемых этими вирусами.

Болезни, вызываемые вирусами Т-кле-точных лейкозов, зафиксированы в странах Северной и Южной Америки, в том числе в США, а также в Японии, Израиле, в европей­ских странах (Великобритания, Голландия и др.), в странах Африки, т. е. практически на всех континентах. Зарегистрировано (по се­рологическим данным) распространение ви­русов и среди населения России, особенно в Сибири и на Дальнем Востоке.

Новое заболевание, названное Т-клеточ-ным лейкозом (лимфомой взрослых), было впервые описано Такаууки с соавт. в конце 70-х годов прошлого века. Более чем 20-летний период изучения заболевания пока­зал, что число инфицированных вирусами Т-клеточного лейкоза от числа обследован­ных колеблется, по разным регионам и у раз­ных исследователей, от 4 до 100 %. В России систематическое направленное обследование населения на вирусы Т-клеточного лейкоза практически не проводится, что, кстати, от­носится и к большинству стран мира. Между тем, учитывая распространенность вирусов

среди населения планеты, многообразие ес­тественных путей передачи, тяжесть и леталь­ный исход заболевания, отсутствие эффек­тивных средств лечения и профилактики Т-клеточных лейкозов, эта вирусная инфекция выдвигается в число актуальных, требующих концентрации сил и средств для планомерно­го ее изучения, разработки (заблаговременно до перерастания этой инфекции в пандемию) мер профилактики и лечения. В противном случае Т-клеточный лейкоз уже в ближайшее время может выйти на такой же уровень в инфекционной патологии, какой сейчас за­нимает ВИЧ-инфекция.

17.1.12. Аренавирусы (семейство Arenaviridae)

Аренавирусы — семейство РНК-содержа-щих безоболочечных вирусов. Свое назва­ние семейство Arenaviridae получило от греч. arenosa — песчаный (из-за рибосом в вирио-не, похожих на песчинки). Семейство вклю­чает вирус лимфоцитарного хориоменинги-та, а также вирусы Ласса, Хунин, Мачупо, Гуанарито, вызывающие тяжелые геморраги­ческие лихорадки (табл. 17.4).

Структура и репродукция. Вирион, имеющий сфери­ческую или овальную форму имеет диаметр около 120 нм. Снаружи он окружен оболочкой с булавовидными гликопротеиновыми шипами GP1 и GP2. (рис. 17.11). Под оболочкой расположены 12—15 клеточных ри­босом, похожих на песчинки. Капсид спиральный. Геном представлен двумя сегментами (L, S) однони-тевой минус-РНК; кодируется 5 белков, в частности L-, Z-, N-, G-белки. Вирион содержит транскриптазу (L-белок, РНК-полимераза). Репродукция — в ци­топлазме; после сборки и включения в вирион ри-босомоподобных частиц происходит его почкование через плазматическую мембрану клетки.

Резистентность. Аренавирусы чувствительны к действию детергентов, УФ-, гамма-излучению и к

нагреванию. Не чувствительны к замораживанию и лиофилизации.

Культивирование. Аренавирусы культивируют в ку­рином эмбрионе, в организме грызунов и на культуре клеток, например Vero-культуре клеток почек зеле­ных мартышек.

Эпидемиология, патогенез и клиника.Аренавирусы относятся к робовирусам, т. е. распространяют­ся с выделениями (моча, кал, слюна) грызунов, загрязняющих продукты питаьия, воду и воздух. Люди заражаются алиментарным путем илиаэ­рогенным механизмом, реже контактным путем. Инкубационный период 1—2 недели. Вирусы обыч­но попадают через кишечный или респираторный тракты. Размножившись в регионарных лимфати­ческих узлах, они распространяются в ретикуло-эндотелиальной системе, циркулируют в крови. В результате взаимодействия цитотоксических Т-лимфоцитов с вирусинфицированными клетками происходит разрушение ткани. При геморрагичес­ких лихорадках образуются иммунные комплексы антиген—антитело, откладывающиеся на базаль-ных мембранах клеток. Происходят некротические изменения печени и селезенки, развиваются гло-мерулонефрит, миокардит и сосудистые измене­ния. Заболевания (в зависимости от особенностей организма и возбудителя) протекают в виде грип-поподобных проявлений или более тяжело — с раз­витием лихорадки, сыпи, отеков, геморрагических изменений различной локализации, пневмонии, почечной недостаточности, поражений ЦНС.

Иммунитет. После перенесенного заболевания обычно формируется длительный иммунитет.

17.1.12.1. Вирусы лимфоцитарного хориоменингита, Ласса, Хунин, Мачупо и др.

Вирус лимфоцитарного хориоменингита вызывает лимфоцитарный хориоменингит, протекающий в виде гриппоподобного заболевания или тяжелых форм в виде серозного менингита или менингоэнцефалита с лейко-и тромбоцитопенией. Лимфоцитарный хориоменингит распространяется с выделениями домашних мышей, загрязняющих продукты питания, воду и воздух.

Вирус Ласса вызывает геморрагическую лихорадку Ласса, характеризующуюся интоксикацией, лихорад­кой, геморрагическими высыпаниями, поражением ЦНС. Вирус передается от домашних многососковых крыс (Mastomys natalensis), или от человека к человеку (заболевания Либерии, США и др.). Заражение чело­века в природных очагах происходит респираторным, алиментарным, контактно-бытовым и парентеральным путями. Естественная восприимчивость людей высокая. Длительность постинфекционного иммунитета не уста­новлена. Лихорадка Ласса — зооноз, имеет природно-очаговый характер. Распространена в странах Западной и Центральной Африки (в Нигерии, Сенегале, Гвинее, Заире и др.), где наблюдаются отдельные вспышки. Первая вспышка была выявлена в 1969 г. в т. Ласса (Нигерия), в связи с чем болезнь и получила свое название.

Болезнь протекает тяжело и характеризует­ся высокой летальностью, достигающей 50%. Инкубационный период составляет в среднем 7—8 дней. Болезнь начинается постепенно, с озноба, по­вышения температуры; появляются рвота, диарея, боли в животе, груди и кашель. Через неделю раз­вивается макуло-папулезная и петехиальная сыпь на коже лица, туловища, конечностей; отмечаются кровохарканье и кишечные кровотечения.

Вирусы Хунин и Мачупо вызывают американские геморрагические лихорадки:

Вирус Хунин — возбудитель аргентинской геморра­гической лихорадки; вирус Мачупо — возбудитель бо­ливийской геморрагической лихорадки. Резервуаром этих вирусов в Южной Америке являются грызуны.

Вирус Гуанарито — новый член комплекса Такарибе, рода Arenavirus, выделенный в 1989 г. в Венесуэле. Вызывает венесуэльскую геморрагическую лихорад­ку, сопровождается токсикозом, гриппоподобными явлениями, диареей. Резервуар инфекции — дикие грызуны (хлопковые крысы и др.).

Вирус Сабиа — новый член комплекса Такарибе, рода Arenavirus, выделенный в 1993 г. в Бразилии. Вызывает бразильскую геморрагическую лихорадку.

Предполагают, что резервуаром инфекции являются грызуны.

Микробиологическая диагностика аренави-русных инфекций. При диагностике аренави-русных инфекций используют вирусологичес­кий и серологический методы. Вирусологический метод: вирус выделяют (из крови, отделяемого глотки, из плевральной, цереброспинальной жидкости, мочи) при заражении культуры клеток или мышей-сосунков, хомячков. Вирусы идентифицируют в РСК, РН, РИФ, ИФА; применяют ГЩР. Серологический метод: анти­тела в сыворотке крови выявляют в РСК, РИФ, ИФА.

Лечение и профилактика. Лечение симпто­матическое. В начальном периоде возможно применение лечебных специфических им­мунных сывороток или плазмы крови рекон-валесцентов. Для специфической профилак­тики разрабатываются живые вакцины.

17.1.13. Калицивирусы (семейство Caliciviridae)

Калицивирусы — семейство РНК-содержащих бе-зоболочечных вирусов с икосаэдрическим капсидом, имеющим чашеобразные углубления (лат. calix — ча­ша). Содержит вирусы гастроэнтерита группы Норволк и вирус везикулярной экзантемы свиней. В соответс­твии с решениями 7-го Международного Конгресса по таксономии вирусов с ] января 2002 г. вступила в силу новая классификация, по которой вирус гепа­тита Е переведен из семейства Caliciviridae в группу гепатит Е-подобных вирусов.

Структура. Вирион безоболочечный; имеет ико-саэдрический капсид с 32 чашеобразными углубле­ниями (ямками). Форма — сферическая (диаметр 27—38 нм) с неровным профилем. На поверхности вириона различают 10 выступов, сформированных краями чашеобразных углублений. Вирионы имеют один главный полипептид и два минорных белка. Геном — линейная, однонитевая плюс-РНК. С РНК ковалентно связан небольшой полипептид (VPg).

Репродукция и сборка вирионов — в цитоплазме. Выход вирионов — при лизисе клеток.

Эпидемиология, патогенез и клиника. Механизм пе­редачи фекально-оральный. Основной путь переда­чи — водный и пищевой. Инкубационный период 1—2 дня. Вирусы вызывают некротические поражения эпи-телиоцитов тонкой кишки, боли в животе и диарею.

Микробиологическая диагностика. Применяют ме­тод иммунной электронной микроскопии для обна­ружения калицивирусов в кале.

17.1.13.1. Вирус гепатита Е

Вирус гепатита Е (HEV) вызывает гепатит Е — антропонозную инфекцию с фекально-оральным механизмом передачи возбудителя и преимущественным поражением печени.

НЕV ранееотносилсяксемейству Caliciviridae. Недавно он переведен из данного семейства в группу гепатит Е-подобных вирусов. Впервые описан М. С. Балаяном и соавт. в 1983 г.

Структура. Вирион безоболочечный, сфери­ческий; диаметр 27-34 нм. Геном — однони­тевая плюс-РНК, которая кодирует РНК-за­висимую РНК-полимеразу папаинподобную протеазу и трансмембранный белок, обеспе­чивающий внедрение вируса в клетку.

Эпидемиология, клиника. Источник инфекции — больные люди. Основной путь передачи — водный. Инкубационный период 2—6 недели. Заболевание сопровождается умеренным поражением печени, интоксикацией и, реже, желтухой. Прогноз благо­приятный, кроме беременных, у которых заболева­ние может привести к летальному исходу

Иммунитет. После перенесенного заболева­ния стойкий.

Микробиологическая диагностика: 1) серо­логический метод — в сыворотке, плазме кро­ви с помощью ИФА определяют: антитела к вирусу (анти-HEV IgM, анти-HEV IgG); 2) молекулярно-генетический метод — при­меняют ПЦР для определения РНК вируса (HEV RNA) в кале и в сыворотке крови боль­ных в острой фазе инфекции.

Лечение. Симптоматическое. Беременным рекомендуется введение специфического им­муноглобулина.

Профилактика. Неспецифическая профилактика направлена на улучшение санитарно-гигиенических условий и снабжение качественной питьевой водой. Созданы неживые цельновирионные вакцины, раз­рабатываются рекомбинантные и живые вакцины.