Нормальная микрофлора

Характерная особенность системы воздухоносных путей — присутствие разнообразных бактерий (в том числе патогенных) в верхних отделах и относительная стерильность зон газообмена.

Микрофлора носовых ходов. Наиболее часто обнаруживают дифтероиды, коагулаза-отрицательные стафилококки, а-гемолитические стрептококки, нейссерии и др. Следует помнить, что также можно вы ­делить (нередко при отсутствии клинических проявлений) потенциаль­ные патогены коагулаза-положительные Staphylococcus aureus, Escherichia coli. β -гемолитические стрептококки, протей Подобные состояния обычно квалифицируют как «носительство» с возможностью передачи микроорганизма другому лицу. Более разнообразный спектр микроорганизмов с доминированием грамотрицательной микрофлоры обнаруживают у детей до 1 года.

Микрофлора зева. Микробиоценоз ещё более разнообразный (по мно­гообразию видов уступает лишь толстой кишке и ротовой полости). Поскольку здесь смешивается микрофлораЖК'Г и воздухоносных путей, то из зева выделяют комменсалы и патогены, относящиеся к обеим систе мам. Представителями резидентной микрофлоры считаю т дифтероиды (включая палочку Хофманни). ко агуз а-отрицателыше стафилокок­ки, а-гемолитические и негемолитические стрептококки, нейссерии, MoraxeMa (Branhame.Ua) catarrhalis, микрококки, энтерококки, бак­тероиды, пре.вотелли, боррелии, трепонемы и актиномииеты. Не­сколько реже выделяют коагулаза-положительный Staphylococcus aureus. Streptococcus pneumoniae, каидиды, β -гемолитические стрептококки, нокардии, менингококки, Haemophilus influenzae и кишечные бакте­рии.

Интерпретировать результаты бактериологических исследований сле­дует осторожно, т.к. взаимоотношения различных видов бактерий (бо­лезнетворных н умеренно патогенных видов) с макроорганизмом слож­ны и в большинстве случаев их присутствие недолговременно и не вызы­вает клинически выраженных заболеваний.

Нижние отделы дыхательных путей обычно не содержат бактерий; их инвазия и аккумуляция приводят к развитию патологического процес­са.

Взятие материала

Материалом для исследования обычно являются мазки из носа, но­соглотки, зева, мокрота и промывные воды бронхов. Значительно реже проводят исследования биоптатов лёгких, аспиратов трахеи и прочих об­разцов

Мазки из носа, носоглотки и зева забираются с помощью ватных тампонов. Материал забирают натошак до чистки зубов й ополаскивания полостей рта, носа и глотки. При заборе материала из носа используют тампоны, отдельные для каждой ноздри. При отсутствии секрета их мож­но смочить 0, 9% раствором NaCI. С помощью тампона маленького раз­мера (направляя строго горизонтально) можно достичь задней стенки глот­ки. При заборе материала из зева правильная техника проведения мазка имеет решающее значение. Нельзя прикасаться тампоном к слизистой оболочке полости рта и языка. Поскольку микроорганизмы располага­ются неравномерно, следует, используя один тампон, сначала обтереть правую миндалину, затем — нёбную дужку, язычок, левую миндалину и заднюю стенку глотки.

Мокрота забирается до начала антибактериальной терапии или через определенный промежуток времени, необходимый для выведения препарата из организма больного. Исследуется утренняя порция мокро­ты. Перед сбором мокроты больной должен прополоскать рот слабым раствором антисептика или кипяченой водой, почистить зубы. Мокроту собирают в стерильную посуду. Хранить мокроту до исследования сле­дует в холодильнике при 4" С не более 2-3 часов. Следует помнить, что мокрота должна происходить из нижних отделов; нет необходимости в принуждении больного, если у него в данный момент она не отходит; для облегчения её отхождения можно предварительно провести ингаляцию горячего 0, 9% раствора NaCI. Мокрота содержит микроорганизмы, ответственные за развитие инфекционного процесса, и виды, обита­ющие в ротовой полости. При хронических процессах отхождение мок­роты затруднено, и следует прибегать к бронхо-альвеолярному лаважу (что препятствует контаминации образца микрофлорой верхних дыхательных путей и полости рта).

Проведение исследования

При исследовании отделяемого верхних дыхательных путей посев тампоном производят на чашки Петри с 5 % кровяным агаром, ЖСЛ, Эндо, Сабуро, которые инкубируют при 37°С 18-24'часа. Просматривают выросшие колонии, выделяют чистые культуры, идентифицируют, опре­деляют чувствительность к антибиотикам.

При оценке результатов исследования следует учитывать качественный и количественный состав микрофлоры, содержащейся в исследуемом об­разце. Обнаружение микроорганизмов, не относящихся к нормальной микрофлоре верхних дыхательных путей или необычно большое количе­ство микробов какого-либо вида указывает на их этиологическую значи­мость в заболевании.

При исследовании мокроты выделяют гнойные комочки, промыва­ют их в чашке Петри с изотоническим раствором хлорида натрия, гото­вят мазки, окрашивают их по Граму и Цилю-Нильсену (для обнаружения туберкулезных палочек). 11ри бактериоскопии мазков можно ориентиро­вочно судить о характере и количестве микрофлоры в мокроте, а также выявить труднокультивируемые микроорганизмы.

Посев мокроты делают на ряд питательных сред (см. схему), растирая материал шпателем. Среды с посевами инкубируют при 37" С 18-24 часа, выделяют чистые культуры, идентифицируют их и определяют чувстви­тельность к антибактериальным препаратам.

Чтобы различить контаминацию мокроты микрофлорой верхних ды­хательных путей и полости рта, используют количественные методы исследования.

Мокроту для количественного исследования собирают в стерильную банку с бусами, туда же добавляют питательный бульон из расчета 1: 10 и встряхивают в течение нескольких минут, из полученной гомогенизиро­ванной мокроты готовят последовательные десятикратные разведения, из которых по 0, 1 мл засевают на питательные среды (см. схему). Через сутки инкубации при 37°С учитывают результаты: подсчитывают одно­типные по внешнему виду колонии, их число умножают на 10, так как посев 0, 1 мл, и на степень разведения материала. Из колоний готовят маз­ки, выделяют чистые культуры, идентифицируют, определяют чувстви­тельность к антибиотикам.

Оценка результатов

Клинически значимым считают высев возбудителей в количестве 10⁶-10 ⁷КОЕ/мл. Рост микроорганизмов в меньших разведениях расце­нивают как контаминацию микрофлорой верхних дыхательных путей. Следует, однако, учитывать, что при проведении антибактериальной те­рапии количественное обсеменение мокроты возбудителем может умень­шаться.

Определенное значение имеет вид выделенных микроорганизмов, результат ы первичной микроскопии мазка, повторность обнаруже­ния и нарастание количества определенного вида микроорганиз­мов в процессе заболевании.

Основные возбудители пневмоний у человека

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО ГЛАЗ И УШЕЙ

Нормальная микрофлора глаза в норме только с конъюнктивы и в небольшом количестве регуляр­но выделяются эпидермальный стафилококк, пейссерии, сарцины, у отдельных лиц временно могут встречаться золотистый стафилококк, а-гемолитические стрептококки, энтеробактерии, гемофильная па­лочка, микоплазмы.

Воспалительные заболевания глаза чаще всего локализуются на конъ­юнктиве, слизистой оболочке век, слезном мешке, реже затрагивают роговицу. Инфекция внутренних сред глазного яблока может развиться в результате ге­матогенного ее распространения при септическом процессе или после опера­ций на глазном яблоке, особенно у ослабленных больных после длительных курсов антибиотико- и гормонотерапии. Ведущую роль как возбудители за­нимают представители условно-патогенной группы микроорганизмов.

Взятие материала

Материал забирается до назначения антибиотиков врачом-окулис­том в присутствии лаборанта - микробиолога, который сразу производит посев взятого материала на питательные среды.

При наличии гнойного отделяемого используют стерильные ватные тампоны, которыми забирают гной с внутренней поверхности нижнего века к внутреннему углу глазной щели. Необходимо следит, чтобы рес­ницы при моргании не касались тампона (придерживать веки руками).

При отсутствии видимого гноя следует пользоваться тампонами, смо­ченными стерильным изотоническим раствором, чтобы,.собрать на там­пон как можно больше скудного отделяемого.

Секрет из слезного мешка берут ст ерильным ватным тампоном пос­ле осторожного массажа.

Материал с роговицы берут платиновой петлей после местного обезболи­вания. Мазки отделяемого на стекле для первичной микроскопии выполняют параллельно со сбором материала для микробиологического исследования.

Проведение исследования

При скудном отделяемом используют только жидкие питательные среды, такие, как среды накопления - сахарный бульон и среда для ана­эробов. При более обильном отделяемом необходимо использовать кровяной агар, сывороточный агар, шоколадный агар. При подозре­нии на гонококковую или дифтерийную этиологию конъюнктивита ис­пользуют соответствующие среды.

Все питательные среды после посева на них отделяемого инкубируют при 37°С 24-48 ч. Часто рост появляется только через 48 часов. При появлении роста делают мазки на стекле, которые окрашивают по Граму и производят высевы с жидких питательных сред на плотные среды: кровяной агар, среду Эндо, молочно-солевой агар, агар Сабуро.

Другие среды используют при соответствующих показаниях.

Оценка результатов

Выделение из патологического материала истинно патогенных мик­роорганизмов несомненно свидетельствует об их этиологической роли в воспалительном процессе. Обнаружение микроорганизмов условно-патогенной группы при

условии соблюдения правил асептики в момент взятия материала свиде­тельствует об их участии в воспалительном процессе тканей глаза или является показателем высокого риска развития воспалительного про цесса в ближайшем будущем, особенно в случаях, когда больным пред стоят оперативные вмешательства на органе зрения.

Оценка результатов

1 - очень скудный рост - рост только со сред накопления

2 - скудный рост - рост до 10 колоний

3 - умеренный рост - рост до 50 колоний

4 - обильный рост - рост свыше 50 колоний

Диагностически значимы 3 и 4 степени роста с учетом клиники заболевания и предшествующей антибиотикотерапии

Нормальная микрофлора уха

В норме в наружном ухе. в слуховом проходе присутствуют сапрофит­ные и условно-патогенные бактерии обитатели кожи. Это эпидер­мальный и сапрофитный стафилококк, дифтероиды. В среднем л внутреннем ухе микрофлора отсутствует.

При остром воспалительном процессе возбудителями могут быть золотистый и эпидермальный стафилококки, а и β - гемолитичес­кие стрептококки, гемофильная палочка, энтеробактерии, бакте­роиды, Corynebacterium diphtheriae. При хронических процессах чаще обнаруживают ассоциации грамотринательных микроорганизмов семей­стваэнтеробактерии, псевдомонады, а также микобактерии, актиномицеты и плесневые грибы.

Взятие материала

Отделяемое берут стерильным ватным тампоном. Наиболее досто­верные результаты исследования получают при пункции среднего уха че­рез непрорвавшуюся барабанную перепонку. При наружном отите следует обработать кожу прилегающих областей раствором антисептика, чтобы при взятии материала не было контаминации тампона сапрофит­ной микрофлорой.

IIроведение исследования

Материал засевают на кровяной агар, шоколадный агар, среду Сабу- ро (штриховой посев тампоном, которым брали отделяемое), а также на сахарный бульон и среду для анаэробов. Проводят микроскопию пер­вичных мазков отделяемого, окрашенных по Граму.

Инкубацию посевов па жидких средах проводят в аэробных условиях при 37 °С. кровяной агар - в атмосфере с 5 % СО₂. Посевы просматрива­ют ежедневно. Отрицательный результат исследования выдается при отсутствии роста в течение семи суток. При появлении роста на плот­ных питательных средах проводят его количественную оценку и отсе­вают 2-3 колонии различной морфологии для последующей иден­тификации. С жидких сред делают мазки па стекле для микроскопии (окраска по Сраму) и производят высевы накровяной агар, молочно- солевой агар, среду Эндо.

Оценка результатов

При острых воспалительных процессах обычно высевают в боль­шом количестве монокультуры микроорганизмов и их этиологическая значимость не вызывает сомнения. Более трудна интерпретация результа­тов микробиологического исследования при хронических воспалитель­ных процессах, когда выявляют ассоциации бактерий. В таких случа­ях важна количественная оценка роста различных видов в ассоциации при первичном посеве патологического материала на плотные питатель­ные среды. Виду, преобладающему количественно, по-видимому, принад­лежит ведущая роль в этиологии инфекционного процесса, и характерис­тика биологических свойств этого вида (в том числе антибиограмма) наи­более важна для выбора тактики лечебных мероприятий.

Оценка результатов

1 - очень скудный роет - рост только со сред накопления

2 - скудный рост - рост до 10 колоний

3 - умеренный рост - рост до 50 колоний

4 - обильный рост - рост свыше 50 колоний

Диагностически значимы 3 и 4 степени роста с учетом клиники заболевания и предшествующей антибиотикотерапии