Методики выполнения лабораторных работ

2.1 Спектрофотометрическое определение витамина В6 (пиридоксина гидрохлорида) 5% в инъекционных препаратах

Цель занятия: ознакомление с методом спектрофотометрического определения количественного содержания пиридоксина гидрохлорида (витамина В₆) в инъекционных препаратах.

Материалы и оборудование

1. Спектрофотометр UV–mini Shimadzu (Япония) позволяющий проводить измерения при длинах волн от 200 до 900 нм, допустимая абсолютная погрешность измерения коэффициента пропускания - не более 1%.

2. Кюветы кварцевые для спектрофотометрии с длиной оптического пути 10 мм.

3. Весы лабораторные по ГОСТ 24104 с пределами абсолютной погрешности однократного взвешивания ±0, 1 мг.

4. Раствор соляной кислоты 0, 1 М

5. Пиридоксина гидрохлорид (ГФ изд. Х1)

Приготовление 0, 1 М раствора хлористоводородной кислоты

8, 5 мл концентрированной хлористоводород­ной кислоты (плотность 1, 19) помещают в мерную колбу вмес­тимостью 1 л, доводят объем раствора водой до метки и тща­тельно перемешивают.

Приготовление раствора РСО (рабочего стандартного раствора) пири­доксина гидрохлорида

Около 0, 1 г (точная навес­ка) пиридоксина гидрохлорида помещают в мерную колбу вместимо­стью 100 мл, доводят 0, 1 М раствором кислоты хлористоводородной до метки и перемешивают.

1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем тем же растворителем до метки и перемешивают.

Срок годности раствора 1 сутки.

Проведение анализа

1 мл препарата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора 0, 1 М раствором кисло­ты хлористоводородной до метки и перемешивают.

2 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем тем же растворителем до метки и перемешивают.

Определение подлинности.

УФ-спсктры поглощения растворов препарата и РСО пиридоксина гид­рохлорида в области от 220 до 350 нм должны иметь максимумы и мини­мумы при одних и тех же длинах волн

Обработка результатов.

Из­меряют оптическую плотность полученного рабочего раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 291 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора рабочего стандартного образца (РСО) пиридоксина гидрохлорида.

В качестве раствора сравнения используют 0, 1 М раствор кислоты хлористоводородной.

Содержание пиридоксина гидрохлорида в 1 мл препарата в граммах (X) вычисляют по формуле:

Х=

где, D₁ - оптическая плотность испытуемого раствора;

D₀ - оптическая плотность раствора РСО пиридоксина гидрохлорида;

а₀ - навеска РСО пиридоксина гидрохлорида в граммах;

V - объем препарата, взятый для определения, в миллилитрах.

Содержание C₈ H₁₁ NO₃ • НС1 (пиридоксина гидрохлорида) в 1 мл пре­парата должно быть от 0, 0475 до 0, 0525 г.