Споры бактерий и грибов. Стадии спорообразования. Индукторы спорообразования. Методы выявления спор.

Спора и спорообразование у бактерий

Определение	Эндоспора - Покоящаяся форма, позволяющая сохранить наследственную информацию бактериальной клетки в неблагоприятных условиях внешней среды
Функция	Защита от: неблагоприятных физико-химических факторов внешней среды истощения питательной среды
Строение	ДНК, окруженной многослойной оболочкой, в т.ч. пептидогликановой (кортекс)
Место образования	внешняя среда (не в организме человека) искусственная питательная среда
Факторы, обуславли- вающие термоустой- чивость	практически полное отсутствие свободной воды повышенная концентрация кальция наличие дипиколиновой кислоты особое строение белка особое строение пептидогликана кортекса
Стадии образования	формирование спорогенной зоны (уплотненный участок цитоплазмы вокруг нуклеоида) образование проспоры (изолирование спорогенной зоны от остальной части цитоплазмы врастающей внутрь клетки ЦПМ) образование кортекса образование внешней оболочки, содержащей дипиколиновую кислоту отмирание вегетативной части клетки
С порообразующие бактерии	бациллы (спора меньше диаметра клетки) клостридии (спора больше диаметра клетки)
Выявление	Окраска по Цилю-Нильсену или по Ожешко

Окраска по Цилю-Нильсену для выявления кислотоустойчивых бактерий и спор:

1. На фиксированный мазок накладывают полоску фильтровальной бумаги и наливают карболовый фуксин Циля и над пламенем спиртовки подогревают препарат 2-3 раза до появления паров. Необходимо для размягчения оболочки споры («протравливания»).

2. Бумагу снимают, препарат обесцвечивают 5% раствором серной кислоты.

Промывают водой и докрашивают метиленовым синим.

Результат: споры (и кислотоустойчивые бактерии) прокрашиваются в красный цвет. Кислотоподатливые бактерии и цитоплазма обесцвечиваются из-за особенностей химического состава и приобретают голубой (синий) цвет.

Окраска по Ожешко:

1. На нефиксированный мазок наносят 0, 5% раствор соляной кислоты при подогревании
2. Промывают и фиксируют в пламени спиртовки.
3. Окраска по Цилю-Нильсену.

Результат микроскопии: споры – красные, вегетативные клетки – синие.