Главная страница Случайная страница КАТЕГОРИИ: АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника |
Анафазний метод
Анафазний метод простий і менш трудомісткий, дозволяє простежити долю клітини, яка несе хромосомні аберації (відстаючий в процесі ділення фрагмент або міст в анафазі з великою ймовірністю означає загибель клітини). У той же час анафазний метод крім структурних хромосомних аберацій реєструєтакож інші порушення в процесі розподілу, наприклад, нерозходження і втрату цілих хромосом і хроматид, які буває важко відрізнити від фрагментів активного центру. Серйозним недоліком цього методу при роботі з лімфоцитами людини, на відміну від асинхронних моношарових культур, є мала тривалість анафази і неможливість накопичення клітин на ційстадії, подібно накопиченню метафаз колцемідом [Шмакова и др., 2003]. Ана-телофазний аналіз високочутливий при тестах з найрізноманітніших напрямків. Будь то проби субстратів з навколишнього середовища (вода, грунт, донні відкладення) або ж речовини антропогенного походження, а також випромінювання різного спектру (як іонізуючі, так і неіонізуючі). Крім того гідністю даного аналізу є його універсальність (він застосовується в переважній більшості випадків, коли йде мітоз) і простота в приготуванні препаратів, що дуже важливо при роботі з клітинами тварин. Ана-телофазний аналіз хромосомних аберацій на клітинах цибулі (Allium cepa), рекомендований як інструмент цитомоніторинга навколишнього середовища. Шляхом вимірювання генотоксичності, він сприяє оцінці ступеня екологічного ризику від засобів побутового та промислового призначення. Включає аналіз під мікроскопом препарату клітин, зафіксованих і забарвлених на стадії проліферації. Існує ряд варіацій ана- телофазного аналізу. Придатними для обліку хромосомних аберацій є не надто ранні анафази і ранні телофази. Оскільки клітина яка ділиться не завжди розпластується на препараті по поздовжній осі поділу, то при відборі клітин, придатних для підрахунку хромосомних аберацій, треба брати до уваги відстань між дочірніми ядрами - вона повинна бути не менше розміру однієї з них. На стадії анафази і телофази підраховуються дві класичні для даного аналізу категорії аберацій, що представляють собою відставання від полюсів хромосомного матеріалу (Ацентричні фрагменти і кільця, що відстали від хромосоми) і мости. Всі вони досить добре видно візуально і вони є досить помітними. Дуже часто в окрему категорію включаються і підраховуються відставання і забігання, що вказують на зміни ахроматинового веретена поділу [Бердишев, 1970].
|