Практичне заняття №11

Тема: «Серологічні реакції (1 заняття)»

1. Актуальність теми:

Методика лікування інфекційного захворювання визначається біологічними особливостями збудника. Тобто, лікар має не тільки поставити клінічний діагноз, але і визначити, який мікроорганізм викликав інфекцію. Етіологічна діагностика багатьох інфекційних захворювань основана на виділенні чистої культури збудника та визначенні її видової належності. Ідентифікація більшості бактерій та вірусів базується на визначенні специфічних антигенів, що потребує проведення серологічних реакцій. Метою такого дослідження є серологічна ідентифікація. Крім того, діагностика інфекційних захворювань може ґрунтуватись на виявленні специфічних мікробних антигенів безпосередньо в матеріалі хворого (крові, лікворі, сечі, ін.), особливо у випадку неможливості культивування збудників і ідентифікації їх іншими методами.

З іншого боку, імунна відповідь організму проявляється, зокрема, формуванням специфічних антитіл до кожного окремого виду збудника. Це дозволяє поставити етіологічний діагноз шляхом виявлення цих антитіл. Для цього проводиться постановка серологічної реакції з метою серологічної діагностики.

2. Конкретні цілі:

· Ознайомитись із метою застосування серологічних реакцій (СР).

· Вивчити препарати, що застосовуються з метод серологічної ідентифікації.

· Ознайомитись із особливостями реакцій аглютинації та преципітації.

· Оволодіти методикою постановки реакції аглютинації на склі та розгорнутої реакції аглютинації (РА).

· Засвоїти методику постановки реакції преципітації (РП).

3. Базові знання, вміння, навички, необхідні для вивчення теми (міждисциплінарна інтеграція). Дивись практичне заняття №10.

4. Завдання для самостійної роботи під час підготовки до заняття

4.1. Перелік основних термінів, параметрів, характеристик, які повинен засвоїти студент на занятті:

4.2. Теоретичні питання до заняття:

· Філогенетичні особливості формування імунної системи тварин.

· Центральні та периферичні органи імунної системи, їх функції

· Імунокомпетентні клітини, їх функції.

· Дати визначення поняттям: антигени, антигенність

· Антигенна будова бактеріальної клітини на прикладі E.coli

· Будова та функції імуноглобулінів

· Особливості взаємодії антигенів та антитіл

· Серологічні реакції, відмінності простих та складних СР.

· Цілі серологічних реакцій

· Компоненти серологічної реакції, поставленої з метою сероідентифікації

· Реакція аглютинації - визначення

· Реакція преципітації - визначення

· Імунні діагностичні сироватки, використання та етапи їх отримання.

4.3. Практичні завдання, які виконуються на занятті:

· Здійснити постановку реакції аглютинації на склі із адсорбованими сироватками, провести її облік.

· Здійснити постановку реакції преципітації в рідкій фазі, провести її облік.

· Поставити розгорнуту реакцію аглютинації з метою сероідентифікації культури бактерій.

· Вивчити зразки імунних діагностичних сироваток.

5. Зміст теми.

На практичному занятті студенти мають ознайомитися із поняттям серологічних реакцій, визначити мету постановки та компоненти СР, ознайомитись із особливостями реакцій аглютинації та преципітації. Студенти проводять постановку реакцій аглютинації на склі із адсорбованими сироватками та преципітації в рідкій фазі, здійснюють облік. Розбирають особливості обліку розгорнутої реакції аглютинації, проводять постановку розгорнутої РА з метою серологічної ідентифікації. Виконані завдання студенти заносять в протокол та підписують його у викладача.

Рекомендації для оформлення протоколу.

5.1. Реакція аглютинації на склі

Матеріали:

· Культура бактерій

· Адсорбована імунна діагностична сироватка для РА на склі

· 0, 5% розчин NaCl

· Предметне скло, бак. петля

Хід роботи:

Облік результаті: Позитивна реакція – утворення аглютинату.

5.2. Розгорнута реакція аглютинації, яка поставлена з метою серологічної ідентифікації культури бактерій

Матеріали:

· Культура бактерій (суспензія)

· Імунна діагностична сироватка в робочому розведенні (1: 50), титр - 1: 3200

· 0, 5% розчин NaCl

· Пробірки, піпетки

Хід роботи:

Облік результатів. Позитивний результат – утворення аглютинату;

Матеріали: Антиген (преципітиноген);

Сироватка (преципітин) - №1, №2, контрольна (№3);

Піпетки;

Хід роботи:

Облік результатів.

Позитивна реакція – утворення кільця преципітація (помутніння).

5.4. Препарати імунних діагностичних сироваток.

Питання для самоконтролю.

· Які органи імунної системи відносяться до центральних та периферичних, їх функції?

· Які клітини відносяться до імунокомпетентних, їх функції?

· Які клітини приймають участь у синтезі антитіл, характер їх кооперації?

· Дати визначення поняттям: антигени, антигенність.

· Які антигени має бактерія (на прикладі E.coli)?

· Будова та функції імуноглобулінів.

· Що таке серологічні реакції, відмінності простих та складних СР?

· З якою метою може бути поставлена серологічна реакція?

· Реакція аглютинації – визначення.

· Реакція преципітації – визначення.

· Які складові простих СР?

· Які етапи включає в себе отримання імунних діагностичних сироваток?