![]() Главная страница Случайная страница КАТЕГОРИИ: АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника |
Лабораторные методыСтр 1 из 5Следующая ⇒
Лекция Диагностика туберкулеза. Туберкулинодиагностика. Цитологическое и бактериологическое обследование. План лекции 1. Рентгенологические методы 2. Эндоскопические методы обследования 3. Функциональные методы обследования 4. Лабораторные методы 5. Бактериоскопическое исследование 6. Биологический метод 7. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) 8. Иммуноферментный анализ (ИФА). 9. Туберкулинодиагностика. Установление диагноза туберкулез — последовательный процесс, требующий от медицинского работника способности комплексно оценить анатомические, клинические (субъективные и объективные) данные, лабораторные показатели и результаты специальных исследований. Для диагностики туберкулеза важно выявить неспецифические признаки воспаления, учесть их значимость и, применяя методы специфической диагностики, подтвердить туберкулезную этиологию заболевания. Основными методами обследования являются опрос пациента (анализ жалоб, тщательно собранный анамнез), осмотр больного и проведение физикальных методов исследования (пальпация, перкуссия, аускультация). Медицинской сестре отводится важная роль в подготовке пациентов к основным и дополнительным методам обследования. При подозрении на наличие туберкулезного процесса, выявленного при флюорографическом обследовании, необходимо проведение клинико-диагностического минимума, который является важной составной частью обязательного диагностического метода (ОДМ) и включает: -тщательный сбор анамнеза, изучение жалоб больного; -физикальное обследования: осмотр, пальпация, перкуссия, аускультация; -анализ флюорографического обследования за предыдущие годы; -рентгенография легких в двух проекциях; -исследование мокроты на микобактерии туберкулеза (бактериоскопия); -проведение туберкулиновых проб; -общие клинические анализы крови и мочи. Рентгенологические методы: рентгеноскопия, рентгенография, томография, компьютерная томография. -рентгеноскопия легких — исследование легких за экраном рентгенаппарата; -рентгенография — рентгеновские снимки легких в прямой и боковой проекциях, а также суставов, костей, почек; -томография — послойное продольное рентгенологическое исследование, дающее дополнительную информацию о характере и локализации очагов, распаде легочной ткани, образовании каверн, изменении в бронхах; -компьютерная томография — обеспечивает получение изображения поперечных слоев человеческого тела с интервалом 1—10 мм; метод представляет ценность при выявлени патологических процессов в плевре, внутригрудных лимфоузлах, головном мозге и паренхиматозных органах. Эндоскопические методы обследования позволяют осмотреть слизистую внутренних органов и взять материал на исследование (биопсия) с дальнейшим гистологическим изучением. При необходимости применяются диагностические операции: видеоторакоскопия, плевроскопия. Функциональные методы обследования — определение функции внешнего дыхания (ФВД). Позволяют определить самые начальные нарушения дыхания и назначить адекватное лечение и реабилитацию больных. Лабораторные методы Существует несколько групп методов, используемых для выявления МБТ в различном диагностическом материале: микроскопия, культуральное исследование, биологические (биопроба, определение вирулентности штаммов МБТ), автоматические системы (MGIT, ВАСТЕС), иммунологические (ИФА) и молекулярно-генетические методики (PCR, LCR, NASBA и др.) Исследуемым материалом на наличие микобактерий туберкулеза может быть любая биологическая среда: мокрота, моча, отделяемое свищей, экссудат, спинномозговая жидкость, резекционный материал, пунктат лимфоузлов, секрет предстательной железы, менструальная кровь. Бактериоскопическое исследование образца с окраской мазка по Цилю-Нильсену для выявления кислотоустойчивых микобактерий (далее — КУБ) является наиболее быстрым, доступным и экономически эффективным. Разрешающая способность данного метода составляет 50 000—100 000 бактерий в 1 мл образца и существенно зависит от ряда факторов: правильности сбора мокроты, подготовленности лабораторного персонала и разрешающей способности используемых микроскопов. Проводится в лаборатории любого медицинского учреждения. Метод окраски по Цилю-Нильсену наиболее часто используется при бактериоскопическом выявлении микобактерий: мазки образца окрашивают фуксином при нагревании, затем обесцвечивают солянокислым спиртом и докрашивают метиленовым синим. В результате микобактерии окрашиваются в красный цвет, а фон — в синий. Это специфическое окрашивание обусловлено способностью микобактерий удерживать краситель при обработке кислотой или спиртом. В бактериологических лабораториях, выполняющих большое количество исследования (100 и более ежедневно), используется люминесцентная микроскопия. Данный метод основан на способности липидов микобактерий воспринимать люминесцентные красители (аурамин, родамин) и затем светиться при облучении их ультрафиолетовыми лучами. Метод обладает большей чувствительностью, чем световая микроскопия, особенно в сочетании с методом обогащения диагностического материала. Этот метод позволяет обнаружить МБТ при концентрации 500—100 в 1 мл исследуемого образца. Результат микроскопического исследования позволяет сделать заключение только о наличии или отсутствии в препарате кислотоустойчивых бактерий (КУБ). Достоверно диагноз туберкулез можно установить только после выделения из клинического материала культуры МБТ с помощью культурального (бактериологическое исследование) метода и ее идентификации. Бактериологическое исследование считается ведущимметодом диагностики туберкулеза, поскольку обладает достаточно высокой чувствительностью (10—100 жизнеспособных микробных клеток в 1 мл исследуемого материала) и специфичностью. Материал для данного вида исследования собирают асептически. Около 1 мл разжиженного и деконтаминированного клинического образца засевают в пробирки со средой и инкубируют при 37 градусах Цельсия в течение 10 недель. Для культивирования микобактерий используют плотные и жидкие питательные среды. К биологическим методам диагностики туберкулеза относятся биологическая проба (биопроба) и определение вирулентности штаммов микобактерий. Чувствительность биологического метода выявления микобактерий высока (1—10 клеток МБТ на пробу). При проведении биологической пробы чувствительных к туберкулезу животных (морских свинок) заражают патологическим материалом, взятым от больного, и в течение 3 месяцев наблюдают за их весом, поведением, местными изменениями. После гибели животных их вскрывают и оценивают туберкулезные изменения, произошедшие в органах, степень их выраженности. Определение вирулентности штаммов микобактерий туберкулеза оценивается по продолжительности жизни лабораторных животных, зараженных МБТ, по степени пораженности их внутренних органов (по М. В. Триус) и по индексу пораженности (Mitchison). С помощью лабораторных исследований не только выявляют микобактерии туберкулеза, но и определяют жизнеспособность возбудителя, болезнетворность, его реакцию на лекарственные препараты. Полимеразная цепная реакция — ПЦР (PCR). В основе метода лежит умножение нуклеиновых кислот (метод амплификации), что позволяет определить наличие возбудителя заболевания, даже если в пробе присутствует всего несколько участков ДНК микобактерии туберкулеза. Иммуноферментный анализ — ИФА — определение наличия антител к микобактериям туберкулеза. Однако с помощью молекулярно-генетических и иммунологических методов нельзя определить активность туберкулезного процесса, поэтому их необходимо интерпретировать с учетом клинико-рентгенологических данных и использовать как дополнительный диагностический методв комплексе с другими методами лабораторной диагностики туберкулеза. При этом значительно сокращаются сроки определения возбудителя, и диагностируется наличие лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза, что особенно актуально во фтизиатрии. К сожалению, использование этих методов ограничено из-за их высокой стоимости. Для ускоренной культуральной диагностики и определения лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза относится система ВАСТЕС MGIT 960 (mycobacteria growth indicator tube). Культивирование микроорганизмов производится в специальных пробирках с жидкой питательной средой, которые вставляются в прибор ВАСТЕС MGIT 960. Для стимуляции роста микобактерий и подавления роста посторонней микрофлоры используются добавки роста MGIT Growth Supplement и смесь антибиотиков PANTA. Регистрация роста микроорганизмов осуществляется оптически. В ее основе лежит флюоресценция, возникающая при потреблении кислорода в процессе роста микобактерий. Флюоресценция автоматически регистрируется фотодатчиками, встроенными в прибор ВАСТЕС MGIT 960. Интенсивность свечения регистрируется в единицах роста (GU — growth units). Специфическим диагностическим тестом при туберкулезе является туберкулинодиагностика.
|