Главная страница Случайная страница
КАТЕГОРИИ:
АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника
Самостійна аудиторна робота. А) Охарактеризувати розщеплення вуглеводів у ШКТ за схемою. Вуглеводи Фермент, який каталізує розщеплення Місце дії фермента Продукти
|
|
І. Виконати вправи:
А) Охарактеризувати розщеплення вуглеводів у ШКТ за схемою.
| Вуглеводи | Фермент, який каталізує розщеплення | Місце дії фермента | Продукти гідролізу |
2. Виконати лабораторну роботу “Визначення активності амілази слини” і захистити протокол.
Принцип методу. Метод базується на визначенні найменшої кількості амілази (при максимальному розведенні слини), яка повністю розщеплює увесь добавлений крохмаль. Амілазна активність слини виражається кількістю 0, 1% р-ну крохмалю в мл, який розщеплюється 1 мл нерозведеної слини при температурі 38оС протягом 30 хв. В нормі амілазна активність слини дорівнює 160-320. Амілазна активність позначається А 38/30. Цей метод широко використовується для визначення амілазної активності крові і сечі.
Хід роботи. В 10 пробірок наливають по 1 мл води і в 1-у з них добавляють 1 мл розведеної в 10 раз слини. Вміст цієї пробірки перемішують, кілька разів втягуючи і випускаючи рідину з піпетки. Набирають в піпетку 1 мл суміші і переносять її в 2-у пробірку. Вміст цієї пробірки перемішують і 1 мл суміші переносять в 3-тю пробірку і т.д. до 10 пробірки. З 10-ї пробірки відбирають 1 мл суміші і виливають. У всі пробірки доливають по 1 мл води і по 2 мл 0, 2% р-ну крохмалю, перемішують, струшують, пробірки поміщають в термостат при температурі 38оС на 30 хв. Після інкубації пробірки охолоджують водопровідною водою, добавляють по 1 краплі 0, 1% р-ну йоду і перемішують. При реакції з йодом рідина в пробірках забарвлюється в жовтуватий, рожевий, фіолетовий колір. Відмічають останню пробірку з жовтуватим забарвленням, де гідроліз крохмалю пройшов повністю і роблять розрахунок. Отримані дані заносять в таблицю:
Таблиця
Гідроліз крохмалю в присутності ферментів слини
При різному її розведенні
| Забарвле-ння розчину з йодом | Розведення слини | ||||||||||||||||||
| 1: 20 | 1: 40 | 1: 80 | 1: 160 | 1: 320 | 1: 640 | 1: 1280 | 1: 2560 | 1: 5120 | 1: 10240 | ||||||||||
| Пробірки | |||||||||||||||||||
| 1-а | 2-а | 3-я | 4-а | 5-а | 6-а | 7-а | 8-а | 9-а | 10-а | ||||||||||
Розрахунок. Відмітивши пробірку, де гідроліз крохмалю пройшов повністю при найменшій кількості фермента, по кількості нерозведеної слини в даній пробірці розраховують амілазну активність слини по наступній пропорції: А мл слини розщепило 2 мл 0, 1% р-ну крохмалю; 1 мл слини розщепив х мл 0, 1% р-ну крохмалю,
де А - кількість нерозведеної слини.
Наприклад, жовтувате забарвлення з’являється в 4-й пробірці, де слина була розведена в 160 разів; 1/160 мл слини розщепила 2 мл 0, 1% р-ну крохмалю;
1 мл нерозведеної слини розщепив х мл 0, 1% р-ну крохмалю:
2 х 1 х 160
х = -------------- = 320 мл 0, 1% р-ну крохмалю.
Отже, амілазна активність слини А 38/30 дорівнює 320.