Цель применения, состав и значение элективных питательных сред, среды накопления (Мюллера), МПА (скошенный агар по методу Шукевича) и МПБ. Посев и характер роста.

Основной принцип элективных сред – учет избирательных потребностей микроорганизма в специфических условиях развития.

Посевы из патологического материала необходимо проводить следующим образом. Бактериологическую петлю (иглу) вводят в орган, очаг на глубину 1 см и делают посевы в чашки Петри или пробирки на твердые и жидкие питательные среды методом разряженного посева или укола. Также производится посев на твердые элективные и селективные питательные среды. Делается это для изучения культуральных и биохимических свойств микроорганизмов.

Посевы на скошенный агар по методу Шукевича и агар Плоскирева проводят в конденсационную воду для обнаружения микроорганизмов группы протея, которая характеризуется ползущим ростом по агару.

Для выделения эшерихии и сальмонелл из различных объектов и дифференциации их подгрупп используют элективные питательные среды – Эндо, Левина, Смирнова.

Каждая из этих сред имеет в своем составе МПА, углевод (х/ч лактоза), соль и индикатор. Индикатор – вещество, по изменению цвета которого можно судить о росте специфических бактерий. Одна из наиболее употребимых сред – элективная среда Эндо:

1. МПА – 100 мл (pH – 7, 6);

2. Лактоза х/ч – 1 гр.;

3. Фуксин основной насыщенный 0, 1% - 0, 5 мл;

4. Сернокислый натрий б/в – 1, 25 мл.

Ингредиент в среде Эндо – лактоза, индикатор – фуксин, обесцвеченный сернисто-кислым натрием. При росте кишечных бактерий на среде Эндо, вследствие разложения лактозы и образования молочной кислоты, восстанавливается красный цвет фуксина, чего не происходит при росте сальмонелл.

При росте бактерий рода E. Coli среда окрашивается в красный цвет, колонии приобретают красно-фиолетовый цвет с металлическим оттенком.

Сальмонеллы – полупрозрачные круглые колонии светло розового цвета с голубоватым оттенком.

Среда Левина:

1. МПА – 100 мл;

2. Лактоза х/ч – 1 гр.;

3. 2% водный раствор желтого эозина – 2 мл;

4. 0, 5% спиртово-водный р-р метиленовой сини – 2 мл;

5. Двухосновной фосфорнокислый калий – 0, 2 г.

Среда до посева темно-вишневого цвета.

Кишечная палочка – колонии черные или с черным центром, окрашены светлой зоной.

Сальмонеллы – круглые бесцветные колонии или бледно-розовые. Цвет среды не изменяется.

Среда Смирнова:

1. МПА – 100 мл;

2. 2% спиртово-водный р-р бромкрезилпурпура 10 мл;

3. 0, 8% спиртово-водный р-р метиленовой сини – 2 мл;

4. Лактоза х/ч – 1, 0 гр.

Все компоненты смешиваются и стерилизуются при 0, 7 атм. 20 минут.

Среда до посева синего цвета.

Кишечная палочка – колонии зеленоватого цвета, сальмонеллы – синего, под цвет среды, кокки – голубого цвета.

Среда Мюллера:

1. МПБ – 90 мл;

2. Мел – 4, 5 г.;

3. Р-р Люголя – 2 мл;

4. 50% р-р гипосульфита натрия – 10 мл.

Среда служит для накопления сальмонелл и рост их характеризуется помутнением бульона и образованием поверхностной пристеночной пленки. Рост другой микрофлоры задерживается благодаря тетротионат натрия, образующемуся при соединении гипосульфита натрия с р-ром Люголя.