Методы определения витаминов

Цель работы: изучить теоретические и освоить практически методы исследования витаминов С, β -каротина.

Определение содержания аскорбиновой кислоты

Принцип метода. Содержание аскорбиновой кислоты в соках осуществляется йодометрическим методом. В методе используется способ обратного титрования: в экстракт из растительного сырья вносят избыток йода, связываемый раствором тиосульфата натрия в присутствии крахмала.

С₆Н₈О₆ + I₂ → С₆Н₆О₆ + 2HI

аскорбиновая дегидроаскорбиновая

кислота кислота

Приборы: бюретка вместимостью 25 см³; пипетка 20 см³; градуированная пипетка 2 см³; колбы плоскодонный 50 см³; градуированная пробирка
10 см³

Реактивы: серная кислота (6 моль/л), 2% раствор соляной кислоты, 1% раствор иодистого калия, 0, 001 моль/дм³ раствора йодат калия,
0, 02 моль/л тиосульфат натрия; крахмал 0, 5% раствор), фруктовый сок; дистиллированная вода. 1%-ного раствора йодистого калия и 2 см³ 0, 5%-го раствора крахмала.

Техника выполнения:

1. 1 г сока переносят в мерную колбу на 100 см³, доводят до метки дистиллированной водой, перемешивают и фильтруют через складчатый бумажный фильтр в сухую колбу или стакан.

2. Отбирают в коническую колбу вместимостью 250 см³ 20 см³ фильтрата, приливают 1 см³ 2%-ного раствора соляной кислоты, 0, 5 см ³ 1%-ного раствора йодистого калия и 2 см³ 0, 5%-го раствора крахмала. Смесь перемешивают и титруют из микробюретки 0, 001 моль/дм³ раствором йодата калия до устойчивого синего окрашивания.

3.Параллельно ведут контрольное титрование. Для контрольного титрования вместо фильтрата берут 20 см³ дистиллированной воды.

4. 1 см³ 0, 001 моль/дм³ раствора йодата калия соответствует 0, 088 мг аскорбиновой кислоты.

Содержание аскорбиновой кислоты рассчитывают по формуле:

Х = ,

где С₁ – общий объем вытяжки, см³;

С₂ – аликвота вытяжки, взятая на титрование, см³;

С₃ – объем 0, 001 моль/дм³ раствора илдата калия, пошедшего на титрование опытного образца, см³;

С₄ – объем 0, 001 моль/дм³ раствора йодата калия, пошедшего на титрование контрольного образца, см³;

Н – масса навески, г.

Сделать вывод.

Определение β -каротина

Принцип метода: Метод определения каротиноидов основан на фотометрическом измерении массовой концентрации каротиноидов в растворе этилового спирта.

Приборы: ФЭК, мерные колбы на 50 см³, мерный цилиндр.

Реактивы: этиловый спирт, сок

Техника выполнения:

1. 1 см³ сока помещают в мерную колбу на 50 см³, доводят объем этиловым спиртом до метки, перемешивают и фильтруют.

2. В фильтрате определяют оптическую плотность при длине волны 450 нм, в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве контроля используется этиловый спирт.

3.Содержание β -каротина (в мг/100 см³) рассчитывают по формуле:

,

где Д – оптическая плотность раствора; 0, 00208 – количество β -каротина в мг раствора, соответствующее по окраске стандартного образца;

50 – разведение, см³.

3. Сделать вывод.

Вопросы для контроля знаний

1. Признак, по которому осуществляют классификацию витаминов.

2. Охарактеризуйте физиологическую роль вам известных витаминов.

3. Суточная потребность человека в отдельных витаминах.

4. Что такое гиповитаминоз? Авитаминоз?

5. Какие витамины дефицитны?

6. В чем заключается общие причины потери витаминов при хранении и производстве продуктов питания?

7. Методы определения витаминов в пищевых продуктов.

Лабораторная работа № 6