Анатоксины. Получение. Применение. Достоинства

Для специфической профилактики инфекционных заболеваний, возбудители которых продуцируют экзотоксин, применяют анатоксины. Анатоксин - это экзотоксин, лишенный токсических свойств, но сохранивший антигенные свойства. Метод получения анатоксина предложил в 1923 г. французский ученый Рамон. В отличие от вакцин, при использовании которых у человека формируется антимикробный иммунитет, при введении анатоксинов формируется антитоксический иммунитет, так как они индуцируют синтез антитоксических антител - антитоксинов.

В настоящее время применяются: дифтерийный, столбнячный, ботулинический, стафилококковый анатоксины, холероген-анатоксин. Их получают путем выращивания глубинным способом в ферментаторах возбудителей столбняка, дифтерии, ботулизма и других микроорганизмов, в результате чего в культуральной жидкости накапливаются токсины. После отделения микробных клеток сепарированием культуральную жидкость (токсин) обезвреживают формалином в концентрации 0, 3=0, 4 % при 37˚ C в течение 3-4 нед. Обезвреженный токсин – анатоксин, потерявший токсичность, но сохранивши антигенность, подвергают очистке и концетрированию, стандартизации и фасовке. К очищенным анатоксинам добавляют консервант и адъювант. Такие токсины называются очищенными сорбированными. Дозируют анатоксин в антигенных единицах (ЕС – единица связвания, LF – флоккуляционная единица).

Титрование анатоксинов в реакции флоккуляции (по методу Рамона) производят по стандартной флоккулирующей антитоксической сыворотке, в которой известно количество Международных антитоксических единиц (ME) в 1 мл.

Анатоксины выпускаются в виде монопрепаратов и в составе ассоциированных вакцин, предназначенных для иммунизации против нескольких заболеваний.

Препараты, предназначенные для проведения иммунизации против одной какой-либо инфекции, получили название моновакцины, против двух инфекционных заболеваний— дивакцины, против трех — тривакцины, против нескольких инфекций — поливакцины.

Достоинства анатоксинов в то, что они в принципе не могут вызвать инфекционное заболевание и могут быть использованы для вакцинации ослабленных детей, детей с хроническими заболеваниями и детей с иммунодефицитами.

7.

Иммунные сыворотки. Классификация. Получение, очистка, применение. Антитоксические сыворотки. Получение, очистка, титрование, применение, осложнения при использовании и их предупреждение

К сывороточным иммунным препаратам относятся иммунные сыворотки и иммуноглобулины.

Эти препараты обеспечивают пассивную невосприимчивость к возбудителям инфекционных болезней. Иммунные сыворотки получают из крови гипериммунизированных (интенсивно иммунизированных) животных (лошади, ослы, кролики) соответствующей вакциной или крови иммунизированных людей (используется донорская, плацентарная, абортная кровь). Нативные иммунные сыворотки для удаления из них балластных белков и повышения концентрации антител подвергают очистке, используя различные физико-химические методы (спиртовой, ферментативный, аффинная хроматография, ультрафильтрация).

Иммунные сывороточные препараты, полученные из крови животных, называют гетерологичными, а из крови людей – гомологичными. Активность сывороточных препаратов выражают в титрах антител – антитоксинов, гемагглютининов, комплементсвязывающих, вируснейтрализующих и т.д.

Сывороточные иммунные препараты применяются для специфического лечения и экстренной профилактики. Основной механизм лечебного и профилактического действия сводится к связыванию и нейтрализации антителами бактерий, вирусов и их антигенов, в том числе токсинов в организме. В связи с этим различают противовирусные, антибактериальные, антитоксические иммунные сывороточные препараты.

Сывороточные препараты вводят внутримышечно, подкожно, иногда внутривенно. Эффект от введения препарата наступает сразу после введения и продолжается 2-3 нед. (гетерологичные антитела) до 4-5 нед. (гомологичные антитела). Для исключения возникновения анафилактической реакции и сывороточной болезни препараты вводят по методу Безредки.

Гомологичные сывороточные препараты широко применяют для профилактики и лечения вирусного гепатита, кори, для лечения ботулизма, столбняка, стафилококковых и других инфекций. Гетерологичные сывороточные препараты имеют строго ограниченное применение из-за опасности аллергических осложнений при их введении.

В последнее время получены иммунные препараты на основе моноклональных антител. Однако они еще не нашли широкого лечебного и профилактического применения, а используются пока в диагностических целях.

Антитоксические сыворотки содержат антитела против экзотоксинов. Их получают путем гипериммунизации животных (лошадей) анатоксином. Активность таких сывороток измеряется в АЕ (антитоксических единицах) или МЕ (международных единицах) - это минимальное количество сыворотки, способное нейтрализовать определенное количество (обычно 100 DLM) токсина для животных определенного вида и определенной массы.

В настоящее время в России широко используются следующие антитоксические сыворотки - противодифтерийная, противостолбнячная, противогангренозная, противоботулиническая, причем применение антитоксических сывороток при лечении соответствующих инфекций является обязательным.

Титрование антитоксических сывороток может проводиться тремя методами — Эрлиха, Ремера, Рамона. Метод Эрлиха - перед титрованием сывороток определяют условную смертельную (опытную) дозу токсина. За опытную дозу токсина (Lt) принимается то его количество, которое в смеси с 1 ME стандартной сыворотки вызывает гибель 50% взятых в опыт животных. На втором этапе титрования к различным разведениям испытуемой сыворотки добавляют опытную дозу токсина, смесь выдерживают 45 мин и вводят животным. По получаемым результатам производят расчет титра испытуемой антитоксической сыворотки.

По методу Ремера титруется противодифтерийная сыворотка.

Обязательно проводится проба на чувствительность к чужеродному белку, так как антитоксическая сыворотка гетерогенна. Если проба положительная, то проводится (в присутствии врача) предварительная десенсибилизация, затем вводят необходимую дозу сыворотки под прикрытием кортикостероидов. От сыворотки могут возникнуть различные осложнения, наиболее опасное из них — анафилактический шок. На вторую неделю заболевания может развиться сывороточная болезнь. Существует альтернатива антитоксической сыворотке — нативная гомологичная плазма (вводят по 250 мл 1—2 раза в сутки).

Антитоксические сыворотки: противодифтерийная, противостолбнячная. Широко используются следующие: противогангренозная, противоботулиническая. Применение антитоксических сывороток при лечении соответствующих инфекций обязательно.