цКЮБМЮЪ ЯРПЮМХЖЮ яКСВЮИМЮЪ ЯРПЮМХЖЮ
йюрецнпхх:
юБРНЛНАХКХюЯРПНМНЛХЪаХНКНЦХЪцЕНЦПЮТХЪдНЛ Х ЯЮДдПСЦХЕ ЪГШЙХдПСЦНЕхМТНПЛЮРХЙЮхЯРНПХЪйСКЭРСПЮкХРЕПЮРСПЮкНЦХЙЮлЮРЕЛЮРХЙЮлЕДХЖХМЮлЕРЮККСПЦХЪлЕУЮМХЙЮнАПЮГНБЮМХЕнУПЮМЮ РПСДЮоЕДЮЦНЦХЙЮоНКХРХЙЮоПЮБНоЯХУНКНЦХЪпЕКХЦХЪпХРНПХЙЮяНЖХНКНЦХЪяОНПРяРПНХРЕКЭЯРБНрЕУМНКНЦХЪрСПХГЛтХГХЙЮтХКНЯНТХЪтХМЮМЯШуХЛХЪвЕПВЕМХЕщЙНКНЦХЪщЙНМНЛХЙЮщКЕЙРПНМХЙЮ
аКТИВАЦИЯ КАЛИЕВЫХ КАНАЛОВ g-БЕЛКАМИ
|
|
Замедление сердцебиений под действием ацетилхолина, впервые исследованное Леви более 70 лет назад (глава 9), опосредовано метаботропным рецептором — мускариновым ацетилхолиновым рецептором. Мускариновые рецепторы получили свое название потому, что они селективно активируются мускарином; ионотропные АХ рецепторы селективно активируются никотином и потому называются никотиновыми (главы 3 и 9). Активация мускариновых рецепторов в сердце приводит
Глава 10. Механизмы непрямой синоптической передачи 195
| Рис. 10.5. Локальный примембранный эффект G бел ков с прямым механизмом действия. (А) Эффекты АХ исследовались с помощью пэтч-кламп регистрации в конфигурации cell-attached. AX может быть добавлен либо в регистрирующую пипетку, либо в наружный раствор (В) Записи токов через одиночные каналы до и после добавления АХ. Активность каналов возрастала лишь при добавлении АХ в пэтч-пипетку. Fig. 10.5. Direct or Membrane-Delimited, Effects of G Proteins operate over short distances. | 
(A) Effects of ACh were assayed by cell-attached patch clamp recording. Acetylcholine could be perfused into either the patch pipette or the bath. (B) Recordings of single-channel currents before and during addition of ACh. Compared with the control channel activity increased only when ACh was added to the patch pipette. (After Soejima and Noma, 1984.)
|
к открыванию калиевых каналов 17), вызывая гиперполяризацию.
В ряде экспериментов было показано, что открывание калиевых каналов, происходящее при активации мускариновых рецепторов, опосредовано G-белками 18· 19). Так, было обнаружено, что для активации калиевых каналов необходима внутриклеточная ГТФ 20), что активация калиевых каналов мускариновыми агонистами значительно продляется при внутриклеточном введении негидролизируемого аналога ГТФ — Gpp(NH)p 21) и что мускариновая активация калиевых каналов блокируется коклюшным токсином, который инактивирует Gi-белки 20). Важная информация о механизмах активации калиевых каналов в кардиомиоцитах была получена Клэпхамом и сотрудниками в экспериментах на изолированных участках мембраны. Используя конфигурацию inside-out, они показали, что при аппликации очищенной bg -субъединицы с внутренней стороны мембраны происходит открывание калиевого канала (рис. 10.4) 22). Этот эксперимент продемонстрировал, что bg -субъединица ответственна за открывание калиевого канала. Последующие эксперименты с клонированным мускарин-активируемым калиевым каналом (GIRK1) показали, что bg -субъединица взаимодействует с калиевым каналом напрямую (см. рис. 10.4В) 23· 24). Интересно то, что при регистрации в конфигурации cell-attached калиевые каналы активируются при добавлении мускариновых агонистов в пипетку, добавление же мускариновых агонистов в наружный раствор не приводит к активации каналов в регистрируемом участке мембраны (рис. 10.5) 25). Таким образом, активированная bg -субъединица не в состоянии преодолеть зону контакта между пипеткой и мембраной, что свидетельствует о весьма ограниченном радиусе действия активированной bg -субъединицы.