Метод выявления колиформных бактерий

9.1.1 Навеска и исходное разведение

Отбор навесок и приготовление исходного разведения - по ГОСТ 26669.

9.1.2 Инокуляция и инкубация

9.1.2.1 В зависимости от требуемых пределов выявления см жидкой пробы или см исходной суспензии при использовании других продуктов переносят в пробирку, содержащую 10 см обогатительной селективной среды двойной концентрации [см. таблицы 1а, 2а, 3а], когда 1 см 10 см , или в пробирку, содержащую 10 см обогатительной селективной среды нормальной концентрации [см. таблицы 1б, 2б, 3б], если 1 см .

При испытании высококислотных продуктов для предотвращения резкого снижения рН (на 0, 5 и более) питательных сред после внесения в них продукта или его разведения рН питательных сред доводят до допустимых значений с помощью стерильного раствора гидроокиси натрия, приготовленного по ГОСТ 10444.1, или при приготовлении питательных сред рН устанавливают выше заданного с учетом его последующего снижения при внесении продукта. Количество добавляемого стерильного раствора гидроокиси натрия или величину, на которую необходимо увеличить рН при приготовлении питательных сред, устанавливают опытным путем.

Допускается доводить рН до нейтрального значения с помощью стерильного раствора гидроокиси натрия в самом высококислотном продукте.

9.1.2.2 Пробирки с посевами в среду двойной концентрации (см. 9.1.2.1) инкубируют при температуре (37±1) °С в течение (24±2) ч.

9.1.2.3 Пробирки с посевами в среду нормальной концентрации (см. 9.1.2.1) инкубируют при температуре (37±1) °С в течение (24±2) ч. Если нет образования газа или помутнения, затрудняющего выявление газа, продолжают инкубацию еще (24±2) ч.

9.1.3 Подтверждение

9.1.3.1 Из пробирок (см. 9.1.2.2) после инкубации инокулируют петлей подтверждающую среду нормальной концентрации (см. 6.1-6.4). Посевы инкубируют в термостате при температуре (37±1) °С в течение (24±2) ч, если нет образования газа, то продолжают наблюдение до (48±2) ч.

В качестве арбитражной среды используют бриллиантовый зеленый лактозный желчный бульон.

9.1.3.2 Повторяют процедуру, описанную в 9.1.3.1, для пробирок после инкубации по 9.1.2.3, в которых отмечено образование газа или помутнение, препятствующее выявлению образования газа, после (24±2) ч или после (48±2) ч инкубирования.

9.1.4 Оценка результатов

Возможные случаи оценки результатов приведены в приложении А.

Пробирки по 9.1.3.1 или 9.1.3.2, в которых отмечено образование газа после (24±2) ч или после (48±2) ч, считают положительными.

При выявлении колиформных бактерий отмечают присутствие или отсутствие их в навеске г или см продукта.