Главная страница Случайная страница КАТЕГОРИИ: АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника |
Определение групп крови
Существуют следующие способы определения групп крови 1.Определение групп крови с использованием стандартных изогемагглютинирующих сывороток. 2.Определение групп крови с использованием стандартных эритроцитов. 3.Определение групп крови цоликлонами анти – А, анти – В, анти – АВ. 4.Определение групп крови перекрестным способом. В повседневной работе в лечебных учреждениях в настоящее время для определения групп крови пользуются цоликлонами анти – А, анти – В, анти – АВ. Значительно реже простой реакцией изоагглютинации со стандартными сыворотками. Определение групп крови системы АВО цоликлонами анти-А, анти-В и анти-АВ Используются моноклинальные антитела (анти-А и анти-В). Определение группы крови моноклональными антителами производится с помощью реакции гемагглютинации на плоскости, в солевой среде или на пластинке. Для получения моноклональных антител применяют гибридомную технологию.Гибридома – клеточный гибрид, образованный путем слияния клетки опухоли костного мозга (миеломы) с иммунным лимфоцитом, синтерзирующие моноклональные антитела. Техника определения. Прежде всего определяют пригодность цоликлонов. Раствор цоликлона анти-А должен иметь красный цвет, анти-В – синий и анти-АВ-бесцветный. Флаконы цоликлонов должны быть закрыты резиновыми пробками и соответствовать сроку годности. Карандашом делят планшетку на 3 сектора с обозначением их «анти-А», «анти-В» и анти- «АВ». По краю тарелки подписывают фамилию, имя и отчество больного. Пипетками на которых также обозначены названия цоликлонов наносят капли цоликлона на каждый сектор в соответствии с обозначением. В длинную стеклянную пипетку набирается исследуемая кровь и наносится по одной маленькой капле рядом с каплями цоликлонов. Капли тщательно перемешивают стеклянными палочками. Результат реакции оценивают через 3 мин. Оценка результатов. 1 )Агглютинации нет ни с одним из трех цоликлонов – кровь 0 (1) группы. 2)Агглютинация с цоликлонами анти – А и анти –АВ – кровь А(11) группы. 3)Агглютинация с цоликлонами анти-В и анти- АВ – кровь В (111) группы. 4)Агглютинация со всеми тремя цоликлонами – кровь АВ (1У) группы. У больных с группой АВ (IV) необходимо провести контрольное исследование крови: вместо цоликлона анти-А и анти-В следует взять изотонический раствор хлористогонатрия.Реакция агглютинации должна быть отрицательной. Определения группы крови реакцией изоагглютинации со стандартными сыворотками. Эту реакцию лучше проводить на тарелке, разделенной на 4 части сектора помеченные: О(1), А(11), Б(111) и АВ(1У) Берутся стандартные сыворотки трех групп: О(1), А(11), В(111) и двух серий. На каждый сектор тарелки наносится по две капли сыворотки разных серий. На сектор 0(1) – 2 капли сыворотки 0(1) двух серий, на сектор А(2) – две капли сыворотки А(2) двух серий и на сектор В(3) две капли сыворотки разных серий В(3). Сектор АВ(1У) остается свободным. В длинную стеклянную пипетку с помощью небольшой резиновой груши набирают из пробирки около 1 мл исследуемой крови и наносят на тарелку по одной маленькой капле рядом с каплей стандартной сыворотки. Капли перемешивают стеклянными палочками до тех пор, пока смесь не окрасится в равномерный красный цвет. В течение трех минут покачивают тарелку, затем добавляют по капле изотонического раствора хлорида натрия и, продолжая покачивать до истечения 5 минут, оценивают результат. 1).Агглютинации нет нигде - исследуемая кровь 0(1) группы. 2).Агглютинация с сывороткой 0(1) и В(111) – исследуемая кровь А(11) группы. 3).Агглютинация с сывороткой 0(1) и А(11) – исследуемая кровь В (111) группы. 4).Агглютинация во всех каплях – исследуемая кровь АВ (1У) группы. В этом случае необходимо сделать дополнительное исследование с 1 серией стандартных сывороток АВ (1У) группы. Если агглютинации нет – исследуемая кровь АВ(1У) гр.
|